153593. lajstromszámú szabadalom • Eljárás Primycin termelésére

153593 8 növekedés mértéke Szénforrás I 1/1 1/2 Laktóz _ 5 Fruktóz, — — (+) Mailtóz — — — Ribóz — — —' Glicerin + + +(+)• Na-aoetát (+) (+) +(+) 10 Na-ciitrát — — — Nantarfearát — (+) +(+) Na-foanmiát (+) (+) (+) (Jelmagyarázat lásd I. táblázat.) Minthogy a Thermopolyspóra galeriensis törzs fejlődésének tapasztalataink szerint a szervetlen nitrogénforrás általában nem kedvez, az egyes .szénhidrát fajtáknak a törzs növekedésére gyakorolt hatását szerves mtrogiánforrás — 1-aiszpairagin — jelenlétében is megvizsgáltuk. A növekedés mértékének kiértékelése 72, 120, I168, 240 és 336 órás 37 C°-on történő inkubálás után történt. E kísérlet eredményeit a IV. táblázatban, foglaljuk össze. Alaptáptalaíjmak itt is a Czapék-Dox táptalajt használtuk, csak a nátriumnitrát helyett a nitrogénre számított egyenértékű mennyiségű 1--aiszparag'int használtunk, míg a szacharóz tartalmát azonos mennyiségű — már a !HI. táblázatban is felsorolt — szénforrássall helyettesítettük. IV. táblázat A Therimopolyspóra galeriensis növekedése szerves nitrogénforrás — 1-aszparagin — jelenlétében különböző sziénforrásokon Szénforrás a növekedés önértéke Szacharóz Glükóz Mannit Galaotóz Szoiibáz Xylóz Raimnóz Arabinóz Lalktóz Früktóz Maltóz Ri'bóz Gliicerin Na-aoetát Na-citrát Na-formiát Nia-tatrítarát ++++ ++++ ++++ ++ ++++ ++++ ++ ++++ ++++ 4-+ (Jelmagyarázat lásd I. táblázat). 15 20 25 £0 £5 40 45 50 55 60 65 A Thermopolyspóra galeriensis törzs prknycin termelése céljából történő tenyésztésére célszerűen olyan táptalajt .alkalmazunk, mely szerves szénfoirrásként szénhidrátot, mint keményítőt, vagy saoeharozit, nitrogénforrás'ként pedig nitrogéntartalmú szervesanyagot, mint szójalisztet, élesztősejt szuszpenziót, vagy hasonlókat, részben habgátlákénit, de főleg szántén szénforrásként különböző állati 'és növényi olajokat és zsíróikéit, valamint ezek alkotórészeit, mint pl. pálimaolaj, napraforgóolaj, stearinsav, glycerin, stb. Szervetlen sóként padig elsősorban alkálirfoszfátokat és kloridokat, valamint kallciumkarbonátot tartalmaz. A fermentációt előnyösen 28 C° hőmérsékleten végezzük el. Magasabb hőmérsékleten pl. 37 C° körül a gomba növekedése .gyorsabb, a fermentáciiós idő rövidebb és a termelés is emelkedik. A tenyésztésit kevert és levegőztetett fermenitarban végezzük el. A termelt primycinnek a fermentációs léből való elkülönítése ismert mádon is történhet. Nagyobb mennyiségű nyerstermék kinyierése azonban nehézségekkel jár, tekintettel arra, hogy a primycm poláros oldószerekben közismerten rendkívül rosszul oldódik, és a primycin száraz alkoholokkal történő hatóanyag extrakciója — még a folyamatos extraktor okban is — (Soxhlet) — nehézkes, hosszadalmas és rossz hatásfokkal Idivitelezhető műveleti lépés volt. A száraz alkoholok sűrítményeiből történő vízzel való lecsapás, a víz oldható szennyezéseimek eltávolítása céljából körülményes, ezért gazdaaágasabb (megoldást tett később szükségessé. Az új törzs birtokában és a megváltozott dúsabb táptalaj viszony dk (mellett termelt primycin nyerstermékének jobb hozammal történő kinyerése az alábbi eljárással valósítható meg: A Thermopolyspóra galeriensis tenyésztési folyadékának hatóanyag tartalmát — miután a primycin termostabil antibiotikum — magasabb hőmérsékleten, gyengén savanyú közegből — (pH 6—7) a gomba mycéliumának csapadékával együtt szeparáljuk, majd a nedves csapadékról az antibiotikumot oldószer keverékkel forralás közben oldjuk le és a kivonat vákuum beipárlása után leváló magas aktivitású nyersterméket, a vízoldhaitó szennyezéseket tartalmazó anyagoktól elkülönítve, igen jó kitermeléssel nyerhetjük ki. Az előzményekből ismeretes már, hogy a Thermopolyspóra galeriensis új törzs egyik jellemzője, hogy szénhidrátokban gazdag ún. termel őtáptalaj on (szójaiiszt 4%, keményítő 4%) a primycint ipari szinten (2000—3000 ftg/ml) termeli. A korábbi közlésékkel szemben a (megváltozott táptalaj viszonyok mellett a magas hatóanyag tartalmú tenyésztési folyadékokból a primycin nyerstermékét a tenyésztési folyadék felfőzése után (60—00 C°-on), imositmár a denaturált mycéliumhoz, fehérjéhez, feleslegben levő ikeményítőlhöz adszorbeálva, közel neutrális pH (6—7)-n egyszerű szűréssel, oenitrifugálással, vagy iszapoló szeparálással izolálhatjuk. A szürletben, illetőleg a felülúszó folyadékban 4