155880. lajstromszámú szabadalom • Eljárás biológiailag aktív polipeptidek és intermedierek szintézisére
23 155880 24 ml izopropanolból átkristályosítva 35—40 g (72—83%) terméket kapunk. Op.: 148—150 C". 3. lépés Z-Asp(OBu')-Gly-Ala-Glu(OBu')-OBuf 48 g Z-Gly-Ala-Glu(OBuO-OBuf tripeptidet 550 ml 80%-os ecetsavban oldunk és csontszenes palládium jelenlétében hidrogenizáljuk. A katalizátor kiszűrése után az oldatot vákuumban bepároljuk és a visszamaradt olajat 500 ml vízben oldjuk, 120 g nátriumkloridot adunk hozzá, majd nátriumkarbonáttal meglúgosítjuk (pH 9). A kivált olajat etilacetáttal kirázzuk és szárítás után az oldatot bepároljuk. A maradékot 200 ml vízmentes etilacetát és 100 ml vízmentes dioxán elegyében oldjuk. 30,6 g Z-Asp(OBu')-ONSu aktív észtert adunk hozzá, majd 3 órás állás után a reakcióelegyet 200 ml etilacetáttal hígítjuk és vízzel, 1 N sósavval, 80%-os nátrium-hidrokarbonát oldattal, vízzel mossuk, majd szárítás után vákuumban bepároljuk. A visszamaradó olaj petroléter alatt megkristályosodik. 38—40 g (75—79%) terméket kapunk. Op.: 80—83 C°. 4. lépés Z-Tyr(Bu')—ONSu 175 g finoman elporított Z-Tyr(Bu')-OH diciklóhexilaminsót 1 liter éterben, felszuszpendálunk és 1250 ml vízben oldott 17,5 ml tömény kénsavval teljes oldódásig rázzuk. Az éteres oldatot szárítás után bepároljuk, majd a viszszamaradt olajat 625 ml vízmentes dioxánban oldjuk és jegesvizes hűtés közben 33,25 g N-hidroxiszukcinimidet és 65,7 g dieiklohexilkarbodiimidet adunk hozzá. Másnapig szobahőmérsékleten áll. A kivált diciklohexilkarbamidot kiszűrjük, a dioxánt vákuumban ledesztilláljuk és a visszamaradt olajat petroléterrel eldörzsöljük. A nyers terméket 180 ml metanolból átkristályosítva 80 g (54%) terméket kapunk. Op.: 118—120 C°. 5. lépés H-Tyr(Bu0-Pro—OH 160 g Z-Tyr(BuO-ONSu aktív észtert 2 liter vízmentes dioxánban, 50,3 g prolint és 36,7 g nátrium-hidrokarbonátot 1,5 liter vízben oldunk, majd a két oldatot összeöntjük és 2 órán át szobahőmérsékleten kevertetjük. Ezután vákuumban kb. 1 literre beszűkítjük és a maradékot 600 ml vízzel hígítjuk, majd 1 liter etilacetáttal kirázzuk. Elválasztás után az etilacetátos oldatot 8%-os nátrium-hidrokarbonát-oldattal, vízzel mossuk. Az egyesített vizes oldatokat citromsavval pH 3-ra savanyítjuk és a leváló olajat etilacetáttal kirázzuk, majd szárítás után az etilacetátcvt vákuumban ledesztilláljuk. A visszamaradó nyers karbobenziloxi-dipeptidet 2,5 liter etanolban oldjuk, majd csontszenes palládium jelenlétében hidrogenolizáljuk. A katalizátor kiszűrése után az oldatot vákuumban bepároljuk. 90—95 g (79—83%) amorf dipeptid marad vissza. Vízből kristályo-5 sítható. 6. lépés H-Val-Tyr(Bu')-Pro—OH 10 250 ml vízmentes dioxánban feloldunk 21,5 g H-Tyr(Bu')Pro-OH dipeptidet és 9,05 ml trietilamint, majd 17,9 g Z-Val-ONSu aktív észtert adunk hozzá. A reakcióelegyet másnapig ]5 szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd vákuumban bepároljuk és a maradékot 300 ml 8%-os nátrium-hidrokarbonát oldat és 150 ml éter keverékében áldjuk. A vizes fázist elválasztás után citromsavval pH 3-ra savanyítjuk 20 és a kivált olajat, kloroformmal kirázzuk. A kloroformot szárítás után ledesztilláljuk. A nyers karbobenziloxi-tripeptidet 250 ml 80%-os ecetsavban oldjuk és csontszenes palládium jelenlétében hidrogenolizáljuk. A katalizátor ki-25 szűrése és az oldószer ledesztillálása után viszszamaradó nyers tripeptidet 1,1 liter vízmentes metanolból kristályosítjuk át. Összesen 13,7 g (62%) terméket nyerünk. Op.: 134—136 C°. 30 7. lépés Z-Lys(BOC)—ONSu 35 3'0ű ml vízmentes dioxánban. feloldunk 67,3 g Z-Lys(BOC)—OH származékot és jegesvizes hűtés közben 20,4 g N-hidroxiszukcinimidet, valamint 37,0 g diciklohexilkarbodiimidet adunk hozzá. Miután 1 órát hidegen, 3 órát szobahő-40 mérsékleten állni hagytuk, a kivált diciklohexilkarbamidot kiszűrjük és a dioxános oldatot bepároljuk. A visszamaradt nyers terméket 350 ml vízmentes benzol és 250 ml petroléter elegyéből átkristályosítjuk. 59 g (70%) aktív ész-45 tért kapunk. Op.: 93—96 C°. 8. lépés H-Lys(BOC)-Val-Tyr(Bu')-Pro—OH 50 600 ml dioxánban feloldunk 53,6 g H-Val-Tyr(Bu')-Pro—OH tripeptidet és 17,2 ml trietilamint és 59,1 g Z-Lys(BOC)—ONSu aktív 55 észtert adunk hozzá. A reakcióelegyet 2 napig szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd vákuumban bepároljuk és a maradékot 800 ml etilacetátban oldjuk, vízzel, 10%-os citromsavoldattal, vízzel kirázzuk. Az etilacetátos oldatot 60 szárítás után vákuumban bepároljuk, majd a maradékot 1 liter 80%-os ecetsavban oldjuk és csontszenes palládium jelenlétében hidrogenizáljuk. A katalizátor kiszűrése és az oldószer bepárlása után nyert nyers terméket 4,2 liter 65 vízmentes metanolból átkristályosítva összesen 12
