152732. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új antibiotikumok előállítására
152732 21 22 6, példa,-7,9 g terméket, amelyet az 5. példában leírt módon nyertünk, 790 ml oly szerves oldószerelegyiben oldunk, amely egy 10:10:20 n-butanol (etilaoetát)víz elegy elkülönített alsó fázisából áll, majd az oldatot 2,1 állandó pH-érték mellett savas ciklusban levő Amiberlite IR 120 ioncserélő gyantával keverjük; összesen 50 ml ioncserélő-gyantát adunk hozzá kis részletekben. A gyantát kiszűrjük, és a kapott oldatot kétszer mossuk 790 ml oly oldószereleggyel, amelyet a fentemlítétt oldószerekből készült, megadott arányú elegy felső fázisának elkülönítése útján kaptunk; az egyesített mosófolyadékot viszont ugyanolyan térfogatú, alsó fázisként kapott oldószereleggyel extraháljuk. A fenti művelet>ek során kapott alsó fázisokat egyesítjük, csökkentett (20 mm Hg-oszlop) nyomás alatt 15 ml térfogatra töményítjük be; a kapott vizes koncentrátumot 20 térfogat 4:6 tf. arányú metanol-éter eleggyel elegyítjük. Az antibiotikum kicsapódik; ily módon első terméke ként 3,05 g antibiotikumot kapunk, amelynek hatóanyagtartalma 18 300 E/mg. A szűredéket csökkentett (20 mm Hg-oszlop) nyomás alatt 100 mr térfogatra pároljuk be. 320 ml metanolt és 35 ml n-butanolt adunk a betöményített oldathoz. Az így " kapott elegyet csökkentett (20 mm Hg-oszlop) nyomás alatt, 40 C° alatti hőmérsékleten 15 ml térfogatra pároljuk be. Ezután 15 térfogat n-hexánt adunk hozzá, centrifugáljuk, a kapott terméket hexánnal mossuk, majd 2 mm Hg-oszlop" nyomás alatt 35 C° hőmérsékleten, éjjelen át szárítjuk. Ilymódon 1,78 g tisztított antibiotikumot kapunk, amelynek hatóértéke 36 000 E/mg. A fenti műveletek során elkülönített felső fázisokat egyesítjük, és csökkentett (20 mm Hg-oszlop) nyomás alatt kb. 70 ml térfogatra pároljuk be. 15 térfogat hexán hozzáadása útján .1,5 g további terméket választhatunk le 17 200 E/mg hatóanyagtartalmú barna por alakjában. 7. példa. A 6. példában leírt módon előállított 542 mg oly antibiotikumot, amelynek hatóértéke 36 000 E/mg, 20 ml vízben oldunk. Az oldat pH-értékét, amely az oldás után 2,3, 8,9 ml 0,1 n nátriumhidroxidoldat hozzáadása útján 6,85-fe állítjuk be, és ezVa semleges oldatot liofilizáljuk. Ilymódon 565 mg 'mennyiségben kapjuk az antibiotikum nátriumsóját, amelynek vizes oldata 256,5 millimikronnál mutat maximális ibolyána kapott oldatot éjjelen át dializáljufc regenerált cellulózból készült diaf ragmával, 40 liter desztillált vízzel szemben. A dialízis után az antibiotikum oldatához 1 5 fogat n-propanolt adunk, és (az elegyet egy oly oszlop felső részére vezetjük, amely alulról felfélé haladó sorrendben az alábbi anyagokkal van megtöltve: 75 g „Acticarbone BS 40—-80" granulált aktívszén (előzeteslen híg sósavval 10 mosva), 125 ml „Amberlite IR 120" ioncserélő gyanta (H-ciklu&ban), 500 g fentemlített minőségű granulált aktívszén. Az antibiotikum-oldat átvezetésének befejezése után az oszlopot 50:50 tf. arányú n-propa-15 nol/víz eleggyel eluáljuk; az aktív frakciókat (7 liter) n-nátriumhidroxidoldattal 7 pHnértékre semlegesítjük, majd csökkentett nyomás alatt 40 C° alatti hőmérsékleten 140 ml térfogatra pároljuk be az egyesített oldatot. 20 A kapott konftentrátumot 24 óra hosszat dia-' lizáljuk 4x10 liter desztillált vízzel szemben, majd 1 térfogat n-propanolt adunk a dializált oldathoz. A fenti módon kapott antibiotikum-oldatból 25 10 térfogat aceton hozzáadása útján leválasztjuk az antibiotikumot. Elkülönítés és szárítás után 23,5 g antibiotikumot kapunk, 42 400 E/mg hatóértékű nátriumsó alakjában. 30 9. példa. A 8. példa szerinti módon előállított 22 g antibiotikumot 110 ml vízben oldunk; az oldathoz 110 ml n-propanolt adunk, és az elegyet egy 35 100 ml alumíniumoxidot (előzőleg 4 pH-értékben mosva) tartalmazó oszlopon vezetjük keresztül. Az oszlopot 50:50 tf. arányú n-^propanol/ víz eleggyel eluáljuk. Az eluátum aktív frakcióit egyesítjük (430 40 ml), csökkentett nyomás alatt, 40 C° alatti hőmérsékleten 100 ml térfogatra pároljuk be, és az így kapott/koncentrátumot éjjelén át dializáljuk 10 liter desztillált vízzel szemben. A dializátumhoz 1 térfogat n-propanolt adunk, majd 45 a hatóanyagot 10 térfogat aceton hozzáadásával leválasztjuk. Ilymódon 12 g tisztított antibiotikumot kapunk, 44 000 E/mg hatóértókű nátriumsó alakjában, amely az alábbi jellemző adatokat mutatja: 50 Elemi összetétel: C 45,0%, H 7,4%, O (a különbség alapján) 37,6%, N 3,72%, P 2,16%, Na 4,15%. Forgatóképesség: [«]D 22 =+6 ° ± 1° (c=0,6% vízben). Ibolyántúli abszorpciós színkép: az afo-55 szorpció vége 220 és 257 millimikronnál; , E i1 cm = 30 ill. 3,5. túli abszorpciót; E x %m = 106. ; ! i T Ez a termék az alábbi eíemi összetételt mutatja; C 47,4%, H 7,07%, O (a különbség alapján) 35,3%, N 5,01%, P 1,84%, Na 3,4%. 8. példa. Az 5. példában leírt módon előállított 50 g antibiotikumot 500 ml desztillált vízben oldunk; 60 Szabadalmi igénypont Eljárás az új „11,837 R. P." antibiotikum előállítására azzal jellemezve, hogy az új Streptomyces' viridans DS 9466 törzset (letétbe helyezve a Northern Regional Research Laiborato-63 rynál, Peoriában (Illinois, Amerikai Egyesült •11
