153561. lajstromszámú szabadalom • Eljárás egy új antibiotikum előállítására

153561 17 18 port kapunk 5680 egység/ml antibiotikum tartalommal. 5. példa A 4. példáiban leírt módon kapott, 5000 egység/mg-os 10 g antibiotikum-káliumsót feloldunk n-propanol és víz egyenlő térfogatarányú 100' ml elegyében. A kapott oldatot átbocsátjuk 20 g 4 pHns alumíniumoxidot tartalmazó oszlopon, majd az antibiotikumot ugyanazzal az oldószereleggyel eluáljuk. Az eluátum első 400 ml-ét 20 torr nyomáson 40 C° alatt 10. ml-re párolj ok be, majd a kapott koncentrátumot 24 óra hosszat 20-szoros térfogatú desztillált vízzel szemben dializáljuk eiy regenerált cellulózhártyán keresztül, hogy kiküszöböljük a szervetlen sókat és különféle szerves szennyezéseket. A dializált oldathoz 10-szeres térfogatú acetont adva csapadék válik ki. Az antibiotikum kicsapódott káliumsóját szűrőre visszük, acetonnal mossuk, és éjjelen át 35 C°~on 2 torr nyomás alatt megszárítjuk. 2 g gyakorlatilag színtelen port kapunk 880 egység/mg antibiotikum tartalommal. 6. példa A 4. példában leírt módon kapott 175 g terméket feloldunk 3,'5 liter 7 pH-jú vízben. A vizes oldatot átbocsátjuk egy 15 liter kloridfázisban levő Dowex 1X2 gyantát tartalmazó oszlopon; az átfolyó folyadékot a csatornába eresztjük. A gyantát egymás után 15 1 desztillált vízzel, 20 liter víz-hangyasav eleggyel (90 : : 10 térfogat), 40 liter metanol-víz-hangyasav eleggyel (80 :10 :10 térfogat) és 20 liter metanol-víz eleggyel (80 : 20 térfogat) mossuk, majd az antibiotikumot 75 liter, 10 g/liter káliumkloridot tartalmazó metanol-víz eleggyel (80 : 20 térfogat) eluáljuk. Az eluátum 40 liter térfogatú középső frakcióját 20 torr nyomás alatt 40 C° alatti hőmérsékleten 1,1 literre pároljuk be; a koncentrátumot 24 óra hosszat desztillált víz árammal szemben egy regenerált cellulózhártya segítségével dializáljuk. Az eluátum középső frakciójának (1,5 liter) teljes aktivitását tartalmazó dializált oldatot 20 torr nyomás alatt 200 ml-re koncentráljuk. Az így kapott konientrátumhoz 5-szörös térfogatú acetont adunk, mire az antibiotikum káliumsója kicsapódik. A csapadékot centrifugáljuk, acetonnal mossuk, és éjjelen át 35 C°-on 2 torr nyomás alatt megszárítjuk. 98 g káliumsót kapunk gyakorlatilag fehér, 8000 egység/mg antibiotikumot tartalmazó por alakjában. 7. példa Az 5. példában leírt módon kapott 9,25 g káliumsót feloldunk 0,5 liter vízben. Az oldatot mindaddig kavarjuk részietekben hozzáadott, összesen 32 g savas fázisban levő Amberlite I R 120 gyantával, amíg a pH-ja állandó (1,5) nem lesz. A gyantát szűréssel elválasztjuk, és 100 ml vízzel rázva mossuk, majd a szüredéket és a mosófolyadékot egyesítjük. A kapott oldatot liofolizálva 7,2 g tisztított antibiotikumot kapunk szabad sav alakjában, 8600 egység/mg tartalommal. A termék elemi összetétele: 47,85—48% C, 7,10% H, 4,45—4,50% N, 2,20% P, 38,20—38,40% O (a különbség). 8. példa Az 5. példában leírt módon kapott 27,75 g káliumsót feloldunk 1,5 liter vízben, és a 7. példában leírt módon kezeljük 100 g savas fázisban levő Amberlite I R 120 gyantával. A kapott savas oldatot 24,6 ml n-nátronlúg hozzáadásával 7 pH-ra állítjuk be. A semleges vizes oldatot liofilizáljuk. Így 19,6 g antibiotikumot kapunk nátriumsója alakjában. A termék elemi összetétele: 45,25—45,3% C, 6,55—6,90%, H, 4,25—4,15% N, 2,10% P, 3,15% Na, 38,3—38,8% O (a különbség). 9. példa A 6. példában leírt módon készült, 8000 egység/mg tartalmú 5 g káliumsót feloldunk 50 ml n-propanol-víz elegyben (50 :50 térfogat). Az oldatot átbocsátjuk egy n-propanol-víz elegyben (75 :25 térfogat) szuszpendált 4 pH-jú alumíniumoxidot tartalmazó oszlopon. Az antibiotikumot 200 ml n-propanol-víz eleggyel' (50 : 50 térfogat), majd 200 ml n~propanol-víz-tömény vizes ammónia (d = 0,925) eleggyel (50 : 49,5 : 0,5 térfogat eluáljuk. Az eluátumot 10 ml-es frakciókban külön gyűjtjük, és minden frakciót biológiailag megelemzünk. Az n-propanol-víz eluátum (50 : 50 térfogat) dús frakcióit, a 3—11. frakciókat egyesítjük, és 20 torr nyomás alatt legfeljebb 40 C°-on 10 ml-re koncentráljuk. A koncentrátumot 10 ml n-propanollal és 10 ml acetonnal hígítjuk, mire az antibiotikum kicsapódik. Szűrés, acetonos mosás és éjjelen át 35 C°-on 2 torr nyomás alatt való szárítás után 2,4 g színtelen káliumsót kapunk 9150 egység/ mg tartalommal. Az n-propanol-víz-tömény ammónia (50 : 49,5 : :0,5 térfogat) eluátum dús frakcióit, a 23—40. frakciókat egyesítjük, és a fent leírt módon kezeljük. Így 1,5 g színes port kapunk 85O0 egység/mg tartalommal. Szabadalmi igénypont: Eljárás a 8036 R.P. jelzésű új antibiotikum előállítására azzal jellemezve, hogy Streptomyces canadiensist (NRRL ,3165) egy legalább egy 10 15 20 25 20 35 40 45 50 55 60 9