157501. lajstromszámú szabadalom • Eljárás citotetrinek előállítására

157501 3 4 Szubsztrátmicélium színcsoport: f lavus-brunus. ,, ,.,;.., Spóratartók típusa: sok kanyarulata, többékevésbé szabályos spirális. Spórafelület (elektr. opt.) tüskés. Keményítőragar:, légmicélium „Gray-series, 5 fe",. a szubsztrátmicélium „Yellow, CO 37—C9", oldódó pigment nincs. A spótatartókban kb. 1—3% retinaculum apertum és 97—99% spirál. Glicerin-aszparagin agar: a légmicélium „Gray series, d-2ih", szubsztrátmicélium „Yellow, Co 38—C10"-ig, oldódó pigment nincs. A spóratartók kb. 10%-ban retinaculum apertum, kb. 90%-ban spirál típusúak. A légmicélium kissé higroszkópos. Kromogenitás-próba vaspepton-agaron: negatív. Nitrát redukció: negatív (megjegyzendő, hogy két hét tenyésztés után nemcsak nitrit, de nitrát sem volt kimutatható). Zselatin-tápközeg: légmicélium nincs, ill. legfeljebb nyomokban és fehéres. Fejlett, sárga, ráncos szubsztrátmicélium. Oldódó pigment nincs (melamin képzés hiánya). Erőteljes folyósítás. C-forrás értékesítés: d-glukóz (pozitív kontr.) pozitív (+++) C nélkül (negatív kontr.) negatív (~) 1-arabinóz pozitív (++) d-fruktóz pozitív '(+++) d-mannit pozitív (+++) raffinóz negatív (_

) ramnóz pozitív (+++) szacharóz negatív (—

) d-galaktóz pozitív (+++) inulin negatív (~) szalicin negatív •(—) d-szorbit negatív (—

) laktóz pozitív (+++) inozit pozitív (++) d-xilóz pozitív (++) trehalóz pozitív (++) melibióz negatív (—

), Burgonya-'agar: igen fejlett, porszerű, hamuszürke légmicélium, fejlett, ráncos, sárgásbarna szubsztrátmicélium, sárga, oldódó pigment. Gauze-féle keményítő-agar: fejlett, porszerű, hamuszürke légmicélium, gazdagon belepve fehér, gyapjas „szekunder" légmicéliummal, világos sárga, az agárba lassan benövő szubsztrátmicélium, oldódó pigment nincs, vagy csak halvány vörös. Nutrient-agar: igen fejlett, porszerű, vöröses szürke légmicélium, fejlett, gyűrt, vöröses árnyalatú sárga, vörösesbarna szubsztrátmicélium, piros, oldódó pigment. Jensen-féle kazein-agar: légmicélium nyomokban, színtelentől világos sárga, lepelszerű szubsztrátmicélium, oldódó pigment nincs. Szacharóz-nitrát-agar: hamuszürke, porszerű légmicélium, gyenge, színtelen, ill. világos sárga szubsztrátmicélium, oldódó pigment nincs. Szintetikus agar: erőteljesen fejlett, porszerű, hamuszürke légmicélium, fejlett, gyűrt, vörösessárga szubsztrátmicélium. Vörösessárga, oldódó pigment. Glukóz-aszparagin^agar: fejlett, hamuszürke, porszerű légmicélium, fejlett, színtelentől világos sárgái .szubsztrátmicélium. Oldódó pigment nincs. Tripton-élesztőkivonat-agar: porszerű, hamuszürke légmicélium, színtelen, lepelszerű szubsztrátmicélium, oldódó pigment halvány vörös. Zabpehely-agar: porszerű, hamuszürke légmicélium, fejlett, élénksárga szubsztrátmicélium, világos sárga, oldódó pigment. A fent ismertetett bakteriológiai tulajdonságok alapján az S-l91 jelzésű sugárgomba törzset a Streptomyces griseoflavus faj „CBS-Cifferi" neotypus törzsével (BUCSAV 7,13) lehet azonosítani. Ez a törzs a fenti adatok alapján határozottan megkülönböztethető a nogalamicint termelő. Streptomyces nogalater var. nogalatertől és a rubidiomicint termelő Streptomyces rubrireticulitól. Mindkét utóbbi törzsre a sima spórafelület és az egyenes spóratartók a jellemzőek, szemben a Streptomyces griseoflavus faj „CBSCifferi" tüskés spóráival, ill. spirális spóratartóival. A Streptomyces griseoflavus csoportba tartozó sugárgomba fajok által az eddigi ismereteink szerint termelt antibiotikumok mind határozottan különböznek a citotetrintől (Hütter, R.: Systematik der Streptomyceten [Basel, 1967] 287. oldal). Jól ismert tény, hogy a sugárgombák mesterséges, vagy természetes behatásra könnyen megváltoztatják tenyésztési tulajdonságaikat. A találmány szerinti eljárás céljának megvalósítására a Streptomyces griseoflavus „CBS-Cifferi" törzs bármely variánsa vagy mutánsa alkalmas, amennyiben az citotetrin termelésére képes. Ezek a változatok könnyen előállíthatók, ha a sugárgombát pl. röntgen- vagy ultraibolya besugárzásnak vagy kémiai kezelésnek vetjük alá. Az így nyert variánsok egyes morfológiai tulajdonságaiban (spóraképződés, spóra színe, pigmentáció), táptalaj igényében, növekedési sebességében, és a citotetrin termelőképesség mértéke tekintetében kismértékben eltérnek az eredeti törzstől, de az arra jellemző valamennyi alapvető tulajdonsággal rendelkeznek. A fent leírt törzset 1968. március 20-án 44/ 1968 szám alatt az Országos Közegészségügyi Intézetnél letétbe helyeztük. A találmány szerint úgy állítunk elő citotetrint, hogy a Streptomyces griseoflavus „CBSCifferi" törzset vagy ennek variánsait, illetve mutánsait komplex fehérjét, szénhidrátot és ásványi sókat tartalmazó táptalajon aerob körülmények között tenyésztjük, majd a tenyészetből 10 15. 20 25 30 35 40 45 50 55 60 2