155987. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tumorsztatikus hatású szer előállítására

155987 7 8 Az eredeti kokkuszszuszpenzió hígítása BBM közeggel A 37 C°-os inkubáció időtartama, 2,7 x 104 E/ml penicillint tartalmazó hígított kokkusz-szuszpenzióval, perc Tiuimoarsztatikus in vitro — in vivo aktivitás A túlélő állatok száma 10 20 30 40 50 nap után 1 :10 0 10 20 40 60 BBM közeg, 2,7 xilO4

E/ml penicillin tartalommal, 37 C°, 30 perc 6 6 6 0 — 6 6 6 3 3* 6 6 6 6 6* 6 6 6 «6 6* 6 6 6 6 5* Ellenőrző kísérlet kokfcuszok nélkül Ellenőrző kísérlet kokkuszok és penicillin nélkül BBM közeg, 37 C°, 30 perc *Az állatokat leöltük és boncoltuk. Tumor jelenléte nem volt megállapítható. 3. példa: Különböző Streptococcus-készítményak in vivo tumorsztatikus hatásának vizsgálata rákkal fertőzött egereken. A Streptococcus haemolyticus ATGC 21060 20 órás kultúrájának 300 ml-jéből kapott élő sejteket fiziológiás konyhasóoldattal kétszer mostuk, majd 15 ml BBM közegben szuszpendáltuk a sejteket. Az így kapott eredeti kokkusz-szuszpenziót azután ugyancsak BBM közeggel hígítottuk 1 : 5 arányiban. I. 30 ml 1 : 5 arányú hígítású kokkusz-szuszpenzióhoz 6 ml 16 x 10* E/ml koncentrációjú, fiziológiás konyhasóoldattal készített penicillinoldatot adtunk. II. 30 ml 1 : 5 arányú hígítású kokkusz-sauszpenzióhoz 6 ml fiziológiás konyhasóoldatot ad^ tunk. Az így kapott szuszpenziók egy-egy részét az alábbi módon kezeltük: a) A fiziológiás konyhasóoldatot tartalmazó kokikusz-szuszpenziót 20 percig inkubáltuk 37 C' hőmérsékleten („A" készítmény). b) A fiziológiás konyhasóoldatot tartalmazó kokkusz-szuszpenziót 20 percig inkubáltuk 37 C° hőmérsékleten, majd 30 percig hevítettük 45 C°-on („B" készítmény) c) A penicillint is tartalmazó kokkusz-szuszpenziót 20 percig inkubáltuk 37 C° hőmérsékleten („C" készítmény). d) A penicillint is tartalmazó köklkusz-szuszpenziót 20 percig inkubáltuk 37 C° hőmérsékleten, majd 30 percig hevítettük 45 C°-on („D" készítmény). S0 35 Továbbá az alábbi összehasonlító készítményeket állítottuk elő: e) BBM — fiziológiás konyhasóoldat, 20 percig inkulbálva 37 C° hőmérsékleten („Ai" készítmény). f) BBM— fiziológiás fconythasóoldat, 00 percig inkubálva 37 C° hőmérsékleten, majd 30 percig hevítve 45 C°-on („Bi" készítmény). g) BBM — penicillin elegy, 20 percig inkubálva 37 C° hőmérsékleten, („Ci" készítmény). h) BBM — penicillin elegy, 20 percig inku-40 bálva 37 C° hőmérsékletein, majd 30 percig hevítve 45 C°-on („Di" készítmény). 45 50 Az egyes készítmények tumorsztatikus hatását az alábbi módon határoztuk meg: A 8 nappal ezelőtt Erlieh-féle aseites-tumorral fertőzött egerek hasüregéből vett tejszerű ascites-lfolyadékot közvetlenül hígítottuk fiziológiás konyhasóoJdattal, oly módon, hogy millilitereriként 1213 x 106

ráksejtet tartalmazó szuszpenziót kapjunk. A 6—fi állatot tartalmazó kísérleti egér-csoportok egyedeit 0y2 ml rálksejt-szuszpenzióval 55 kezeltük intraperitoneális injekció útján, majd 24 óra múlva a kísérleti állatoknak 0,5 ml vizsgálandó készítményt adtunk be, ugyancsak intraperitoneális injekcióban. Ugyanilyen adagot adtunk további 4 egymást követő napon is. 60 A kapott eredményeket az alábbi III. táblázatban foglaltuk össze. E táblázat adataiból jól kitűnik, hogy a négy Streptoooecus-készítmény közül a leghatásosabb a „D" készítmény volt, amelyet a penicillinnel előzetesen kezelt kok-65 kusz-szuszpenzió hevítése útján készítettünk. 4