153683. lajstromszámú szabadalom • Eljárás legalább gyógyászati minőségű viomicin-sók előállítására

153683 kötött kapacitás marad, a tömény savval nyert e'uátumból közvetlenül kristályos viomicin-só nem állítható elő és a szerves oldószeres lecsapással nyert amorf viomicin-só is igen rossz minőségű, 75—80% tisztaságú és igen magas 5 hamutartalmú termék lesz. A leoldás során nyert vi omicin-tartalmú oldatokat pH: 6,5—7.5 értéken aktív szénnel derítjük, vízzel 3—3,5% töménységűre hígítjuk és 20—50 C°-on célszerűen 35 C~-on annyi 10 vízzel elegyedő neutrális oldsózert, előnyösen metanolt, etanolt vagy acetont adunk az oldathoz, hogy a viomicin kiválása meginduljon. El-hor, metanol esetén kb. 3/s térfogat szükséges. Az oldatot ezután lassan -4-2 C°-ra hűtjük 15 és 12—24 óráig ezen a hőmérsékleten tartjuk, majd a kristályos viomicin-sót szűréssel elkülönítjük: tisztasága 99,5%, Ügy is eljárhatunk, hogy a viomicin-tartalrnú eluatumot fölös mennyiségű, előnyösen 20 2,5 térfogatú vízzel elegyedő neutrális szerves oldószerbe, pl. metanolba, etanolba, acetcnba öntjük és így kicsapjuk az amorf viomicin-sót; tisztasága 90—95%. A kapott termékekből igen nagy tisztaságú, 25 injekciós készítmény céljára alkalmas kristályos viomicin-só úgy nyerhető, hogy az amorf viomicin-sóból vízzé] 30—35% koncentrációjú oldatot készítünk, 3 térfogat % aktív szénnel derítjük, majd szármentesre szűrjük. Ezzel 20 a művelettel eltávolítjuk az amorf viomicmben esetleg jelenlevő minimális mennyiségű, vízben a viorni cinnél rosszabbul oldódó szennyezéseket, melyek az injekciós oldat készítésénél enyhe opaleszenciát okozhatnának. A leszűrt 25 oldatot ezután vízzel megfelelő koncentrációra hígítjuk és a viomicin-sót a fent leírt módon kikristályosítjuk. Az eljárás megvalósítása során célszerű mind a vicmicinnek a gyantán történő megkötését, 40 mind pedig a gyantaágyakról történő leoldását folyamatosan, ellenáramban végezni. Ilyen üzemmenet esetén az erjesztéses oldatban levő viomicinnek legalább 80%-a nyerhető ki kristályos állapotban. 45 A találmány alapján első ízben sikerült az erjesztéses oldatból ioncserélő gyanta segítségével elkülönített bázisos antibiotikumot közvetlenül az ioncserélő gyanta eluátumából egy- 50 szerű kristályos'tással nagy tisztaságban, k?;

stályos állapotban előállítani. Az eljárás egyúttal messzemenően egyszerűbbnek, üzemb'zlosabbnak és gazdaságosabbnak bizonyult a viomicin előállítására eddig ismert összes eljárás- 55 nál. Eljárásunk további nagy előnye, hogy lehetővé teszi a viomicin kinyerésére alkalmazott gyanta kapacitásának teljes kihasználását és közvetlenül kb. 35—40%-os, gyakorlatilag tiszta vizes viomicin-sóoldat nyerését. így a viomi- (JQ cinnek tiszta állapotban történő kinyerése céljából sem bepárlást, sem pedig egyéb tisztítási műveletet nem. kell alkalmazni. A találmány szerinti eljárás foganatosítására az alábbi kiviteli példákat adjuk meg: RS 1. példa: 1000 liter 1,8 mg ml vionlicint tartalmazó erjesztéses oldathoz 3 kg Na-oxalátot adunk, majd oxálsavval (kb. 10—12 kg) az erjesztéses oldat pH-ját 3-ra állítjuk be. Egy óra hosszat tartó keverés után a micéliumot szűréssel elkülönítjük és oxálsavval pH = 3-ra állított 100 liter vízzel mossuk. A mosó folyadékkal egyesített szürletet szilárd Na-karbonáttal vagy vizes NaOH-oldattal keverés közben pH = 7-re semlegesítjük. így 990 liter 1,78 mg/ml viomicin-koncentrációjú oldatot kapunk. Az élesre szűrt erjesztéses oldatot ezután egyenként 1—1 liter Wofatit CP-300 jelzésű (25—50 mesh) Na»eikiusú katiencserélő gyantát tartalmazó, 5 db sorbakapcsolt oszlopból álló rendszer első oszlopára visszük. Az egyes oszlopok átmérője 6 cm. Az átfolyatás sebessége 25 liter/óra. A viomicin megkötését úgy végezzük, hogy az erjesztéses oldat mindig egyszerre legalább két egymás után sorbakapcsolt oszlopon folyjék át. Az első 300 liter fermentlé átfolyatása után, amikor az első oszlop több viomicint már nem képes megkötni, a fermentlevet a második és harmadik oszlopon vezetjük át. Ujabb 300 liter fermentlé átfolyatása után a második oszlop is teljesen telítődik viomicinnel. Ekkor a második oszlopot is lekapcsoljuk és a ferment"evet a harmadik és negyedik oszlopon engedjük át és így tovább. A teljes íermentlé-mennyiség átfolyatása során az első négy oszlop közel egyforma mértékben telítődik viomicinnel. Egy-egy oszlop kb. 390—400 g viomicint köt meg. Az utolsó, ötödik oszlop a nem teljes telítés miatt már csak 130 g viomicint tartalmaz. Ez az oszlop folyamatos üzemmenet esetén egy következő feldolgozásnál célszerűen első oszlopként használható. A négy eis5 gyantaágyról, mely a fermentlében levő viomicin 91%-át tartalmazza (7,4%-ot az utolsó oszlop kötött meg), a továbbiak során a viomicint 2,5 1 vízzel történő kimosás után 3 n (15%-os) hideg, -j-5°-ra hűtött vizes kénsavval oldjuk le. A kénsavat a gyantaágy felkeverése nélkül visszük fel az oszlopra. Az eluálás sebessége 1 liter óra. A viomicinnek az eluátumban való megjelenése után, 2100 ml eluátum térfogatnál, a viomicin koncentrációja igen hamar eléri a maximális értéket. Az eluátum pli-ja kezdetben 7, de 5200 mi-nél a lejövő oldat a H-ionok áttörése miatt hirtelen erősen megsavanyodik. Ekkor szedőt cserélünk és további 800 ml savas eluátum-frakciót fogunk fel. A neutrális eluátum-frakció térfogata 3100 ml, viomicin koncentrációja 385 mg/ml. A savas eluátum-frakció 340 mg/ml viomicint tartalmaz. Ezután további 1 liter eluatumot szedünk, melynek viomicinkoncentrációja már csak 85 mg/ml. Ezt az eluatumot célszerűen a következő oszlop eluálásának megkezdéséhez használhatjuk fel. Az első 880 ml savas eluátum-frakciót hűtés közben trietilaminnal pH == 7-re semlegesítjük és egyesít-