153299. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tetrapeptidszármazékok előállítására
153299 köre egyáltalán nincsen ezekre .á példákra korlátozva. A példákban említett „részek" súlyrészeket jelentenek. 1. példa: 5 2450 rész trifluorecetsav és 400 rész víz elegyéhez 10 C° hőmérsékletein, keverés köziben' 50! 0 rész N«-'(terc.'butiloxi l kairbonil)-L-triptofa!nil-Lr^metionil-'^-tBrc.butil) -L-aszpiairagll-L-f enilala- \ o nin-amidot adunk. A kapott oldatot 2 óra hoszszat keverjük 18—20 C° hőmérsékleten, majd 12000 rész étert adunk hozzá. Az elegyet 0 C° hőmérsékletre . hűtjük le, 10 percig ezen a hőfokon tartjuk, majd leszűr jük. A szilárd., mára.- 15 dákot éterrel háromszor mossuk, majd 20 mm Hg-oszlop nyomás alatt, 50 C° hőmérsékleten megszárítjuk. Ily módon L-triptofianil-L-rnetio-* nil-L-iaszpaíragil-L-fenilalanin-amid-trifluoriaicetátot kapunk, amely 185—190 C°-on felhalbzás 20 közben olvad. A fenti eljárás során kiindulóanyagként fel-, használásra kerülő Na-Ctercbutliloxikairboni^-L-triptofanil-L-metionil-C^-terc.buti^-L-aszpiairiagil-L-fienilalaiiin^aimid az alábbi módon állít- 25 ható elő: • ,• 251 rész LHmetionil-(/»'~terc.bui'il)-L-aszpara!gil-L-fenilalanin-amid-hidroklorid 2000 rész dimetilformaimiddal készített oldatát \f) C° hőmérsékletre hűtjük, majd 50,5 rész trietilaimint S Q adunk hozzá. Ezután 0 C° hőmérsékletre hűtjük a reakcióelegyet és ezen a hőfokon, keverés köziben hozzáadunk 241 rész Na ^(terc.butiloxikairíbonil)-L-triptofán-2í,4,,5-triklórfienilésztert. . A reakcióelegyet 16 óra hosszat tartjuk 0 C9 hő- 35 mérsékleten, majd 10 000 rész étert és 10 000 rész vizet adunk hozzá. Az elegyet leszűrjük és a szilárd maradékot etiainolból kristályosítjuk. Ily módon N«-(terc.íbutiloxikarbonil)-L-trtptotfanil-L-ímetionil-(^-terc/buitil)-L-aszparaigil-L-fenilala- .40 nin-aimidót kapunk, amely 175—176 C°-on olvad. •' ' ' ' Ha a fenti eljáráshoz hasonló módon dolgozunk, de azzal az eltéréssel, hogy az említett 241 rész N<^(ter: c.:butiloxiktoborűl)-L-trLptofánil- 45 -2,4,i5-triíklórifenilésziter Helyett 213 rész N«-(tercbutiloxikarbonilj-l^triptofanil-ir^^ alkalmazunk, ugyancsak á fent említett, 175— 176 C°-on olvadó termékhez jutunk. A kiindulóianyagkénit felhasználásira kerülő 50 N«-(terc.butiloxilkiarbonil)-LHtriptafán-2,4,5-triklórfeniiészter aiz alábbi módon állíttiaitó elő: 608 rész Na-JÍitercJbutiloxikairiboni^-ly-triptoifán és 434 rész 2,4,5-triklórfenol 6000 rész etilacetáttal készített Oldatához keverés közben 412 rész 55 N,N'-dieiklohexilfcarbodii;midet adunk 0—5 C° hőmérsékleten. A reakicióelegyet azután ugyanezen a hőfokon további 4 óra hosszat keverjük, majd leszűrjük. A szüredéket csökkentett nyomás alatt bepároljuk és a kapott szilárd mára- 60 dákot etanolból kristályosítjuk. Ily módon a 125—126 C-on .olvadó Na;-(terc.butiloxikarbonilJ-L-triptofán^^yS-Ttriklórfenilésztert kapjuk. Ha hasonló módon járunk el, de a 345 rész 2,4,5-triklórfenol helyett 306 rész p-nitrofenolt 55 alkalmazunk, akkor a 116—117 C°-on olvadó Na-(terc.