153831. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1,4-dién-3,17-dion-szerkezetű szteroidok mikrobiológiai előállítására

153831 szuszpenzió 1 ml-ével oltottunk be. A növesztés két napig tartott 28 C°-on, rázóasztalon. A tenyészetet ülepítettük és a táptalajt azonos térfogatú 0,4%-os steril nátrium-klorid oldatra cseréltük ki. A tenyészethez 20 mg koleszta-1,4--dién-3-ont adagoltunk 1 ml etanolban és 7,2 mg 8-"hidroxi-kinolint 0,5 ml acetonban. A lombikot 37 C°-on rázattuk két napig. A fermentlé feldolgozása és szteroidtartalmának meghatározása során az 1. példában említett módon jártunk el. 10 lombik átlagát tekintve 41 súlyszázalék androszta-l,4-dién-3,17-dion volt kimutatható. 8. példa: Minden a 7. példa szerint jártunk el, azzal a különbséggel, hogy koleszta-l,4-dién-3-on helyett 5 alfa-kolesztán-3-ont adagoltunk a tenyészethez. 38 súlyszázalék androszta-l,4-dién-3,17--dion volt kimutatható. 9. példa: Mindenben a 7. példa szerint jártunk el, azzal a különbséggel, hogy koleszta-l,4-dién-3-on helyett koleszt-5-én-3-ont adagoltunk a tenyészethez. 38 súlyszázalék androszta-l,4-dién-3,17-dion volt kimutatható. 10. példa: Mindenben a 7. példa szerint jártunk el, azzal a különbséggel, hogy koleszta-l,4-dién-3-on helyett koleszta-4,6-dién-3-ont adagoltunk a tenyészethez. 36 súlyszázalék androszta-l,4-dién-3,17--dion volt kimutatható. 11. példa: Mindenben a 7. példa szerint jártunk el, azzal a különbséggel, hogy koleszta-l,4-dién-3-on helyett ergoszterint adagoltunk a tenyészethez. 28 súlyszázalék androszta-l,4-dién-3,17-dion volt kimutatható. 12. példa: Mindenben a 7. példa szerint jártunk el, azzal a különbséggel, hogy koleszta-l,4-dién-3-on helyett ergoszta-4,22-dién-3-ont adagoltunk a tenyészethez. 30 súlyszázalék androszta-l,4-dién-3,17-dion volt kimutatható. 13. példa: Mindenben a 7. példa szerint jártunk el, azzal a különbséggel, hogy koleszta-l,4-dién-3-on helyett sztigmaszterint adagoltunk a tenyészethez. 27 súlyszázalék androszta-l,4-dién-3,17-dion volt kimutatható. 14. példa: Mindenben a 7. példa szerint jártunk el, azzá] a különbséggel, hogy koleszta-l,4-dién-3-on helyett pregna-5,16-dién-3 béta-ol-20-on-3-acetátot adagoltunk a tenyészethez. 84 súlyszázalék androszta-l,4-dién-3,17-dion volt kimutatható. E 15. példa: Mindenben a 7. példa szerint jártunk el, azzal a különbséggel, hogy koleszta-l,4-dién-3-on helyett progeszteront adagoltunk a tenyészethez. 10 66 súlyszázalék androszta-l,4-dién-3,17-dion volt kimutatható. 16. példa: -5 Mindenben a 7. példa szerint jártunk el, azzal a különbséggel, hogy koleszta-l,4-dién-3-on helyett androszt-4~én-3,17-diont adagoltunk a tenyészethez. 85 súlyszázalék androszta-l,4-dién-3,17-dion volt kimutatható. 20 17. példa: Mindenben a 7. példa szerint jártunk el, azzal a különbséggel, hogy koleszta-l,4-dién-3-on he-25 lyett androszta-4,6-dién-3,17-diont adagoltunk a tenyészethez. 81 súlyszázalék androszta-l,4-dién-3,17-dion volt kimutatható. Í0 50 18. példa: Az 1. példa fermentációs körülményei között koleszterin helyett 1 g 11-keto-progeszteront adagoltunk a tenyészethez. A keletkező androszta-l,4-dion-3,ll,17-trion mennyiségét lenyeső gében az 1. példában leírtakkal azonos módon mértük Á = 238 m/x-nál kapott extinkció segítségével. Az átalakítás befejezése után a fermentációs folyadékot leszűrtük, a szürletet 3X20 térfogatszázalék diklór-etánnal kivontuk. A ki-40 vonatokat egyesítettük, 1%-os nátrium-hidroxid oldattal 8-hidroxikinolin-mentesre, majd vízzel semlegesre mostuk és szárítás után szárazra pároltuk. A maradékot (1,0 g) dietiléterből kristályosítottuk (0,550 g), majd szenezés után ace-45 ton-petroléter elegyéből átkristályosítottuk. 0,37 g androszta-l,4-dién-3,ll,17-triont kaptunk. (37 súlyszázalék); op.: 195—196 C°, [<*]D

: 235°, (c = l, aceton), ATM : 238 ni/x. 19. példa: Az 1. példa fermentációs körülményei között, koleszterin helyett 1 g lla-hidroxi-progeszteront 55 adagoltunk. A keletkező androszta-l,4-dién-lla-ol-3,17-dion mennyiségét lényegében az 1. példában közölt módon állapítottuk meg A = 247 m/x-nál mért extinkció segítségével. Az átalakulás befejezése után a fermentlevet leszűrtük. 60 A szürletet 3X20 térfogatszázalék etilacetáttal kivontuk. Az egyesített kivonatot 1%-os nátrium-hidroxid oldattal 8-hidroxikinolin-mentesre, majd vízzel semlegesre mostuk és szárazra pároltuk. A maradékot (0,400 g) aceton-éterből 65 kristályosítottuk. így 0,180 g androszta-l,4-dién-4