156753. lajstromszámú szabadalom • Eljárás Digitalis glukozidok oldatainak ballasztanyagokból és szinezékektől való mentesítésére

156753 tek képződése miatt lényegesen kevesebb ballasztanyag jelenlétével, vagy zavaró hatásával kell számolnunk, s így a tisztítási folyamatot elegendő a társglukozidok eltávolításáig folytatnunk, ami több műveleti lépés megtakarítását és az ezekkel járó anyagveszteségek elkerülését teszi lehetővé. A Digitalis lanata extrakícióját igen előnyösen etilacetáttal végezhetjük. Ez az oldószer viszonylagosan kevés ballasztanyagot old ki a drogból, de a kivonat besűrítése után nyert maradék még mindig igen dús a kristályosodást gátló anyagokban. Ellenben, ha az etilacetátos 'kivonást enyhén lúgos közegben, redukálóanyag jelenlétében végezzük, akkor a kivonatunk szárazmaradékának kristályosítását a ballasztanyagok nem zavarják és így tisztább terméket kapunk, s magasabb kitermelést érünk el. Szekunder glukozidok kinyerése esetén pl. a 149.778 és 151.897 sz. magyar szabadalmak szerint eljárva digoxint nyerhetünk. A frakcionált kristályosítás után az anyalúgban maradt digoxin kinyerése a ballasztanyagok miatt csak kromatográfiás úton volt lehetséges. Ismeretes, hogy a Digitalis-glukozidok kromatogratfálása csak igen híg oldatban valósítható meg, így ez a tisztítási mód meglehetősen nehézkes és drága. Ha a frakcionált kristályosítás előtt a glukqzidkoncentrátumot lúgos közegben redukálóanyag hatásának tesszük ki, akkor a ballasztanyagoktól a frakéionálás során a digoxint el tudjuk különíteni és a kromatografálás így feleslegessé válik, ami egyúttal jelentős termelésjavulást eredményez. Találmányunk tárgyát tehát oly eljárás képezi primer, vagy szekunder glukozidok izolálására, amelynek során a szerves oldószerrel végzett extrakciót redukálóanyag jelenlétében végezzük, vagy az extrahált glukozid oldatát redukálóanyag hatásának tesszük ki. Redukálóanyagként előnyösen nátrium-ditionitot, vagy komplex fémhidridet, mint nátrium-foórhidridet, vagy lítiumalumíniumhidridet használhatunk lúgos, célszerűen alkáli-, földalkáli-, vagy ammóniumhidroxidos közegben. Ha acetü-, vagy formil-gyököt is tartalmazó glukozidok kinyerése a célunk, akkor az oldatot 8 pH-ra állítjuk be, más esetben, ha a fenti gyökök változatlanul történő megőrzése nem feladatunk, akkor sokkal erősebben lúgos, 0,1—0,2 normalitású oldatban is dolgozhatunk. Amennyiben szerves oldószeres extrakciót vízzel elegyedő oldószerrel végezzük, úgy a lúgos reagens vizes oldatát elegyítjük az oldószerrel a közeg meglúgosítása céljaiból, amennyiben pedig vízzel korlátlanul nem elegyedő oldószer, pl. etilacetát kerül alkalmazásra, úgy az oldószert a lúgos reagens vizes oldatával telítjük. Ebben a vizes oldatban, illetve a víztartalmú, vagy vízzel telített szerves oldószerben oldjuk a redükálószert is. A redukálóanyag mennyiségét aszerint állapítjuk meg, hogy drog-extrakcióhoz, vagy glukozid-koncentrátum tisztítása során használjuk-e fel. Örült drog extrakciójánál 1—10%-nyi menynyiséget, előnyösen 5%-ot, glukozid-koncentrá-5 tum tisztításhoz az eredeti drog-súly 0,1—1%-át, előnyösen 0,25%-át alkalmazzuk. Találmányunk lehetővé teszi, hogy a Digitalis-drog extrakcióját a glukozidok tökéletes kivonásáig folytassuk, mert a ballasztanyagok 10 kristályosodást gátló befolyása nem érvényesül; a glukozid-koncentrátum redukálása esetén pedig minden eddig ismert eljárásnál jobb termeléssel nyerhetjük ki a glukozidokat. A találmány szerinti eljárás gyakorlati kiviteli 15 módját az alábbi példák szemléltetik: 1. példa: 1000 g őrölt, szárított Digitalis lanata drogot 20 keverés közben beleszórunk 8000 ml etilacetátba, majd a drog-szuszpenzióhoz 120 ml 5%-os vizes ammóniában oldott 25 g nátriumditionitot öntünk és 3 óra hosszat extraháljuk. A drogról leszűrt etilacetátos oldószert csökkentett nyo-25 máson, alacsony hőmérsékleten besűrítjük és a primer Digitalis-^glukozidokat az ismert eljárások valamelyikével kinyerjük. Kitermelés: 2 g Lanatozid ABC. Ha a fenti eljárás során a drog kivonatolását 3" az eddig ismert módszerrel, nátriumditionit-oldat hozzáadása nélkül végezzük, akkor a kivonat azonos módon történő feldolgozása után csak 1,56 g Lanatozid ABC terméket kapunk. 35 2. példa: 1000 g őrölt Digitalis purpurea drogot keverés közben 7000 ml etanolba szórunk, majd hozzáöntünk 300 ml 2%-os vizes ammóniában 40 oldott 50 g nátrium-ditionitöt. Az extrakciót 3 óra hosszat folytatjuk. A drogról leszűrt etanolos oldószerből a digitoxint bármely ismert eljárással kinyerhetjük. Kitermelés: 0,40 g digitoxin. 45 3. példa: 1000 g Digitalis lanata drogot 5000 ml vízben elszuszpendálva 40 C°-on a digilanidáz enzim hatásának tesszük ki, majd a részleges hidrolízis 50 befejeződése után 6000 ml metanollal extrahál, juk. A drogot kiszűrjük és a metanolos vizes kivonathoz 1000 ml 10%-os vizes ólomacetát oldatot öntünk, s 2 órai állás után a képződött csapadékot szűréssel eltávolítjuk. Az így tisztí-55 tott kivonatot 5X200 ml kloroformmal kirázzuk, a kloroformos oldatot szárazra pároljuk. A szárazmaradék acetilezett digoxint, gitoxint és digitoxint tartalmaz, sok ballasztanyag és színezék mellett. A glukozid-koncentrátumot f el-60 oldjuk 40 ml metanol és 5 ml tetrahidrofurán elegyében és hozzáöntünk 5 ml 5%-os vizes nátrium-ditionitöt, majd keverés közben belecsurgatunk 4 ml 0,;2 n káliumhidroxidot. A lúg és a nátriumditionit beadagolása után 10 percen át 65 kevertetünk, majd 10%-os ecetsavval a pH-t 2