155996. lajstromszámú szabadalom • Eljárás proghrombin visszanyerésére prothrombin-tartalmú adszorbensekről

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Bejelentés napja: 1966. XI. 01. (GO—997) Közzététel napja: 1968. XI. 22. Megjelent: 1969. XI. 29. 155996 Szabadalmi osztály: 30 h 1—8 Nemzetközi osztály: A 61 k Decimái osztályozás: Feltalálók: Dr. Bagdy Dániel orvos, B. Barabás Éva vegyész, Dr. Bereznay Tibor állatorvos, F. Kazi Erzsébet művezető, Budapest Tulajdonos: Gyógyszerkutató Intézet, Budapest Eljárás prothrombin visszanyerésére prothrombin-tartalmú adszorbensekről A találmány tárgya javított eljárás prothrombin visszanyerésére prothrombin tartalmú adszorbensekről. Ismeretes, hogy a prothrombin előállítására vonatkozó eljárások túlnyomó része adszorpciós módszert alkalmaz, s ezek a módszerek nemcsak hatékonyságukban, hanem a felhasznált adszorbensek tekintetében is nagy változatosságot mutatnak. Feltűnően kevés adat található azonban a szakirodalomban a prothrombinnak prothrombin-tartalmú adszorbensekről történő visszanyeréséíPe nézve. így az állati vérplazmából izoelektromos pontján kicsapott nyers prothrombin adszorpciójára egyik leginkább elterjedt eljárás, a magnézium-hidroxidos adszorpció régi és újabb alkalmazói [Seegers és mtsai: J. Biol. Chem 174, 565 (11948); Owren: The coagulation of blood. Acta Med. Scanti. Suppl. 194 (1947);; több szabadalmi leírás, köztük pl. a 2 40)8 536 sz, USA szabadalom, továbbá G. Schäfer '[Pharmazeut. Zentralhalle 95, 393 (19516)] egyaránt úgy szabadítják fel az adszorbensen megkötött prothrombint, hogy az adszorbenst zárt térben széndioxidnyomás alatt karbonáttá alakítják át, aminek következtében az adszorbens elveszti prothrombin-kötő képességét. A Dale és Walpole félévszázados megfigyelése nyomán [Brachem. J. 10, 331 (1916)] elterjedt 'bárium-szulfát adszorbensről a legújabb szerzők is [Khodorova 2 és mtsa: Ukrain. Biokhim. Zhur. 28, 142 (1956); Goldstein és mtsai: J. Biol. Chem. 234, 2-857 (1959). Belitser és mtsa: Ukrain. Biokhim. Zhur. 33, 499 (19611)] tömény oitrátoMlatokkal 5 nyerik vissza a prothrombint. A bárium-citrát adszorbensről történő eluálást Moore és mtsa nagymennyiségű etiléndiamin-tetraacetáttal végzi [Biodhim. et Bioiphys, Acta 1111, 174 (1965); Goldstein és Zondermann viszont (Proc. Intern. 18 Congr. Intern. Soc. Hematol. 1

th, Rome, 1958. 2. !Pt. 1006—1!2.)] nátrium-^cik'lusban levő Dowex—50 típusú kationcserélő műgyantával keverik a bárium-citrát-prothrombín komplexet: így a csapadék feloldódik és ezáltal fel-15 szabadulnak az adszorbeált fehérjék. Az ismert protlhromb in-visszany érési módszerek számos hátránnyal rendelkeznék. Azoknak az eljárásoknak, amelyek az adszorbenst megbontják, illetve átalakítják, közös hátrá-20 nyuk, hogy az összes megkötött fehérjét oldatba juttatják, így szelektívnek egyáltalában nem tekinthetők. Ilyen a fémhidroxidról történő visszanyerési módszeren kívül az etiléndiamintetraacetátos, továbbá az ioncserés módszer is. 25 Ezen túlmenően a fómhidroxidról való prothrombin visszanyerés technológiailag körülményes és a nyers prothrombin tisztítása a fémionok jelenléte miatt hosszadalmas. A báriumionoknak etiléndiamin-tetraacetáttal vagy ka-30 tion-cserélő műgyantával történő eltávolítása 155996