154935. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az A 28829 antibiotikum előállítására
11 154935 12 anyalúgból további 1,95 g terméket nyerhe-tünk ki. A metanolból átkristályosított antibiotikum 223-^227-°-on bomlás közben olvad. A termék elemzési adatai: C = 60<53%, 60,79%- 60,97%; H.= 8,52%, 8,76%, 8,52%; N= 1,89%; B= 1,35%, 1-1«%; O = 27,49% {számított érték). A termoelektromos módszerrel, metilénklorid oldószerben meghatározott molekulasúly kb. 868. A szilikagélen, etilacetát vivőanyaggal felvett vékonyrétegű kromatogrammon egyetlenegy folt mutatkozik; R/ — 0,75. A kimutatás tömény kónsawal való bepermetezés és hevítés útján (140 C°-ra), vagy pedig bioautógrafikus úton, Spicaria mikroorganizmussal, az alább leírt eljárással történhet: \ Egy Spicaria-spórákkal beoltott agár lemezre egy szűrőpapír-lapot helyeztünk, majd erre tesszük az előhívott vékonyrétegű kromatogram lemezt. 15 perc alatt elegendő mennyiségű antibiotikum diffundál át áz agárba, hogy a mikroorganizmus fejlődését gátolja. A vékonyrétegű kromatogram lemezt ezután eltávolítjuk a szűrőpapírral együtt és az ágárlemezt 20 óra hosszat inkubáltatjuk 36° hőmérsékleten. 20 mg A 28829 antibiotikumot 2 ml dioxánban oldunk és 2 ml n sósav oldat hozzáadásával 30 percig melegítjük forrásban levő vízfürdőn. Az oldatot azután szilárd báriumkarbonát hozzáadásával semlegesítjük, szárazra pároljuk be és a maradékot papírkromatográfiai vizsgálatnak vetjük alá, 4 :1 : 1 arányú n-butaraol — jégecet — víz oldószereleggyel. Redukáló cukor jelenléte sem, ammonias ezüstnitrát oldattal, sem anilinhidrogénftaláttal nem mutatható ki. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás egy új antibiotikum előállítására, azzal jellemezve, hogy a Northern Regional Research Lab. peoriai intézetnél NRRL 3207 sz. alatt letétbe helyezett Streptomyces antibioticus A 28829 törzset vagy valamely más, az A 28829 antibiotikum termelésére képes törzset egy szénforrást, nitrogénforrást, valamint szervetlen sókat tartalmazó vizes tápközegben tenyésztünk, majd kinyerhető mennyiségű antibiotikumnak megfelelő antibakteriális aktivitás felgyülemlése után a mioéliumiból az A 28829 antibiotikumot elkülönítjük. 2 A kiadásért leitel: a Közga 6M)7«52. Zrínyi (T) Nyomda, 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy az antibiotikum jelenlétének vizsgálatára Botrytis cinerea mikroorganizmust- alkalmazunk. '5 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, Ihogy a tenyésztést aerob körülmények között, előnyösen alámerülő kultúrában végezzük. 4. Az 1—3. igénypontok bármelyike szerinti 10 eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve,, hogy a micéliumot valamely vízzel elegyedő lipoids -oldószerrel extraháljuk. 5. Az 1—4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy 15 a micéliumot vizes acetonnal extraháljuk. 6. Az 1—4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy a micéliumot etilacetáttal extraháljuk. 7. Az 1-H6. igénypontok bármelyike szerinti 20 eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy az antibiotikumot ellenáramú megosztási eljárással tisztítjuk. 8. A 7. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy az ellenáramú 25 megosztást széntetraklorid •— metanol — víz oldószer-rendszerrel végezzük. 9. Az 1—8. igénypontok bármelyike szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy az antibiotikumot kromatográfiai úton tisztít-30 Juk -10. A 9. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy a kromatografálást kovasavgélen végezzük. 35 11. A 9. vagy 10, igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy eluálószerként etilacetátot alkalmazunk. 12. Az 1—11. igénypontok bármelyike szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, 40 hogy az antibiotikumot metanolból kristályosítjuk. 13. Az előző igénypontok bármelyike szerinti eljárás továbbfejlesztése baktériumellenes hatású készítmények előállítására, azzal jelle-45 mezve, hogy az A 28829 antibiotikumot önmagában ismert módon, egymagában vagy a gyógyszerkészítmények előállításához használatos vivőanyagokkati, kötőanyagokkal, simítószerekkel, ízesítőanyagokkal és/vagy más ismert 50 segédanyagokkal, továbbá adott esetben más hasonló hatású készítményekkel is kombinálva, tablettává, drazsévá, kapszulává, végbélkúppá, emulzióvá, szuszpenzióvá, injekció-oldattá vagy más közvetlen beadásra alkalmas készítménnyé 55 alakítjuk. db rajz lági és Jogi Könyvkiadó igazgatója. iapest V., Balassi Bálint utca 21—23. e*
