154495. lajstromszámú szabadalom • Eljárás marhatüdőből nyert nyers proteáz-inhibitorkészítmények tisztítására

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1966. XII. 13. (AE—219) Német Demokratikus Köztársaság-béli elsőbbsége: 1965. XII. 14. Közzététel napja: 1967. X. 23. Megjelent: 1968. IX. 30. 154495 Szabadalmi osztály: 30 h 1—8 Nemzetközi osztály: A 61 k Decimal osztályozás: Feltalálók: Dr. Schäfer Gerhardt oki. vegyészmérnök, Piesche Klaus oki. biológus, Radebeul, Német Demokratikus Köztársaság Tulajdonos: VEB Arzneimittelwerk Dresden, Radebeul, Német Demokratikus Köztársaság Eljárás marhatüdőből nyert nyers proteáz-inhibitorkészítmények tisztítására A találmány tárgya eljárás marhatüdőből nyert nyers proteáz-inhibitor oldatok tisztítására. A marhatüdőből nyert proteáz-inhibitort az emberorvostanban Pankreatitis ellen, valamint 5 antifibrinolitikumként használják. Alkalmazása parenterálisan történik. Az inhibitor a klinikai diagnosztikában és a biokémiai kutatásokban is felhasználásra kerül. Ismeretes, hogy a marhának bizonyos szervei, 10 mint pl. a fültőmirigy, hasnyálmirigy és a tüdő proteáz-inhibitort tartalmaznak. A hatóanyag egy kb. 11 600 molekulasúlyú polipeptid, mely a trdpszin, a kimotripszin és a vérnyomáscsökkentő keringési enzim hatását gátolja. 15 Az 1,084.433 sz. német szab. (DAS) tartalmaz egy eljárást az inhibitor tiszta oldatainak az előállítására, mely szerint a ballasztfehérjéket szulfoszalicilsawal kicsapják és a felesleges szulfoszalicilsavat anion- vagy kationcserélővel 20 kezelve eltávolítják. Az 1^155.563 sz. német szab. ismertet továbbá egy eljárást, amely szerint az inhibitort oly módon csapják ki, hogy a hatóanyag oldatához metafoszforsavat adnak. Az elkülönített csapa- 25 dékot lúgban vagy sósavban történő oldással elbontják, és az oldatot a sóktól ismert módszerekkel, pl. ioncserélőkkel való kezeléssel vagy membrándialízissel megszabadítják. Az 1,193.200 sz. német szab. szerint az inhi- 30 bitort oldataiból a metafoszforsav vízoldható sóival — a sók feleslegének elkerülésével —.. kicsapják, és az elkülönített csapadékot ammóniában, lúgban, vagy sósavban történő oldással elbontják. A nyert oldatot a sóktól ismert módszerekkel, pl. ioncserélőkkel való kezeléssel vagy membrándialízissel megszabadítják. Az 1,181.371 sz. német szab. szerint ismeretes egy további eljárás, mely szerint az inhibitort oldataiból polifoszforsawal vagy ennek vízoldható sóival kicsapják és a csapadékot lúgban vagy sósavban történő oldással elbontják. A nyers, proteintartalmú mhibitoroldatok tisztítására szolgáló ismert eljárások egyrészt a zavaró, kísérő-proteineknek fehérjekicsapószerekkel, így szuifoszalicilsawal, triklórecetsavval és perklórsavval való eltávolítására alkalmasak- Ezt követően azonban a kicsapószer feleslegét — abban az esetben, ha a nyert készítmény terápiás alkalmazásra kerül — kvantitatíve el kell távolítani. Ez anion- vagy kationcserélők használatával, félig áteresztő hártyákon való dialízissel, illetve térhálós dextrángelen végzett szűréssel történhetik. Az ismert eljárások másrészt az inhibitort csapjak ki az oldatból, pl. metafoszforsav, csersav vagy ammóniumszulfát hozzáadása útján. Itt is szükséges azonban a kicsapószernek gélszűréssel, dialízissel, vagy ioncserélőkkel végzett teljes eltávolítása. 154495