153497. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a Theileria nemhez tartozó protozoák szaporítására

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1965. III. 25. (WE—330) Nagy-Britanniai elsőbbsége:. 1964. III. 25. Közzététel napja: 1966. IX. 22. Megjelent: 1967. V. 20. 153497 Szabadalmi osztály: 30 h 1—8 Nemzetközi osztály: A 61 k Decimái osztályozás: Feltaláló: Hulliger Lotte, Riehen/Basel, Svájc Tulajdonos: The Wellcome Foundation Limited cég, London, Nagy-Britannia Eljárás a Theileria nemhez tartozó protozoák szaporítására 1 A találmány a Theileria fajú protozoák tenyésztésére és különösen az ezekből nyert antigénanyag, valamint az ilyen antigént tartalmazó vakcinák előállítására vonatkozik. A Theileria fajú protozoák intraioélluláris pa- 5' razitáfc, amelyek a patás állatokon a theileriasis nevű betegséget okozzák. A Theileria parva okozza szarvasmarhákon az „East Coast fever" néven isimert megbetegedést. Bár a gerinces állatokon protozoák által okozott niegbetegedé- 10 sek gyakran váltanak ki immun-reakciót, a Theileria fajú protozoákból nyerhető antigénanyagiból eddig nem sikerült megfelelő vakcinákat előállítani és nem >volt ismeretes eléggé hatásos módszer <e pnoitozoáknak a kísérleti és 15 vakoinaterimelési célokra szükséges, mértékű szaporítására. Azt találtuk, /hogy vannak oly körülmények, amelyek között a Theileria fajú .protozoák gazdasiejtekben in vitro gyorsan és hatásosan 20 tenyészithetők, oly gazdasejtek segítségével, iamelyefc maguk is tenyészthetők kultúrákban a pro^ tozoával megfertőzött állapotban. Ilyen, a protozoák szaporodására megfelelő körülményeket biztosító gazdasejtek oly módon szaporíthatok, 25 hogy vegyes kultúrában tenyésztjük: őket egy, a protozoával nem fertőzhető szövetkultúra sejtjeivel, imég pedig újszülött hörcsög veséjének „BHK 21" sejtkultúrájával együtt. A BHK 21 újszülött hörcsög vese-sejtkultűrát, valamint ^0 annak előállítási módját és a tenyésztésre előnyös alkalmazható táptalajt az 1 015 2i62 sz. brit szabadalmi leírás ismerteti. A „BHK" megjelölés az angol „Baiby hamster kidney" rövidítése és e szövetkultúra megjelölésére általában használatos már a szákmában. A protozoákat agamontok (schizonták) alakjában tartalmazó gazdasejteket és a protozoával nem fertőzött sejtkultúrát a találmány szerinti eljárással azonos vagy hasonló szaporodási sebességgel tenyésztjük és így olyan vegyes kultúrához jutunk, amely folytatólagos tovább oltásokra is alkalmas. Gazdasejt- és protozoa-forrásként a fertőzött állatokból vett oly sejteket alkalmazhatunk, amelyek legalább 10%-tan vannak a protozoával fertőzve. Theileria annulata esetében a fertőzött borjú Vér-leukoci'ta-sejtjeit, Theileria parva esetében pedig a fertőzött ibika lépjéből vagy nyirokcsomóiból vett sejteket találtuk, legalkalimasabbaknak erre a célra. A szarvasmarhák Theileria parva vagy Theileria lawrencei protozoákkal oly módon, fertőzfoetők, bogy az állatokat a theileriasis: kísérleti tanulmányozása során szokásos eljárással fertőzött kullancsokkal hozzuk érintkezésbe. A Theileria annulata (Tova törzs) protozoával , való fertőzés fertőzött vér beoltása útján biztosítható. A betegség aktív szakaszát, amely a legalkalmasabb az in. vitro tenyésztésre szolgáló protozoák 153497 \