153084. lajstromszámú szabadalom • Eljárás egy új polipeptid előállítására
V 1SIÖ lä 12. példa: L-Valil-glicil-MNf-karbo-terc.-amiloxi-L-lizil-s-N-karbo-terc.^amiloxi-L-lizil-í-N-karibo-terc.-amiloxi-L-lizil-£-N-karbo-terc.-amiloxi- 5 -L-lizil-L-prolil-L-valil-s-N-karbo-terc.-amiloxi-L-lizil-L-valil-L-tirozil-L-prolil-L-valinamid [H-Val-Gli-(KAT)Liz-(KAT)Liz-(KAT)Liz-(KAT)Liz-Pro-Val-(KAT)Liz-Val~Tir-Pro-Val-NH2 ] (B ábra) 10 186 g KBO-(KAT)Liz-OH-t és 73 ml trietilamint 2000 ml ecetéterben oldunk, hozzácsepegtetünk —5°-on 50 ml klórhangyasavetilésztert, —5°-on 30 percig keverjük, 76 g H-Pro-OMe-t 15 adunk hozzá, 4 óra hosszat 20°-on állni hagyjuk, híg kénsawal és ammóniával mossuk, megszárítjuk, és bepároljuk. 230 g olajos dipeptidet kapunk, ezt 1300 ml dioxánban oldjuk, 0°-ra hűtjük, 1300 ml n-nátronlúgot adunk hozzá, 1 2C óra hosszat —20°-on rázzuk, 1300 ml-re bepároljuk, 1300 ml vizet adunk hozzá, dietiléterrel mossuk, 0°-ra hűtjük, 10%-os foszforsavval 2 pH-ra megsavanyítjuk, a kivált olajat ecetéterrel extraháljuk, megszárítjuk, bepárologtatjuk, 25 a maradványt petroléterrel mossuk, és megszárítjuk. 195 g KBO-(KAT)Liz-Pro-OH-t kapunk. [a]2oD =—45° dimetilformaimidban. A terméket 3000 ml metanolban és 300 ml vízben oldjuk, és 10 g 10%-os palládiumszén jelenlétében 30 hidrogénezzük. Leszűrjük, bepároljuk, és a maradványt dietiléterben oldjuk. 130 g H-(KAT)Liz-Pro-OH-t kapunk. Olvadáspontja 104°. [«]20 D = —55° dimetilforrnamidban. Az ily módon kapott dipeptidet 400 ml dimetilformamidban 35 oldjuk, 195 g KBO-(KAT)Liz-OCF-et adunk hozzá, 12 óra hosszat 20°~on állni hagyjuk, bepároljuk, a maradványt 400 ml n-nátriumhidrogénkarbonát-oldatban oldjuk, dietiléterrel mossuk, a vizes fázist 10%-os citromsav-oldattal 40 mesavanyítjuk, ecetéterrel extraháljuk, megszárítjuk, bepárologtatjuk, és a maradványt petroléterrel feldolgozzuk. 124 g KBO-(KAT)Liz-(KAT)Liz-Pro-OH-t kapuiik (o. p. 120°), ezt 1300 ml metanolban és 100 ml vízben oldjuk, 45 10 g palládiumszén jelenlétében hidrogénezzük, leszűrjük, bepárologtatjuk, és a maradványt dioxán-dietiléterből átkristályosítjuk. 84 g H-(KAT)Liz-(KAT)-Liz-Pro-OH-t kapunk. Olvadáspontja 140°. [<*]2oD = _2 6 ° dimetilformamid- 50 ban. 150 g KBO-(KAT)Liz-OiH-t és 105 g H-(KAT)Liz-OMe-t 500 ml acetonitril és 100 ml dimetilformamid elegyében oldunk, —20o-ra hűtjük, 83 g diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá, —5°-on 12 óra hosszat rázatjuk, leszűr- 55 jük, bepároljuk, a maradványt eoetéterben old-: juk, híg kénsawal és ammóniaoldattal mossuk, megszárítjuk, 'bepároljuk, és a maradványt dietiléter-petroléterből kikristályosítjuk. 