153835. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antibiotikumok előállítására
153835 15 n A n-butanolt csökkentett nyomáson lepároljuk. A maradványt pH = 8,5 értéken 1/15 mólos foszfátpuffer oldatban szuszpendáljuk, az oldhatatlan, tisztított antibiotikum-elegyet leszűrjük és szárítjuk. b) benzilaminsó előállításával A nyers nátriumsó 100 g-ját 10 liter pH = 9,5 értékű 1/1.5 mólos dinátriumíoszíátpufíer oldatban feloldjuk. A nem oldódó részt segédanyag jelenlétében leszűrjük. A sötét színű szürletet konc. sósavval pH = 2,5-re állítjuk be. A nyert szuszpenziót ugyanannyi butilacetáttal extraháljuk, miközben a kicsapódott antibiotikum oldatba megy. A butilacetát oldatot csökkentett nyomáson 1800 ml-re bepároljuk. Csekély mennyiségű oldhatatlan rész leválasztása után a szürlethez 100 ml benzilamin és 100 ml butiiacetát oldatát adjuk. A finom csapadék alakjában leváló benzilamin sót leszűrjük, kevés butilacetáttal, majd vízmentes éterrel mossuk. A benzilamin só 20 g-ját 140 mi metanolban oldjuk és 190 ml víz hozzáadása után sósavval pH = 2,5-re állítjuk be. A szuszpenzió viszkozitásának csökkentésére további 300 ml vizet adunk hozzá. Az elegyet azután 2-szer 400—400 ml butilacetáttal extraháljuk. Az egyesített butilacetát kivonatokat kb. 800 ml térfogatra pároljuk be. A besűrítésnéi kicsapódó nyers savat leszűrjük és hideg metanollal mossuk. A termék forró metanol és benzol elegyéből átcsapható. A kiváló finom eloszlású antibiotikumok olvadáspontja szárítás után 228—230 C°. c) Acetonnal való extrahálás: 50 g nyers nátriumsót 600 ml acetonban szuszpendálunk és 30 ml 10%-°3 vizes sósavoldat hozzáadása után 12 órán át keverjük. Az oldhatatlan részt leszűrjük és kevés acetonnal mossuk. A mosó acetonnal egyesített szürletet csökkentett nyomáson kb. 100 ml-ig bepároljuk. A koncentrátumhoz 500 ml vizet és 200 ml benzolt adunk, miközben a szilárd anyagnak 2 folyadékfázisban elosztott szuszpenziója képződik. E szuszpenzió csapadékát a nyers savas antibiotikum-elegy képezi, melyet 100 ml metanolban 40—50 C°-on diszpergálunk, majd szobahőmérsékletre hűtünk és 12 órán át hidegen állni hagyunk. A leváló szilárd termék a tisztított antibiotikum-elegy. 3. példa: A tisztított antibiotikum-elegy szétválasztása komponenseire 5 g acetonnal tisztított antibiotikum-elegyet 200 csövecskéből álló Craig ellenáramú megosziásos készülékben egy felső vizes pH = 8,2 értékű 1/15 M K2 HP0 4 pufferoldat és egy alsó szerves fázis között, mely azonos mennyiségű izopropilalkoholt és kloroformot tartalmaz, megosztunk. A puffer és szerves fázis egyensúlya beálltával a megosztást 200 csövecskén át — melyek mindegyike mindkét fázis 40 mí-ét tartalmazza — a szokott módon végezzük. A megosztás eredményeként a (3), (4), (5) és (6) képletű antibiotikumok keverékét az 1—140 csövecske, a (7), (8), (9) és (10) képletű antibiotikumok keverékét a 141—200 csövecske tartalmazza. Az eljárást ezután 200 pótcsövecskében pH — = 8,9 pufferrel megismételjük. Az ismételt eljárásnál (összesen 400 csövecske) a felső fázisban a (3) képletű antibiotikum a 120—152 csövecskében van. A (4) és (5) képletű antibiotikumot a 161—170 és a (5) és (6) képletű antibiotikumot a 185—195 csövecske tartalmazza. Nem lehetett biztonsággal megállapítani, hogy a 161—170 csövecskében a (4) és (5) képletű antibiotikum jelen van-e és melyik az az antibiotikum, mely a 185—195 csövecskében helyezkedik el. A 153—160 csövecskék vagy a (4) és (3) képletű, vagy a (3) és (5) képletű antibiotikumok elegyét tartalmazzák, míg a 171—184 csövecskékben a (4) és (5) képletű antibiotikum elegye van jelen. Az alsó fázisban az antibiotikumok megoszlása a csövecskékben azonos a felső fázisban levővel. Az antibiotikumot az oldószer-fázisból az azonos tartalmú csövecskék összeöntésével izoláltuk. A (3) képletű antibiotikumot pl. a 120— 152 csövecskék tartalmának összeöntésével és az oldószer teljes elpárologtatásával nyerjük. A fent megadott csőcsoport puffer-fázisát pH = = 2,5-re megsavanyítjuk. Az antibiotikumot butanollal, vagy kloroform/izopropilalkohol 1 : 1 elegyével extraháljuk. Az extráktól szárazra pároljuk, miközben az antibiotikum leválik. A fenti ellenáramú megoszlásos módon nyert (3) képletű antibiotikumot ezután további 200 csövecskén vezetjük át. 3 izomer vegyületet nyerünk, mégpedig a 90—100-as. a 120-as és a 140-es csövecskékben. Ez 3 különböző rokon izomer jelenlétére vall, melyek tényleges szerkezeti képlete ez idő szerint még nem ismeretes. Mindeme izomerek bioakttvak, Staphylococcus aureussal szemben nagy aktivitást mutatnak. A fenti módon izolált (7), (8), (9) és (10) képletű antibiotikumok elegye ellenáramú megoszlásos, 200 csöves Craig rendszer segítségével szétválasztható (7) és (8), illetve (9) és (10) képletű képletű antibiotikumok elegyére. Az oldószer-rendszer a fent leírttal azonos, azaz a szerves fázis egyenlő térfogatú izopropilalkohol és kloroform elegy, míg a vizes fázis pH = 7,0 értékű 1/15 mólos dikáliumfoszí'át pufferből áll. Miután az oldószer és puffer közti egyensúly beállott, a (7)—(10) képletű antibiotikumok elegyét beöntjük a készülékbe és a 200 csövecskén átvezetjük. A (7) és (8) képletű antibiotikumok a 110-es, a (9) és (10) képletűek a 170-es csőben vannak. 10 15 20 25 Í0 a 5 40 45 50 55 8
