154186. lajstromszámú szabadalom • Eljárás immunokémiai reagensek előállítására

9 7. példa: A „Bactolatex 0,81" látexet az 1. példában leírthoz haspfiló módon előérzékenyítjük 6 mg/ml koncentrációban alkalmazott tojás-albuminnal. Az így kapott szuszpenziót azután chorion gonadotrop hormonnal érzékenyítjük a fenti módon, így oly reagenst kapunk, amely csak specifikus antiszérummal agglutinálható. Ez az agglutináció már 1—3 NE/ml koncentrációjú chorion gonadotrop hormonnal inhibitálható. 8. példa: Az 1. példában leírt módon, de az ott említett bovin albumin helyett 2 mg/ml koncentrációjú laktalbumin-oldattal előérzékenyítjük a Bactolatex-részecskéket. A kapott szuszpenziót azután 100 NE/ml koncentrációjú chorion gonadotrop hormonnal érzékenyítjük. Az így elkészített reagens is kizárólag specifikus antiszérummal agglutinálható, az agglutinálódás inhibitálására pedig már néhány NE/ml koncentrációjú chorion gonadotrop hormon elegendő. 9. példa: A látex-részecskéket az 1. példában leírthoz hasonló eljárással, 6 mg/ml koncentrációjú tojás-albuminnal előérzékenyítjük, majd 300 gamma/ml koncentrációjú bovin szérumalbuminnal érzékenyítjük. Az így kapott reagens csak bovin szérumalbumin elleni antiszérummal agglutinálható. Az agglutinációs reakció céljaira az antiszérumot egy 3% tojás-albumint is tartalmazó puffer-oldattal hígítjuk. Az agglutinációs reakció inhibitálására meghatározott antiszérumnhígítás mellett 0,3 gamma/ml koncentrációjú bovin-szérumalbumin elegendő. 10. példa: Egy a Dow Chemical Co. cég, Midland, Michigan USA által gyártott, 0,56 mikron átmérőjű részecskéket tartalmazó és 1,25% koncentrációjú látex-szuszpenzió részecskéit bovin szérumalbuminnal előérzékenyítjük és chorion gonadotrop hormonnal érzékenyítjük, az 1. példában leírthoz hasonló módon. Egy ugyancsak a Dow Chemical Co. cég által készített, 0,80 mikron átmérőjű részecskéket tartalmazó látex részecskéit is hasonló módon előérzékenyítjük és érzékenyítjük. A fentiekhez hasonló módon kezelünk még bovin szérumalbuminnal és chorion gonadotrop hormonnal egy ugyanettől a cégtől származó 1,3 mikron átmérőjű részecskéket tartalmazó látex-szuszpenziót is. Mindhárom fenti módon előállított reagens kitűnő érzékenységet és igen nagyfokú specifikusságot mutat. 11. példa: Egy, a Dow Chemical Co. által előállított, 0,80 mikron átmérőjű részecskéket tartalmazó 5 látexet 1 mg/ml koncentrációjú bovin szérumalbuminnal előérzékenyítünk és azután 300 gamma/ml koncentrációjú humán gamma-globulinnal érzékenyítjük az 1. példában leírthoz hasonló módon. Ez a reagens humán szérum-A° fehérjék elleni ló-szérummal vagy rheuma-faktort tartalmazó humán szérumokkal egyaránt agglutinálható. 12. példa: 15 A Dow Chemical Co. által előállított, 0,80 mikron átmérőjű részecskéket tartalmazó látexet 2 mg/ml koncentrációjú bovin szérumalbuminnal előérzékenyítjük, majd 100 gamma/ml kon-20 centráció jú humán folliculus-érlelési hormonnal érzékenyítjük, a fentebb leírt eljárással. E reagens csak specifikus antiszérummal agglutinálható és az agglutináció már kb. 1 gamma/ml koncentrációjú hormonnal inhibitálható. 25 13. példa: „Bactolatex 0,81" látex-szuszpenziót 2 mg/ml koncentrációjú bovin szérumalbuminnal előérzé-30 kenyítünk, majd egy chorion gonadotrop hormon elleni nyúl-antiszérum euglobulin-frakció 5 gamma/ml koncentrációjú oldatával érzékenyítjük. Az így készített reagens 5 NE/ml koncentrációjú chorion gonadotrop hormon oldattal 35 agglutinálható. 14. példa: Bentonit-szuszpenziót készítünk J. Bozicevich 40 előírása szerint (ismerteti: Immunochemical Methods, Blackwell Scientific Publications, Oxford 1964, 98. és köv. old.). Ennél az eljárásnál az ún. nátrium-bentonitot alkalmazzuk kiindulóanyagként. A kapott szuszpenziót 2%-os kon-45 centrációban 1 mg/ml bovin szérumalbuminnal előérzékenyítjük és 200 gamma/ml chorion gonadotrop hormonnal érzékenyítjük az 1. példában leírt módszer szerint. 50 15. példa: 1 ml absz. alkoholos 10%-os masztix-oldatot élénk keverés közben hozzáadunk 24 ml 0,1 55 mólos, 8,2 pH-értékű borát-pufferoldathoz (vö. A. A. Pit, Ned. T. Geneesk. 1103, 2310, 1959). A kapott szuszpenzió 5 ml-jét 0,3 ml bovin szérumalbumin-oldattal (3%-os), majd 0,2 ml 750 NE/ml koncentrációjú chorion gonadotrop hor-60 mon oldattal elegyítjük. Az így készített szuszpenziót 20 óra hosszat inkubáltatjuk 20 C° hőmérsékleten, majd további kezelés nélkül használjuk fel. Chorion gonadotrop hormon antiszérummal specifikus agglutinációt kapunk. A 65 chorion gonadotrop hormon 3—5 NE/ml kon-5