154485. lajstromszámú szabadalom • Eljárás rákellenes hatású szer előállítására
dék eltávolítása céljából ismét centrifugáljuk. A tiszta oldatot (4) a további kezelés céljából három egyenlő részre osztjuk. 200 ml (4) oldatot sósavval 2 pH-értékre savanyítunk. A csapadékot (5) centrifugálással 5 elkülönítjük. A szupernatáns folyadékot (6) szintén elkülönítjük. A csapadékot etanollal és acetonnal öblítjük, majd megszárítjuk. 9,4 g száraz anyagot kapunk. E termék 30 mg-ját 15 ml vízben oldjuk és '0,5 ml adagokban intravé- i0 násan beadjuk „180" szarkomával fertőzött egereknek. A 18 kezelt egér közül 17-nél tapasztaljuk a tumor nekrózisát; 10 egér végül is teljesen meggyógyult. A termékek elemzési adatai: 15 nukleinsav 13,7%, fehérjék 74 %. 4. példa: 20 A 3. példa szerinti módon kapott (4) oldat 200 ml-jét ammóniumszulfáttal elegyítjük 0,4 telítési szint eléréséig, majd az elegyét 2 óra hosszat 4 C° hőmérsékleten tartjuk. Ezután az elegyet centrifugáljuk. A szupernatáns folya- 2 5 dékot elkülönítjük, a csapadékot pedig 50 ml 2 pH-értékre állított vízzel hígítjuk, azután ismét centrifugáljuk. A szupernatáns folyadékot eltávolítjuk és az üledéket vízben oldjuk, miközben a pH-értéket nátriumkarbonát hozzá- 30 adásával 7-re állítjuk. Az oldatot cellofánon keresztül dializáljuk, áramló vizet alkalmazva, 18 óra hosszat. A dializáit folyadékot a kismenynyiségű oldhatatlan rész eltávolítása céljából centrifugáljuk, majd liofilizáljuk. 7,4 g száraz ^5 terméket kapunk. Ha ezt a 3. példában leírt módon vizsgáljuk antikarcinogén hatás szempontjából, azt tapasztaljuk hogy a 20 kezelt állat közül valamennyinél a tumor nekrózist mutat, 12 pedig végül is teljesen meggyógyul. 40 5. példa: A 3. példa szerinti módón kapott (4) oldat 200 ml-jéhez 2 ml 20%,-os kaleiumklorid-olda- 45 tot adunk. A képződött csapadékot (1) centrifugálással elkülönítjük. A szupernatáns folyadékot (2) sósavval 2 pH-értékre savanyítjuk. A most képződött csapadékot centrifugálással elkülönítjük és a szupernatáns folyadékot (4) 50 kiselejtezzük. A (3) csapadékot vízben oldjuk, miközben az oldat pH-értékét nátriumkarbonáttal 7-re állítjuk. Ezután az oldatot liofilizáljuk. 3,2 g száraz anyagot kapunk. Ebből a termékből 1 55 mg-os adagok valamennyi kezelt egéren a tumor teljes nekrózisát eredményezik. A termék elemzési adatai: nukleinsav 14 ,S% fehérjék 89 %. 60 Az (1) csapadékot 50 ml vízzel hígítjuk és 3 g „Amberlite" ioncserélő-gyantát adunk hozzá. Az elegyet centrifugáljuk és az elkülönített szupernatáns folyadékot liofilizáljuk. Ily módon 7,4 g szárazanyagot kapunk. Ez a termék 55 10 egerenként 1 mg adagban mind a 20 kezelt állatnál a tumor igen határozott nekrózisát eredményezte;, 11 állat teljesen meggyógyult. A termék elemzési adatai: nukleinsav 11,9%, fehérjék 70 %. 6. példa: A 2. példa szerinti módot kapott (1) szupernatáns folyadék 1000 ml-jét sósavval 2 pH-értékre savanyítjuk. A képződött csapadékot centrifugálással elkülönítjük és 100 ml vízben oldjuk, miközben a pH-értéket nátriumkarbonáttal 7-re állítjuk. Az oldathoz 2 tf. 96%-os etanolt adunk. A képződött csapadékot centrifugálással elkülönítjük, majd etanollal és acetonnal öblítjük, azután megszárítjuk. 7,2 'g száraz anyagot kapunk. Ez a termék egerenkint 1 mg adagban a tumor nekrózisát eredményezte mind a 20 kezelt állatnál; 13 állat teljesen meggyógyult. A termék elemzési adatai: nukleinsav l'0,8°/0 , fehérjék 74 %. 7. példa: A 2. példa szerinti módon kapott (1) szupernatáns folyadék 1000 ml-jéhez ammóniumszulfátot adunk 0,4 telítési szint eléréséig. A képződött csapadékot centrifugálással elkülönítjük és vízben oldjuk. Az oldatot sósavval 2 pH-értékre savanyítjuk. A képződött csapadékot vízben oldjuk, 7 pH-értékre történő semlegesítéssel, majd az oldatot liofilizáljuk. Ily módon 8,2 g száraz anyagot kapunk. Ebből a termékből egerenként 1 mg adag tumor nekrózisát eredményezi mind a 18 kezelt egérnél, amelyek közül 12 végül is teljesen meggyógyult. A termék elemzési adatai: nukleinsav 9,<9%, fehérjék 77 °/0x 8. példa: A 2. példa szerinti módon kapott (1) szupernatáns folyadék 1000 ml-jéhez 10 ml 20%-os kalciumkloridoldatot adunk. A képződött csapadékot centrifugálással elkülönítjük és 100 ml desztillált vízben oldjuk. A kapott suszpenzióhoz 3 g „Amberlite" ioncserélőt adunk. Az elegyet élénk keverés után centrifugáljuk és az elkülönített szupernatáns folyadékot liofilizáljuk. Ily módon 6,8 g száraz anyagot kapunk. E termék egerenkint 1 mg adagban a tumor határozott nekrózisát eredményezi mind a 24 kezelt egérnél; ezek közül 11 egér végül is teljesen meggyógyult. A termék elemzési adatai: nukleinsav 12%, fehérjék 69%. 5