153173. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1,4-androsztadién-3,17-dion mikrobiológiai előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGALATI TALÁLMÁNY Bejelentés napja: 1965. III. 05. (GO—946) Közzététel napja: 1966. V. 23. Megjelent: 1966. XII. 15. 153173 Szabadalmi osztály: 12 o 25, 30 h 1—8 Nemzetközi osztály: C 07 c A 61 k V Decimái osztályozás: Feltalálók: Dr. Wix György orvos, 60%, Dr. Büki Kálmán orvos, 30%, Tömörkény Endre vegyészmérnök, 10%, Budapest Tulajdonos: Gyógyszerkutató Intézet, Budapest .ij.i i ". I' .11.1 ! Eljárás l,4-androsztadién-3,17-dion mikrobiológiai előállítására A találmány tárgya eljárás 1,4-androsztadién-3,17-dion mikrobiológiai előállítására. Ismeretes-, hogy a gyógyszeripar égető problémája a nyersanyag biztosítása a szteránvázas vegyületek előállításához. Az állati szervezetben a szteránvázas vegyületek túlnyomórészt •koleszterinből keletkeznek. A koleszterin nagy tömegben és viszonylag olcsó áron áll rendelkezésre. Ezek a tények érthetővé teszik, hogy több mint egy fél évszázada próbálkoznak a koleszterin mikrobiológiai lebontásával, abból a célból, hogy az oldallánc lebontásával megfelelő szteroid alapvegyülethez jussanak (C. Arnaudi: Experientia 7, 81 (1951). Mindezek a próbálkozások csődöt mondtak, valószínűleg azért, mert az A gyűrű négyszer gyorsabban bontódik le és ég el C02 -dá, rnint az .oldallánc [Th. C. Stadtman, A. Cherkes, Ch. B. Anfinsen: J. Biol. Ohem. 206,' 51,1 (1954)]. A helyzetet az is bonyolítja, hogy a koleszterin oxigén jelenlétében vizes szuszpenzióban különböző átalakulásoknak van kitéve, és az így képződő termékek a mikroorganizmus enzimjeinek hatására további különféle átalakulásokon átesve, igen sokféle és csak nyomokban jelenlevő termékeket adnak, miközben a molekula teljesen metabolizálódik. [F. J. Loomeiyer: Biachim.-Biophys. Acta 29, 16S (1958)]. Kimutatták, hogy e bontási' lépcsőkben az l,4-androsztadién-3,17-dion, a 9,10--seco-l,3,5(10)-ösztr.a-trién-3-ol-9,17-dion szere-10 15 20 25 S0 pel. [K. Schubert, K. H. Böhme, C. Hörhold: Naturwissenschaften 52, 20 (1965)]. Túlpxidációt gátló .anyagként 8-oxikinoünt alkalmazva [148 C93 sz. magyar szabadalom (1959 aug. .12.)], papírkromatográfiás úton ép szteránvázzal rendelkező'lebontási termékeket sikerült kimutatói, így 3-keto-bisznorkoJ-4-én-savat, 3-keto-bisznorkola-l,4-dién-savat, 4^androsztén-3,17-diont és l,4-androsztadién-3,l-7-diont [J. M. Whitmarsh: Biochem. J. v90, 23P (1964)]. E lebontási termékek mennyisége összesen nem tett ki többet a bevitt koleszterin 2%~.ániá]. (J. M. Whitmarsh személyes közlése.) így a mikrobiológusoknak az a több mint fél évszázados törekvése,-hogy a koleszterin paraffin-oldalláncát lebontva, hasznos szteroidokihoz jussanak, mindeddig nem járt sikerrel. ~~ Arra a meglepő felismerésre jutottunk, hogy Mycobacterium smegmatis-szel dolgozva, és 4-kolesztén-3-ont alkalmazva szubsztrátumként. bizonyos fermentációs körülményeik közöt^ kb. 30 súly%-ban keletkezik 1,4-androsztadién-3,17-dion. Ezzel szemben koleszterint alkalmazva szubsztrátumként, a termelés alig haladja meg az 1—2 súly%-ot. .Elvileg fontosnak látszik tehát, hogy az A, B gyűrűben /j4-3-keto-struktúra szerepeljen. Valószínű, hogy ez kevésbé teszi lehetővé a spontán — nem enzimes. — oxidációt a vizes szuszpenzióban, és így kevésbé szétágazó lesz a lebontás folyamata, más-153173