(butiiaoxikiairfeonil)-L-triptofán-p-nitroifenilészterhez jutunk. A kiindul óany ágként felhasználandó- L-metionil-j(^-terc.butil)-L-ászípiairagil-L-fenilalanin^aimid-hidroklorid előállítása az alábbi módon történik. 323 ré§z, N-bienziloxikairbanil-íMierc.butil)-!^ -4aszparaginsav. 2000 rész tetrahidrofuránnal készített oldatát —10 C°. hőmérsékletire hűtjük, le, majd 101 rész trietilaimint,'utána pedig 1Q8 rész etilkloroformiátoit adunk hozzá —15 C° és '—10-C° közötti hőmérsékleten. A reakcióelegyet ugyanezen a hőfokon további 20 percig keverjük, majd 224. rész L-fenilalanm-amid-apetát 4000 rész kloroformmal és 101 rész triietilaminnal készített oldatát adjuk kis aidaígokfeain, —10 C° és —5 C° hőmérsékleten hozzá. A reakcióelegyet 0—5 C° hőmérsékleten további 2 óra hosszat keverjük, majd 16 óra hosszat 18—22 C° közötti hőmérsékleten tartjük. Az oldószereket ezután csökkentett nyomás alatt elpárologtatjuk és a maradékot 20 000 rész etilacetát es 2000 rész víz elegyável keverjük..Az . etilacetátos réteget elkülönítjük és 2000 rész 10%-os vizes citromsavoldaittal, majd 2000 rész vízzel, ezután 2000 rész n-kiáliumihidrogénkarbonátoldattal, végül pedig háromszor 2000—2000 rész vízzel mossuk,. A szerves oldószeres oldatot ezután vízmentes miagnéziumszulfáton szárítjuk és eredeti térfogatának negyedére pároljuk be. A leváló színtélen kristályokat 10 C° hőmérsékleten történő szűréssel elkülönítjük és izopropanoliból átkristályosítjuk. Ily módon N^benziloxikiairlbonil-(^-terc.-'butil)-L-aszparagil-L-fenilalanin-aimidot kapunk, amely 158,5—159 C°~on olvad. 238 rész fenti módon bapott vegyületet 7500 rész metanolban oldunk és az oldatot 25 rész 5%-os palládiumos aktívszén-kiatalizátofr hozzáadásával, hidrogén bevezetése közben, 18—22 C° hőmérsékleten, légköri, nyomás alatt 5 óra hosszat keverjük. A reakcióelegyet azután a katalizátor eltávolítása céljából. leszűrjük és. a szüredéket csökkentett nyomás alatt bepároljuk. A maradékot 1000 rész éterrel keverjük, azután leszűrjük és a szilárd maradékot benzolból kristályosítjuk. Az így kapott (/?-tierc.butil)-iaszparagü-Li-feniilalanin-aimid 123—<li24 C°-on olvad. Frissén előállított N^(o-nitrofenilszulfenil)-L-metionint (.amelyet a dicikloihiexilammóniumsó 678 résznyi míeninyiségéből állítottunk elő) 15 0O0 rész kloroformban oldunk és az oldathoz 470 rész fenti módon kapott (^-tarc.butil)-L~aiszpaira^ gil-L-fienilailJanm-iamidoit adunk. Az elegyet 0 C°. hőmérsékletre hűtjük, 317 rész N,N'^diciklohexilkafbodiimidet adunk hozzá, majd a reakcióelegyet 18 óra hosszat tartjuk 0 G° hőmérsékleten. Ezután a N,N'-dieiklohexilkarbodiimid feleslegének elbontására elegendő ecetsavat adunk hozzá és leszűrjük az elegyet. A szüredéket csökkentett nyomás alatt bepároljuk, és a kapott maradékot 7500 rész tetrabidrofuránnal keverjük. Az elegyet leszűrjük és a szüredéket csökkentett nyomás alatt bepároljuk. A bépár-3