168 g KBO-(KAT)LiZr-(KAT)Liz-OMe-t kapunk. Olva- 60 dáspontja 103°. [«]2 <> D = —12° metanolban. Az ily módon kapott dipeptidésztert 1000 ml metanolban oldjuk, 15 g palládiumkatalizátor jelenlétében hidrogénezzük, és szűrés után bepároljuk. A maradványt 400 ml dimetilformamid- 65 16 ban oldjuk, 125 g KBO-Val-Gli-OCF-et adunk hozzá, 12 óra hosszat 20°-on állni hagyjuk, bepárologtatjuk, etiléterrel feldolgozzuk, vizes metanolban (1:1) átkristályosítjuk, és megszárítjuk. 180 g KBO-Val-Gli-(KAT)Iiz-(KAT)Liz-OMe-t kapunk. Olvadáspontja 175°. [<*]2°D = = —18° metanolban. Az így kapott tetrapeptidésztert 200 ml metanolban oldjuk, 80 ml hidrazinhidrátot adunk hozzá, 16 óra hosszat 20°-on állni hagyjuk, 1000 ml vízbe öntjük, szűrjük, vízzel mossuk, kénsav fölött megszárítjuk, metanolban oldjuk, éterbe öntjük, szűrjük és megszárítjuk. 147 g KBO-Val-Gli-(KAT)Liz-(KAT)Liz»NHNH2 -t kapunk. Olvadáspontja 200°. [cc]^D = —10° dimetilformamidban. 25,0 g KBO-Val-Gli-(KAT)Liz-(KAT)Liz-NHNH2 -t 200 ml dimetilformamid, 50 ml izopropanol és 300 ml 4n sósav —10°-ra hűtött elegyében oldunk, erőteljes keverés közben 7 ml vizes 5n nátriumnitritoldatot csepegtetünk hozzá, még 5 percig keverjük —5°-on, 18 ml trietilamint, majd 500 ml jeges vizet adunk hozzá, jól leszívatjuk, a csapadékot 100 ml dimetilformamidban oldjuk, 15,0 g H-(KAT)Liz-(KAT)Liz-Pro-OH-t és 3,5 ml tríetilamint adunk hozzá, nagyvákuumban 90 ml-re bepároljuk, 16 órán át 0°-on állni hagyjuk, 800 ml ecetétert adunk hozzá, híg ecetsavval mossuk, az ecetétert elpárologtatjuk, a maradványt 1000 ml vízbe öntjük, leszűrjük és nátriumhidroxid fölött megszárítjuk. 25 g KBO-Val-Gli-(KAT)Liz-(KAT)Liz-(KAT)Liz-(KAT)Liz-Pro-OH-t kapunk. Olvadáspontja 150° bomlás közben. [a]20 D = —6° dimetilformaimidban. Az így kapott heptapeptidet 80 ml abszolút piridinben oldjuk, bepároljuk, a maradványt 80 ml abszolút piridiriben oldjuk, 10 g tri(2,4,5--triklórfenil)-foszfitot adunk hozzá, 16 óra hoszszat 20°-on keverjük, bepároljuk, a maradványt eoetéterben oldjuk, híg kénsavval, majd n-nátriumhidrogénkarbonát-oldattal mossuk, nátriumszulfát fölött megszárítjuk, bepároljuk és a maradványt ecetészter-petroléterből kikristályosítjuk. 26 g KBO~Val-Gli-(KAT)Liz-(KAT)Liz-(KAT)Liz-(KAT)Liz-Pro-OCF-et kapunk, ezt 75 ml dimetilformamidban azonnal oldjuk, 20 g H-Val- (K AT) Liz-Val-Tir-Pro-Val-NH2 -t adunk hozzá, 2 napig 20°-on állni hagyjuk, dietiléterrel kicsapjuk, szűrjük és megszárítjuk. A kapott terméket vizes metanolban (2:8) oldjuk, savas ionkicserélővel kezeljük, bepároljuk és a maradványt vizes etanolból (1 :8) kikristályosítjuk. 15,0 g KBO-Val-Gli-(KAT)Liz-(KAT)Liz-(KAT)Liz-(KAT)Liz-Pro-VaP(KAT)Liz-Val-Tir-Pro-Val-NH2 -t kapunk. Olvadáspontja 190° bomlás közben. [«]20 D =—6° dimetilformamidban. A kapott tridekapeptidet 500 ml metanolban oldjuk, 5 g palládiumszén jelenlétében hidrogénezzük, szűrjük, bepároljuk és a maradd ványt dietiléterrel feldolgozzuk. 12 g H-Val-Gli-(KAT)Liz-(KAT)Liz-(KAT)Liz-(KAT)Liz-Pro-yal-(KAT)Liz-Val-Tir-Pro-Val-NH2 -t kapunk. Olvadáspontja 198°. 8
