153301. lajstromszámú szabadalom • Eljárás alifás származékok új tripeptid és sóinak előállítására
3 153301 ragilin-I^fendManm^midot használunk. A reakciót 1 ekvivalens tóetilamin, valamint dimetílformaimid vagy vizes dimetilformamid jelenlétében, 0 C° körüli hőmérsékleten hajtjuk végre. A reakciótermékben a védő tercier-Jbutiloxikainboriil csoportot előnyösen trifluoreoetsavval 15—20 C° körüli, vagy 2n sósavval (ecetsavas közegben) 15—20 C° körüli hőmérsékleten cseréljük le hidrogénatomira. , Azt találtuk továbbá, hogy az 1. képletű L-metionü^Ix^szparagil J L-fenÍManin-iamid előállítható oly módon is," hogy 2. képletű védett L-metionin szármiazékot (ahol P jelentése valamely védőcsoport -és a képzeletben szereplő karboxilosoport a peptid kémiában általánosan használt módszerek valamelyikévé1 ! aktiválva -van) 4. képletű dipeptid észterrel hozunk reakcióba (mely képletben R jelentése alkil vagy aralkil gyök), az ily módon előállított termiéket aimmionolizisnek vetjük alá és a P védőcsoportot hidrogénatomra cseréljük le. A 4. képletben szereplő R jelentése előnyösen legfeljebb 6 szénatomot tartalmazó alkilgyök, például metilgyök. Amennyiben R aralkilgyököt képvisel, úgy jelentése előnyösen benzilgyök. A P védőcsoport minőségére, a reakciókörülményekre, a karfooxicsoport aktiválási módszereire, valamint a P védőcsoport eltávolítására vonatkozóan, az aktivált kárboxilcsoportot tartalmazó L-metionin származék és L-aszparaigil-L-fen:ilalanin-iamid reakciójánál elmondoifctaík értelemszerűen alkalmazandók a jelen reakciónál is. Az ammonolizist előnyösen valamely hígító- vagy oldószerben, például metanolban, 0—20 C°-os hőmérsékleten hajtjuk végre. A kiindulási anyagként használt L-aszparagil-L-fenilalanin-amid rírJbenziloxikarbonil- L-aszparagil-iL-fienilalaninnámid valamely észterének hidrogenolizisével ós/vagy hidrolizisével állítható elő. A 4. képletű dipeptid észter (mely képletben R jelentése a fent megadott) előállítása L-aszparaginsav valamely védett és aktivált a-karboxil-csoportot' tartalmazó származékainak és L-• -éenilalanin valamely észterének reakciójával, majd ezt követően a védőcsoport hidrogénatomra való kicserélésével történik. A találmányunk tárgyát képező eljárással elő' állított új tripeptidek fontos gyógyszeripari alapanyagok, melyek pl. aeilezett L-triptofanil^l^metíonil-lj-aszparagíl-I^fenilalanin-aimidok szintézisénél nyerhetnék felhasználást. E vegyületek hasznos gyógyászati tulajdonságokkal rendelkeznék és emlősök gyomor- és hasnyálmirigy-szekrécióját serkentik. A találmányt 'az alábbi példák szemléltetik, anélkül azonban, hogy aat azokra korlátoznánk. A példákban szereplő rész-mennyiségek súlyrészt jelentenek. 1. példa 215 rész N-(tereier-ibutiloxikarfoonil)-L-imetionin-2,4,5-triklórfeml-észtert, 140 rész L-<aszparagil-L^fenilalanin-tamidot, 50,5 rész trietilamint és 1800 rész dimetilformamidot 0 C°-on 2 órán keresztül keverünk. A keletkező oldatot 3 napon át 0 C°-on tartjuk, majd keverés közben 5000 rész jeges víz és 36 rész jégecet elegyéhez 5 adjuk. A reaíkcióelegyet 1 órán át 0 C°^on keverjük, szűrjük, a szilárd terméket vízzel majd éterrel mossuk, végül vákuumban, 40^50 C°on. szárítjuk. A kapott termék ,N-(teroier-butiloxifcarbonilJ-I^nietioinilJlx-aszpai^gil-ij-fenilala-10 nin-aimid; op.: 209—210 C° (bomlás közben). A fenti amidból 511 részt (op.: 209—210 C°, bomlás köziben) keverés közben, 10 C°-on 1300 rész trifluoreoetsavhoz adunk. Az oldatot 1 órán keresztül 18—20 C°-on keverjük, majd 15 30 000 rész étert adunk hozzá. A reakeióelegyet 0 C°-ra hűtjük, 10 percig ezen a hőmérsékleten tartjuk, majd leszűrjük. A szilárd terméket éterrel háromszor mossuk, majd .50 C°-on^20 Hgmm nyomáson szárítjuk. Fehér, szilárd anyag £0 formájában nyers L-mietionil-ÍL-aszparagil-L-fe^ nilalanin-amid-trifluoracetátot kapunk. A fenti trifluoraioetátiból 487 részt 2000 rész vízben oldunk és az oldatot 5—10 C°-on vizes ammónia hozzáadásával pH 6-ig semlegesítjük. 25 Az elegyet 2 órán keresztül 0 C°-on tartjük, szűrjük, a szilárd terméket vizes metanollal mossuk, majd 50 C°-on 20 Hgmm nyomáson szárítjuk. Fehér tűkristályok formájában L-metionil-L-aszparaigil-L-fen:iliáLainin-iamidot kapunk, c0 op.: 223:—225 C° (bomlás közben). A termék vizes metanolból vagy dimietilformamidból átkristályosítható. A termék vékonyréteges kromatográfiás viszgálata egyetlen, ninhiidrinnel előhívható foltot mutatott; RF = 0,46. E vizsgá£5 latnál adszorbensként szilifcagélt, oldószer rendszerként a 4 rész nnbutanol, 1 rész ecetsav és 5 rész víz össaeöntésekor keletkező elegy felső rétegét használtuk:. Oldószer elegyként 3 rész izobutanol és 1 rész 3%-os vizes ammónium-40 hidroxid oldat elegyét használva ugyancsák' egyetlen foltot kaptunk, R/? = 0,30. A kiindulási anyagként használt L^aszparagil-L-fenilalanin-amiid (op.: 188 C°, gázfejlődés közben) ismert módszerekkel állítható elő. 45 ' 2. példa 2,94 g L-aszparagil-íL-fenilalanin-metil-észter-hidrokilarid, 4,29 rész N-tercier-butiloxikárbo-~ nil-I^metiomnr2,4,5-triklór-fenil--észter, 50 rész 50 dimietíifarmaimid, 10 rész víz és 2,02 rész trietiflamin 'elegyét 0—4 C°Hon két napon keresztül keverjük. A reakcióelegy pH-ját n-sósav 0 C°on való beosepegtetésiével 4-^re állítjuk be, majd az elegyet 100 rész jeges vízbe öntjük. A kapott 55 keveréket 3X50 rész etilacetättal extraháljuk, az egyesített etilaoetát oldatot 5%-os vizes citromisawal, majd háromszor vízzel mossuk. Az extraiktat vízmentes , magnéziumszulfát fölött szárítjuk és vákuumban bepárpljuk. A maradé-60 kot 0 C°-on 50 rész ammóniával telített vízmentes metanollal kezeljük és az elegyet 0 C°on 36 órán át keverjük. A metanol és ammónia feleslegét vákpumtoan elpárologtatjuk, a szilárd maradékot 50 rész 'meleg metanolban oldjuk. 65 Az oldatot gyorsan 10 C°-ra hűtjük, vizes cit-2
