158163. lajstromszámú szabadalom • Eljárás dezocisztreptamin származékok és savas addiciós sóik előállítására
19 158163 20 eluátumot vákuumban 90 liter térfogatra betöményítjük, a pH-j-át híg kénsavval 6,0-re beállítjuk és 1 órán át 12 kg aktív szénnel és 12 kg diatoma-földdel keverjük, majd szűrjük. A szűrŐle-5 pényt vízzel addig mossuk, amíg az eredeti szűredék és a mosóvizek térfogata együttesen 832,8 liter lesz. Ezt az oldatot vákuumban 30,3 liter térfogatra betöményítjük, majd szűrjük és liofilizáljuk. A termék, az ámbutirozin szulfát-sója, 10 melynek fajlagos forgátóképessége [a]o25 = +29,8° (2%, vízben). Mikroanab'zis alapján a termék 32,00% szenet, 6,36% hidrogént, 9,08% nitrogént és 8,14% ként tartalmaz. A mikroanalitikai értékek a C21 H 41 iN50 12 • 2HäS04 • 2H20 15 képletre számítva: 32,02% szén, 6,i27% nidrogén, 8,89% nitrogén és 8,14% kén. ' . fogat% glicerint is tartalmaz. A táptalaj, melynek pH-ja 7,5, még polipropilénglikol habzásgátlószert is tartalmaz. Ebből a táptalajból két, 7571 liter térfogatú fermentor mindegyikébe beadagolunk 4542,5 litert, a táptalajt hővel sterilizáljuk, majd lehűtjük és beoltjuk 567,8 liter növekedésben levő 24 órás tenyészettel, amely a IV. lépésből származik. A fermentációt 120 órán keresztül 28—-31 C° hőmérsékleten valósítjuk meg 1699,2 liter/perc levegőztetés közben és szükség esetén további habzásgátlószer hozzáadásával. A termék elkülönítése és tisztítása: a fermentleveket egyesítjük és az egyesített fermentleveket, ennek térfogata 10 453 liter, 1—V'2 órán át 508 liter ammónium formában levő karboxilgyantával keverjük. A gyantát az adszorbeált anyaggal leülepítjük és vízzel a szuszpendált szilárd anyagoktól mentesre mossuk. A mosott gyantát betöltj ük egy oszlopba, amely alsó rétegként már 46 liter ammónium formában levő friss karboxil-gyantát tartalmaz. Az oszlopot 11 356,2 liter 0,1 mólos ammóniumhidroxid-oldattal mossuk a szennyezések eltávolítása céljából, majd az ámbutirozin terméket 3785,4 liter 1 mólos ammóniumhidroxid-oldattal végzett eluálással távolítjuk el. Ezt az eluátumot vákuumban 121,1 liter térfogatra betöményítjük, a pH-ját híg kénsavval 7-re beállítjuk és szűrjük. Az L, II., III., IV. és V. lépésekben leírt műveleteket és a fent leírt elkülönítési eljárást megismételve egy második tömény ambutirozineluátumot kapunk, ennek térfogata 215,8 liter. Ezt az eluátumot híg kénsavval pH = 7 értékre állítjuk be és szűrjük. A további eljáráshoz a két eluátumot egyesítjük és így olyan oldatot kapunk, melynek térfogata 336,9 liter. Az egyesített oldatot vízzel 1135,6 liter térfogatra hígítjuk és 900 ml/perc sebességgel átvezetjük egy oszlopon, amely 30 liter ammónium formában levő karboxil-gyantát tartalmaz. A gyantát 56,8 liter vízzel mossuk, majd felviszszük egy 30,48 cm átmérőjű üvegből készült oszlop tetejére, amely 91 liter friss gyantát tartalmaz. Az így megtöltött oszlopot 7381,5 liter 0,1 mólos ammóniumhidroxid-oldattal mossuk a szennyezések eltávolítása céljából, majd az ámbutirozin terméket 1514,2 liter 1 mólos ammóniumhidroxid-oldattal végzett eluálással távolítjuk el, miközben frakciókat gyűjtünk össze. Az 1 mólos ammóniunihidroxid-oldat első 673,8 liternyi része tartalmazza az ámbutirozin főtömegét. Ezt vákuumban betöményítjük az ammónia eltávolítása végett. További tisztítás céljából a terméket 35 liter ammónium formában levő friss gyantán adszorbeáljuk, és ezt a gyantát felvisszük egy 30,48 cm átmérőjű oszlop tetejére, amely 105 liter friss gyantát tartalmaz. Az így megtöltött oszlopot 7570,8 liter 0,f mólos ammóniumhidroxid-oldattal mossuk a, szennyezések eltávolítása céljából, majd az ámbutirozin terméket 757,1 liter 1 mólos ammóniumhidroxidoldattal végzett aluálással távolítjuk el. Ezt az Az ámbutirozin savas addíciós sóit át lehet alakítani szabad bázissá, vagy valamilyen bázissal, mint pl. nátriumhidroxiddal, káliumkarbonáttal vagy káliumhidrogénkarbonáttal hidegen végzett enyhe kezelés útján, vagy pedig ioncserélő-eljárással, így például a szulfát-só vizes oldatát átvezetjük valamilyen hidroxid-formában levő erős anioncserélő gyantán. Erősen térhálósított gyantát, mint pl. Dowex 1 X 16-ot vagy hasonló gyantát használhatunk. A terméket úgy alakítjuk át szabad bázis formájúvá, hogy az oldatot a gyantán átvezetjük és a gyantát vízzel mossuk. Egy másik eljárásváltozat szerint a szulfát-só vizes oldatát felvisszük egy oszlopra, amely ammónium-formában levő karboxil-gyantát tartalmaz. Az adszorbeált anyagot tartalmazó gyantát vízzel és kis mennyiségű 0,1 mólos ammóniumhidroxid-oldattal mossuk, majd az ámbutirozin bázist az oszlopról 1 mólos ammóniumhidroxid-oldattal eluáljúk. 6,169 g ámbutirozin és 5,911 g formaldehidbiszulfit-nátrium 20 ml vízzel készült oldatát 2 napon keresztül állni hagyjuk. Ezután keverés közben 210 ml metanolt adunk hozzá. A gumiszerű terméket addig trituráljuk, amíg szilárd anyaggá válik. Ezt a szilárd terméket összegyűjtjük egy szűrőn és metanollal mossuk. A termék az ambutirozin-tetra-(N-metánszulf onsav)-ná triumsója. Tisztítás céljából ezt vízben újból oldjuk és metanol hozzáadásával ismét kicsapjuk. Az ,ambutirozin-tetra,-(N-metánszulfonsav) megfelelő káliumsóját hasonlóképpen állítjuk elő formaldehid-biszulfit-káliummal. Az ambutirozin-tetra-(N-metánszulfonsav) ezen alkálifémsói gyógyszerészeti szempontból elfogadható származékok, melyek ugyanolyan baktériumellenes hatással rendelkeznek, mint maga az ámbutirozin. 4. példa . Az előző példák bármelyike szerint előállított ambutirozint szét lehet választani ámbutirozin A és ámbutirozin B komponensekre a következő eljárással. Borát formában levő ioncserélő gyantát készítünk a következőképpen: 3 liter klorid formában levő erős anioncserélő gyantát betoltunk egy 5,08 cm átmérőjű üvegoszlopba. 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 10
