155718. lajstromszámú szabadalom • Eljárás acetilglukozidok előállítására lanatozid-vegyületek mikrobiológiai átalakítása útján

155718 giukózid-tartalomig besűrítjük, pH értékét 4,5-re állítjuk, majd 500 liter oldatban 5 kg nedves micéliumot szuszpendálva, az inkubálást 24 C°-on levegőztetés mellett 96 órán át folytatjuk. A'szuszpendálást és átalakítást nem steril körülmények között végezzük, az idegen fertőzés kiküszöbölésére a fermentléhez 0,02% formaiint adjunk. 96 óra után a fermentlevet kloroformmal extraháljuk, az extraktum száraz maradékát metanolban oldjuk, fele mennyiségű vizet adagolunk hozzá és benzollal ismételten extraháljuk. A benzolos extraktumból 85 g nyers acetildigitoxin nyerhető; a maradék metanolos-vizes oldatból kloroformos extrakcióval 52 g nyers acetilgítoxint és acetildigoxint kapunk. Előbbi termék átkristályosítással jól tisztítható, utóbbi két termék kromatográfiával egymástól elválasztható; Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás szekunder acetilglukozidok előállítására lanatozid-vegyületekből enzimes glukózlehasítással, azzal jellemezve, hogy az átalakítandó lanatozidokat alkoholban oldva a béta-glukóz-végcsoport lehasítására képes (lanatozid-béta-glukozidáz-pozitív), de az acetilcsoportot le nem hasító (lanatozid-észteráz-negatív) Fusarium-törzs tenyészetéhez, vagy a táptalajtól elválasztott micélium célszerűen 4,0—5,5 pH értékű vizes szuszpenziójához adjuk és az így kapott, legfeljebb 6% alkoholt tartalmazó vizes elegyet 24—28 °C-on tartjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás kiviteli mód-10 ja azzal jellemezve, hogy a lanatozid-észteráznegatív Fusarium-törzset lanatozid-béta-glukozidáz-pozitív Fusarium kultúra egykonidium tenyészetei közül, célszerűen a kultúra mutagen 5 behatással, pl. ibolyántúli besugárzással való kezelése után, az acetilezett glukozidokkal szemben mutatott viselkedés alapján szelektáljuk. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja azzal jellemezve, hogy az átalakí-10 táshoz felhasználásra kerülő micéliumot 0,2— 3,0% kukoricalekvárt és szénforrásként szénhidrátot, pl. glukózt, vagy laktózt tartalmazó táptalajon állítjuk elő. 4. Az 1—3. igénypontok bármelyike szerinti el-15 járás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy átalakítandó lanatozidként a Digitalis lanata drogból enzimhatás nélküli extrakcióval kapott nyers lanatozid-elegyet alkalmazzuk. 5. Az 1—3. igénypontok bármelyike szerinti el-20 járás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy átalakítandó lanatozidként a tiszta C-lanatozid gyógyszerkészítmény gyártási melléktermékeként kapott, főként A-lanatozidot és kisebb mennyiségben C-lanatozidot is tartalmazó nyers 25 glukozid-elegyet alkalmazunk. 6. Az 1—3. vagy 5. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy az említett gyártási melléktermékből a C-glukozidot előzetesen eltávolítjuk és így a visszamaradó A-lana-30 tozidból acetildigitoxint állítunk elő. 7. Az 1—3. vagy 5. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy az említett gyártási melléktermékből feldúsított, vagy más módon elkülönített C-lanatozidból acetildigoxint 35 állítunk elő. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó Igazgatója 69.3786.66-42 Alföldi Nyomda, Debrecen