156896. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gyengített rubella-vírus előállítására

5 156896 6 végzett biztonsági teszthez. A minta kivétele után megmaradt folyadékhoz újabb stabilizátort adunk, majd a folyadékot ampullákba letöltjük és szárítjuk. A szárítási művelet után az ampullákat lefedjük és leforrasztjuk, majd felhaszná- 5 ' lás előtt a vakcinát steril vízzel hígítjuk. Á vakcina hatékonyságát a szövettenyészetekre kifejtett fertőző jellege alapján határozzuk meg. Ezenkívül, ha gyengített vírust tartalmazó vakcinát parenterálisan majmoknak adagolunk, xo akkor specifikus, a vírust semlegesítő ellenanyagszint legalább egy éven keresztül változatlanjai megmarad. t Az embergyógyászatban a vakcinát úgy pró- 15 báljuk ki, hogy parenterális úton 7 gyermekből álló csoportnak adagoljuk a gyengített rub ellavírust tartalmazó vakcinát. A kísérleti csoportba, olyan gyermekeket válogatunk össze, akik korábban nem estek át rubella fertőzésen. A ki- 20 sérleti csoportban a vírus semlegesítő ellenanyagból (1:6—1:64) igen magas szint alakul ki a fertőzést követő egy hónapon belül. Az ellenanyag titere nagyjából megközelíti a természetes fertőzésen átesett egyedek ellenanyag szint- ?s jét. A kísérleti egyedeknél egyes esetekben gyenge klinikai tünetek tapasztalhatók, így láz, igen enyhe és múló bőrkiütés, valamint klinikai szempontból jelentéktelen lymphodenopatia léphetfel. 30 2. példa: Az 1. példa szerinti eljárást megismételjük, azzal az eltéréssel, hogy a rubellavírust 35—38 Cc között, 36 C°-hoz közeli értéken inkubáljuk. 3. példa: A 2. példa szerinti műveleteket végezzük, azzal az eltéréssel, hogy a vírust három sorozatban 36 C°-on, majd hét sorozatban 32 C°-on inkubáljuk. A kacsaembrió szövettenyészeteken szaporított > vírus további gyengítése céljából 10-nél 45 több, egymás után következő tenyésztési szakaszt állíthatunk be. Az egyes sorozait szaporítási szakaszok történhetnek grivet-majomvese kultúrán, vagy embriót tartalmazó tyúktojásokon is. Ezt a lehetőséget a következő példákon 50 mutatjuk be, amelyekben az egyes jelölések az alábbiakat jelentik: GMK = grivet-majomveúe tenyészet EAM = embriót tartalmazó tyúktojás 55 DEF 1= kacsaembrió szövet-tenyészet. A kiadásért felel: a Közgazdasági 7007440. Zrínyi (T) Nyomda, Budapi 4. példa: 2 GMK+1 EAM+9 GMK+5 DEF (36C°) + +5 DEF (32 C°). 5. példa: 2 GMK+1 EAM+13 GMK+2 DEF (36 C°)+ +8 DEF (32 C°). 6. példa: 2 GMK+1 EAM+17 GMK+10 DEF (32 C°). 7. példa: 21 GMK+3 DEF (36 C°)+7 DEF (32 C°). 8. példa: Kacsaembrió szövet-tenyészetre adaptált rubella-vírustenyészetet háromszor sorba hígítunk, majd a hígított tenyészetet további ilyen szövettenyészetben szaporítjuk a vakcinához szükséges tenyészet előállítására. A találmány szerinti vakcina-előállítási eljárás szemléltetésére szolgáló példákban kacsaembriószövet tenyészeten 10 vagy ennél több szakaszban végzett szaporítást vázoltunk. Ennek a több szakaszos szaporításnak az a célja, hogy a vírus gyengítése nagyobb biztonsággal végbemenjen, belátható azonban az, hogy kevesebb szakaszban végzett szaporítás is, megfelelhet ennek a célnak. Így a találmány oltalmi körébe tartozik olyan eljárás is, amelynek során kacsaembrió-' szövettenyészeten mindössze egy szakaszban inkubálunk. A kívánt tulajdonsággal rendelkező vírus így is előállítható, embergyógyászatban alkalmazva rubella-ellenanyag reakciót vált ki és a megbetegedés komoly szimptómáit enyhíti. Ha a vírus szaporítását több egymást követő szakaszban végezzük, akkor a vírus gyengítése természetesen nagyabb mértékben végbemegy. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás gyengített rubella vírus előállítására, amely embergyógyászatbah ellenanyagreakciót vált ki a rubella vírus ellen a betegség klinikai tüneteinek fellépése nélkül azzal jellemezve, hogy a Virulens vírust kacsaembrió-szövettenyészeten legalább tíz szakaszban 30—38 G° közötti hőmérsékleten tenyésztjük. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy 9—11 napos kacsaembriót használunk. és Jogi Könyvkiadó igazgatója. st V., Balassi Bálint utca 21—23. 3