155443. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 6-19-oxido-androszt-4-én-3,17-dion előállítására

MAGTAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Bejelentés napja: 1967. V. 17. Közzététel napja: 1968. VII. 25. Megjelent: 1969. IX. 01. (GO—1016) 155443 Szabadalmi osztály: 30 h 1—8 Nemzetközi osztály: C 12 k Decimái osztályozás: Feltalálók: Tulajdonos: Albrecht Károly gyógyszerész, 30%, Dr. Ambrus Gábor vegyészmérnök, Gyógyszerkutató Intézet, 20%, Dr. Rados Márta vegyész, 18%, Dr. Büki Kálmán orvos, 11%, Budapest Tömörkény Endre vegyész, 7%, Dr. Vargha László vegyész, 7%, Dr. Wix György orvos, 7% Eljárás 6,19-oxido-androszt-4-én-3,17-dion előállítására A találmány eljárás 6,19-oxido-andiroszt-4-én-3,-17-dion mikrobiológiai úton való előállítására. Ismeretes, hogy az antikoncipiensek alapanyagául szolgáló norszteroidok gyógyászati jelentősége az utóbbi években nagymértékben megnövekedett. Előnyös norszteroid szintézist dolgoztak ki svájci (1) és amerikai (2) szerzők dehidroepiandroszteronból kiindulva. Sünnek és munkatársainak (,3) sikerült e szintézis egyik intermedierjét, a 6,19-oxido-androszt-4-én-i3,17-diont 6,19-oxido-koleszt-4-én-3-on-ból előállítaniok egy koleszterint tartalmazó táptalajból izolált, közelebbről meg nem határozott mikroorganizmus segítségével. Kísérleteink során azt találtuk, hogy egyes általunk izolált Mycobaeterium-fajták, így a 153.831 lsz. szabadalmunkban leírt, az Országos Közegészségügyi Intézetben 29. sz.-on letétbe helyezett Mycobacterium phlei, a 37. sz.-on letétbe helyezett Mycobacterium lacticola, a 38. sz.-on letétbe helyezett Mycobacterium smegmatis, Valamint más Mycobacteriumok is, például a Mycobacterium butyricum, a Mycobacterium aquae lebontják a természetes szterolokból és pregnánvázas vegyületekből nyert 6,19-oxido-zJ4-3-keto-szteroidok (pl. 6,19-oxido-koleszt-4--én-3-on, e^U^oxido-pregn^-en-S^O-dion) oldalláncát 6,19-oxido-androszt-:4-én-3,17-diont állítanak elő belőlük. A találmány: eljárás 6,19-oxido-androszt-4-én-3,17-dion mikrobiológiai úton való előállítására, amely abban áll, hogy az átalakítást 17/?-helyzetű oldallánccal rendelkező, a 6-os és 19-es 5 szénatomok között oxigénhidat tartalmazó szteroidokból kiindulva süllyesztett fermentációs körülmények .között Mycobacteriumokikal végezzük, és a keletkezett 6,19-oxido-androszt-4--Jén-3,17-diont önmagában ismert módszerek-10 kel elkülönítjük. Az említett Mycobacterium-fajták különböznek egy-mástól a láncbontás sebességét és a szubsztrátum-koncentráoió tűrését illetően. Kisebb eltérést mutatnak egymáshoz képest táp-15 talaj-szükségletük és növekedési körülményeik, továbbá a pH, levegő-ellátottság, kevertetés és hőfok tekintetében is. A vizsgált törzsek mindegyikénél lényegesnek bizonyult azonban, hogy fő fermentációs táptalajul olyan közeget igé-20 nyelnek, mely N-forrásként kukoricalekvárt és aszparagint, növekedési faktorként élesztőkivonatot, ezenkívül nyomelemként egy- és kétértékű kationokat tartalmaz. Az előbbi követelményeknek megfelelő táptalajon nőtt tenyészethez 25 növekedésének állandó fázisában, minden további művelet (táptalaj csere, kimerített felülúszó steril vízzel vagy fiz. sóoldattal való lecserélése) nélkül adagoljuk az átalakítandó szteroidokat. A láncbontás előrehaladását kvantitatív 30 papírkromatográfiával követjük, majd a kiindu-155443