152819. lajstromszámú szabadalom • Eljárás mikroorganizmusok termelésére és a termék tisztított állapotban való kinyerésére

152819 Szabad oxigént tartalmazó gáz jelenlétéről azonban minden esetben gondoskodni kell, A« mikroorganizmus kívánt esetben penészgomba is lehet. A Penicillium expansum szénhidrogéneket tartalmazó vizes tápközegben való tenyésztésre alkalmas, A Penicillium roqueforti, Penicillium notation, Aspergillus fussigatus, Aspergillus niger és Aspergillus versicolor szénhidrogéneket tartalmazó szilárd táptalajari tenyészthetők.' A mikroorganizmus kívánt esetben baktérium is lehet. Baktériumokként a találmány szerinti eljárásban a Pseudomonadales, Eubacteriáles és Actinomyoetales rendekbe tartozó baktériumok alkalmazhatók. Előnyösen a Bacillaceae és Pseudomonadacaae családokba tartozó baktériumokat alkalmzunk. Előnyös fajok a Bacillus megaterium, Bacillus subtilis és Pseudomonas aeruginosa. Használhatók még az alábbi törzsek: Bacillus amylobaceter Pseudomonas natriegens-Arthrobaeter sp. Micrococcus sp. Corynebacterium sp. Pseudomonas syringae Xanthomonas begoniae Flavobaoterium devorans Acetobacter sp. Actinomyces sp. A mikroorganizmusok tenyésztéséhez a széntartalmú nyersanyagokon kívül víztartalmú tápközegről és oxigénről (előnyösen levegő alakjában) is gondoskodni keli. A Noeardia (az Actinomycetales rendbe tartozó nem) tenyésztésére alkalmas táptalaj öszszetétele a következő lehet: ammóniumszulfát magnéziumszulfát vas(II)szulfát—7H2

0 mangánszulfát—H2

0 monokáliumfoszfát dinátriumfoszfát kalciumklorid. nátriumkarbonát élesztőkivoniat desztillált vízzel feltöltve 15 20 25 30 35 40 0,20 g 0,005 g 0,002 g 2 g 45 3 g 0,1 g 0,1 g 0,008 g 1000 ml-re. 50 Másfajta baktériumok tenyésztésére az alábbi összetételű táptalaj alkalmazható: monokáliumfoszfát 7 g magnéziumszulfát—7H2

0 0,2 g nátriumklorid 0,1 g ammóniumklorid 2,5 g vízvezetéki víz (nyomelemek) 100 ml élesztőkivonat 0,025 g desztillált vízzel feltöltve 1000 ml-re. 55 60 Az élesztők (és penészgombák) -tenyésztésére alkalmas tápközeg a következő összetételű lehet: 65 6 diammóniumfoszfát 2 g káliumklorid 1,15 g magnéziumszulfát—7H2

0 0,65 g cinkszulfát 0,17 g mangánszulfát—H2

0 , 0,045 g vas(II)szulfát—7H2

0 0,068 g vízvezetéki víz 200 g élesztőkivonat 0,025 g desztillált vízzel feltöltve 1000 ml-re. A mikroorganizmusok, különösen az élesztők, a széntartalmú nyersanyagként felhasználásra kerülő szénhidrogénfrakciök jelenlétében először történő tenyésztésük során olykor nehezen. fejlődnek, és olykor szükséges lehet inokulumként oly mikroorganizmusokat alkalmazni, amelyeket előzőleg már adaptáltunk a felhasználandó szénhidrogénfriakciók jelenlétében való .fejlődésre. Emellett a mikroorganizmusok, bár megfelelő tápelemeket tartalmazó vizes ásványi közeg jelenlétében tenyésztjük őket, gyakran azért is nehezen fejlődnek, mert a felhasználásra kgrülcí szénhidrogénfrakció nem tartalmaz olyan növekedési faktorokát, amelyek egyébként a szénhidrát alapú tápanyagokban jelen vannak, ezért célszerű leihet ilyen növekedési faktorokat hozzáadni a tápközeghez. Elősegíti a mikroorganizmusok fejlődését, ha a tápközeghez igen kis mennyiségű élesztőkivonatot (az élesztő hidrolízise útján nyert, B-csoportbeli vitaminokban gazdag ipari termék) vagy általában B-csoportbeli vitaminokat és/ vagy biotint adunk. Ezek mennyisége a vizes tápközegre számítva 25 mg/liter körül lehet. Alkalmazhatunk azonban ennél nagyobb vagy kisebb mennyiséget is, a fejlődés kívánt feltétéleitől függően. A mikroorganizmusok fejlődésük során felhasználják a kiindulóanyagként alkalmazott szénhidrogénfrakciót, miközben közbenső termékként savas csoportot tartalmazó vegyületek, főként zsírsavak képződnek, oly módon, hogy a vizes ásványi tápközeg pH-értéke fokozatosan csökken. Ha nem gondoskodunk a kedvező pH-" érték helyreállításáról, akkor a mikroorganizmusok fejlődése eléggé hamar megakad, és a sejtkoncentráció a tápközegben nem növekszik tovább, vagyis ún. stacioner fázis áll be a mikroorganizmus fejlődésében. Ezért előnyös a vizes tápközeget a kívánt pH-értéken tartani, valamely nagy pH-értékű vizes közeg adagonkinti vagy folytonos hozzáadása útján. Penészgombák vagy élesztők, különösen a Candida lipolytica mikroorganizmus alkalmazása esetén a pH-értéket általában 3 és 6 között, előnyösen 4 és 5 között tartjuk. (Baktériumok esetében az előnyös pH-tartomány magasabb, rendszerint 6,5—8). A tápközeghez való hozzáadásra alkalmas alkalikus anyagok példáiként nátriumhidroxid, káliumhidroxid, dinátriumhidrogénfoszfát és ammónia említhetők; ezeket szabad állapotban vagy vizes oldatban adagolhatjuk a kultúrához. , A mikroorganizmusok tenyésztésének legkedvezőbb hőmérséklete a mikroorganizmusok faj-3