157693. lajstromszámú szabadalom • Stabilis reagens-elegy
5 157693 6 es, hidrogén formájú Dowex 50 (50—100 mesh) gyanitaosztopon boesáj!tjük keresztül. Az oszlopot ezután 200 ml vízzel mossuk. Az oszlopról elfolyó oldathoz 3 mólos trisz^hidiroximetil)-amiiiametián-oidaitiolt adunk pH 8,5-ig. A keletkező oldatot 50 mil-re •befcömiényltjük, majd keverés és hűtés közben 200 ml metanol és 200 ml aoeton elegyét adjuk hozzá. Az elegyet ezután 24 órán keresztül 4 C°-ion tartjuk, majd a kristályos termiekéit ösiszegyűjitjük és szobahőmérsékleten vákuumban szárítjuk. A nyerstermékeit oly módon kristályosítjuk át, hogy 10 g-ját 30 ml vízben feloldjuk és hozzáadunk 100 ml metanolt és 100 ml aeeitont. Az elegyet 4 órán át hűtjük, a tertméikat összegyűjtjük és szobahőmérsékleten vagy vákuumban szárítjuk. Hozam: 8,5 g. 3. példa: Ha az 1. példa szerinti eljárásiban a -oifclöhexilamint az aüláblbi aminokfcal helyettesítjük, a felsorolt termékekéit kapjuk. Aminők metilamin eitilamin dimetiiamin trimeitilaimin monob enzilamim furfurilamiin anilán dietan diamin diimorfolin Stabilizált p-NPP p-NPP-iroatilaimin-só p-NPPnetilam'in-só p-NPP^dimétilamin-só p-NPP-itrimeítilamiiusó. p-NPP-imonobenzilamin-só p-NPP-furfurilaman-só p-NPP-anilin-só p-NPP-dietamölamiin-só p-NPP-dimorfolin-s ó A p-nitrafenolát felszabadításának sebességéit A. A Betssey, O. H. Loury és H. J. Brodk módszenével [J. Biol. Cbem. 164, 321 (1946)] és L. A. Bessey és R. H. Love módszerével [J. Biol. Ohem. 196, 175 (1952)] szabályozzuk. 5 4. példa: p-Nitrofenol felszabadulásának vizsgálajta p-NPP-sókibál különböző környező körűimé-10 nyék között. a) Minden sóból kim érünk 3 db 100 mg-os mintáit. b) Minden p-NPP-só egy mintáját száraz 15 exszikfcátarba helyezzük; a második mintát exszikkátoiiban, telfitieitt aramióniiumszulfáfc-oldat fölé helyezzük, az oldalt konstans nedvességtartalmat biztosít; a harmadik mintát környezeti hatásoknak tesszük ki. 20 c) A mintákat 48 órán át a fenti körülmények köziöítt tartjuk. d) Minden minftáit feloldunk 5 ml vízben (a szabad p^niítrofienol fal fog oldódni 5 ml H2 0~ 25 ban), ha az oldódás nem teljes, a szilárd anyagólt el/távolítjuk. e) 0,05 ml mintát kvarc küvettába pipettázunk és hozzáadunk 2y 5 ml 10,2 pH-éritiákű puffert. A puffert úgy készítjük hogy 8 g 30 Na2 C0 3 -,at, 2 g NaHCOg-ait és 300 mg Mg-gllubaimátat 1 liter H2 04>an feloldunk. f) Ezután a kapott oldaít optikai sűrűségélt spektrofotométeren 405 m/x-on leolvassuk 35 (A40 5). A szabad p-nitrofenol mennyiségéit a % szabad p-mitrofenol = A405 • 0,228 képlelt alapján számítjuk ki. A kapott eredmé-40 nyéket az alábbi táfbMzaltibam adjuk mieg. % szabad nitrofenol 1. sorozat Só Kezdeti szolba 2. sorozat 3. sorozat körülmények száraz nedwes p-NPP-dmátrium 0,01 0,04 0,28 0,04 p-NPP-eítilaimiin 0,009 0,07 0,07 0,07 p-NPP-Mieltífesmán 0,014 0,09 0,10 0,09 p-NPP^diimettlillamin 0,006 0,07 0,11 0,20 p-NPP-*riimetilafffin 0,004 0,15 0,14 0,11 p-NPP-monoetanolamin 0,007 0,05 0,04 0,05 p-NPP-morfolin 0,016 0,13 0,11 0,15 *p-NPP-monobenzilamin 0,035 0,06 0,05 0,05 *p-NPP-furfurilámiin 0,01 0,04 0,04 0,04 »p-NFP^anilin 0,016 0,05 0,04 0,04 p-NPP-4risz 0,005 0,02 0,02 0,02 p-NPP-itirisz (szárított;) — 0,04 0,04 0,04 p-NPP-ciklöihexilamin 0,007 0,03 0,02 0,03 * nem oldódik teljesen. 3
