153665. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új ACTH-hatású peptidek előállítására
MAGTAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1965. VIII. 10. (Cl—562) Svájc-i elsőbbsége: 1964. VIII. 13., 1964. XII. 02. Közzététel napja: 1966. XI. 22. Megjelent: 1967. IX. 20. 153665 Szabadalmi osztály: 12 q 1—13 Nemzetközi osztály: C 07 c Decimái osztályozás: Feltalálók: Dr. Iselin Beat, vegyész, Riehen, Dr. Kappeier Heini vegyész, Bettingen, Dr. Riniker Bernhard vegyész, Reinach, Dr. Rittel Werner vegyész, Basel, Svájc Tulajdonos: CIBA Aktiengesellschaft cég, Basel, Svájc Eljárás új ACTH-hatású peptidek előállítására 1 Ismeretes, hogy a béta-kortikotropin peptidlánca, különösen a karboxil-végen, messzemenően változtatható, anélkül, hogy az adreno*kortikotrop hatás veszendőbe menne. így pl. a peptid 1 mg anyagra vonatkoztatott aktivitása (kb. 100 NE/mg) megmarad, ha a természetes ACTH peptidláncának karboxil-végén az aminosavakat egészen a 20. aminosavig lehasítjuk. További aminosavak lehasítása esetén a hatás fokozódó mértékben csökken. Így a béta1-19 -kortikotropin még az 1 mg anyagra számított ACTH-aktivitás kb. 30%-ával rendelkezik, a béta1-ie -kortikpt;ropin esetében e hatás már csak kb. 1%/mg. A peptidlánc aminővégén az első aminosav, a szerin1 , az aktivitás csökkenése nélkül volt glicinnel helyettesíthető (Dixon, Biochem. J. 84, 462, 1962). További, viszonylag csekély mértékű változtatások is már az aktivitás csökkenését fokozzák. Ha a béta1 ~ 23 -l kortikiotropin-23-amidot — amely kb. 100 NE/mg hatást mutat — vesszük összehasonlítási alapként, akkor azt tapasztaljuk, hogy az 1. aminosavnak, a szerinA-nek az eltávolítása esetén az aktivitás felére csökken; a 3. aminosavnak, a szerin3 -nek alaninra való kicserélése ugyancsak félére csökkenti az aktivitást, míg a 2. aminosavnak, a tirozinnak fenilalaninnal való kicserélése esetén az, aktivitás kétharmadára csökken (vö. Z. Naturf. 19b, 858—860, 1964). Kicserélték már az ACTH egy oly töredékében, amelynek ACTH-aktivitása nincs MSH (melanocita-stimuláló hormon) aktivitást azonban mutat, a kortikotropin 6—10 aminosav-szek-5 venciájából álló pentapeptidben (H-His-Phe-Arg-Try-Gly-OH) a természetes L-hisztidin, L-fenilalanin, L-arginin és L-triptofán aminosavakat a megfelelő D-aminosavakkal is; az így kapott pentapeptid már nem, mutatott 1° MSH-aktivitást (vö. Hano és mtsai, Biochim. Biopíhys. Acta 90, 201, 1Ö64). Meglepő módon azt találtuk, hogy az oly peptidek, amelyek az ACTH-hatású, legalábbis az N-láncvégig teljes ACTH-szekvenciát tartal*5 mázó peptidektől, amelyekbien azonban egyes aminosavak az ACTH-hatás megtartása mellett valamely más természetes alfa^aminosavra lehetnek kicserélve, csak abban különböznek, hogy az 1—4 aminosavak közül legalább kettő 20 D-konfigurációt mutat, tartósabb ACTH-hatással rendelkeznek, mint a megfelelő, de D-aminosavat nem tartalmazó peptidek. A jelen találmány tárgyát tehát oly peptidek előállítása képezi, .amelyek a legalább az 25 N-láncvégig teljes ACTH-szekvenciájú, ACTH-hatású, de egyes aminosavak helyén esetleg más természetes alfa-aminosavat tartalmazó peptidektől csak annyiban különböznék, hogy az 1—4. aminosavak közül legalább kettő D-20 -konfigurációt mutat; kiterjed a találmány az 153665
