156574. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a G-252 antibiotikum előállítására és kinyerésére
156574 komponensből álló oldószer-rendszerekben, melyek Cg—C5 alifás alkoholokból, szerves bázisokból & vízből áBanak. Kromatográfiás, előnyösen rétegkromatográfiás viselkedése alapján is megkülönböztethető a hasonló csoportba tartozó heptaén makrolid antibiotikumoktól. A legjobb eredményt a Kieselgel G hordozón butanol : piridin : etanol : : butilaeetát : víz = 3 : 2,5 : 0,5 : 1,0 : 3,0 rendszerben végzett futtatás adja. Ebben a G—252 antibiotikum 0,63, a Levorin 0,61, a Trichomicin 0,66, a Candicidin 0,67 R/ értékeket mutatott, együtt futtatott anyagok .esetében. A foltok inaikálása, az ultraibolya fényben való láthatóságon kívül, a mikrobiológiai indikációval, Candida albicans tesztmikroorganízmussal történt. Lényegesnek tartjuk megemlíteni a G—252 antibiotikum fénnyel, elsősorban ultraibolya fénnyel szembeni érzékenységét. Ilyen fénnyel besugárzott oldataiban jellemző izomerizációs változások mennek végbe. Az ilyen oldatból a G—252 izomerizált terméke a G—252 antibiotikummal azonos módon nyerhető ki, mivel ezen izomer oldhatósága a kiindulási anyaggal legmesszebbmenőkig megegyezik. így megemlítjük, hogy a G—252 antibiotikumot és a G—252 izomerizált terméket 300 lépcsős „Graig" ellenáramú, megosztásos analízissel együttfuttatva, metanol : kloroform : borátpuffer (pH = 8,3) = = ,2:2:1 rendszerben a két termék elkülönülése nem figyelhető meg. E G—252 izomer anyag a G—2:52 antibiotikum másodlagos jellemzésére is felhasználható. Ultraibolya és infravörös spektrumaiban jellegzetes változások mennek végbe. így ultraibolya spektrumában 4,5—5 nm-es batokróm eltolódás figyelhető meg. Az adatokat táblázatosan adjuk meg, öszszehasonlításul a G—252 antibiotikum.elnyelési sávjait is feltüntetve: 1. 2. 3. 4. nm G—252 antibiotikum 346,5 365 385 408,5 nm G—252 izomer 349 370 390 414 nm Oldószer mindkét esetben-50%-os vizes piridin. Az elnyelési spektrum szerkezete is megváltozik. A G—25,2 antibiotikum „3" legintenzívebb elnyelési sávja helyett (E = 808) a „4." sáv lesz a legintenzívebb (E = 1050), ugyanakkor a „3." sáv intenzitása is nő. (E = 920). Infravörös spektrumált tekintve a G—252 anti-10 15 20 25 30 35 40 45 50 biotikum 12,45 és 13,15 m,u,-nál jelentkező elnyelési sávja kivételével, melyek a G—252 izomernél hiányoznak, az izomer spektruma a G—.252 antibiotikuméval minden részletében megegyező. Az izomer biológiailag inaktív. A G—252 antibiotikum hatását különböző patogén és apatogén gombatörzseikre az alábbi táblázatos összeállításban adjuk meg: Törzs Gátló koncentráció /ig/ml Candida albicans 0,05 Candida forumptii 0,1 Candida fiareri 0,05 Candida tropicalis 0,05 Sacdharomyces carlsbergiensis 0,02 Saocharomyces oerevisiae 0,05 Cryptococcus neoformans 0,1 Cryptococcus albidüs 0,05 Penicillium frequentans 0,1 Alternaria sp. 0,1 Triphophyton mentagrophytes 0,05 Botrytis cinerea 0,1 A G—2,52 antibiotikum szabad sav, ennél fogva előnyösen alkalmazható különböző felületi mikózisok terápiás kezelésiénél, illetve pálcika alakú tablettái alkalmazhatók vaginalis mikózisok terápiás kezelésére. Néhány indikációs területen a G—252 szabad savnál előnyösebben alkalmazható vízben 10%-ban oldódó alkáli sóinak, elsősorban nátrium sójának oldata, vagy az alkálimentes neutrális pH-jú G—252 kolloid-formájának stabilis vizes oldata. A Streptomyces G—252 nsp. törzs leírása. Légmlicéliuma 48 óra alatt kinő, ha az inkubálást 2,5—28 C° között végezzük. Elágazó sporofórái általában egyenesek, néha enyhén csavarodottak. Telepeinek színe különböző táptalajokon igen változó, komplex táptalaj okon azonban általában élénksárga, Telepeinek alakja optimális táptalajon 3—5 mm átmérőjű, kerek, kiemelkedő, koncentrikusain barázdált, közepe a legkiemelkedőbb, vagy kráterszerűen bemélyedit, A törzs biokémiai jellemzésére az alábbiakat közöljük: A nemzetközileg elfogadott Waksman identifikáló táptalajsoron végzett tenyésztések adatait az I. táblázat foglalja össze: A Streptomyces G—252 nsp. törzs viselkedése különböző táptalajokon: Waksman -— sor. A pH a tenyésztés végén 7,0—7,5. Táptalaj megnevezése 72h 120h 168h 240" 336h 1. Czapek-agar 2. Glükóz-aszparagin-agar 3. Glicerin-agar 4. Tirozin-agar 5. Hús-pepton-agar ++(+) ++ ++++ +(+) ++<+)++(+) +-H+ + + ++ ++ ++ ++ ++++ ++++ ++++ +++ + +(+)• +(+)• +(+) +-(+) ++++ ++++ ++++ + + + + 2
