152695. lajstromszámú szabadalom • Eljárás penicillinek előállítására
152695 10 '^^UÜ tivitással rendelkezett, és amely nem a kiindulási penicillinnek volt tulajdonítható. (b) A 7(b) példa szerinti módon készített, 0,45 g N-(l-acetil-propén-2-il)-alfa-,amino-gamma-metil-tiopropil-penicillin-nátrium-sót 25 ml vízben oldottuk, 0,5 ml 2 n sósav-oldattal kezeltük, és 90 percen át kevertük. A színtelen oldatot ezután 25 ml éterrel extraháltuk, és az extraktumokat kiöntöttük. A vizes fázis pH-ját nátrium-hidrogén-karbonát-oldat hozzáadásával 7-re állítottuk be, majd az oldatot alacsony hőmérsékleten és kis nyomáson bepároltuk. Végül a maradékot foszfor-pentoxid fölött vákuumban szárítottuk, és így 0,4 g alfa-amino-gamma-metil-tiopropil-penieillint kaptunk, amelynek tisztaságát hidroxil-aminos kolorimetriás vizsgálattal 48%-nak találtuk. 13. példa: Gyűrűben helyettesített különböző alfa-amino-benzil-penicillinek előállítása A 9. példában leírt összes gyűrűben-helyettesített nátrium-N-(l-metoxi-karbonil-propén-2--il)-alfa-amino-fenil-acetátokat metilén-kloridban szuszpendáltuk, átalakítottuk etoxi-hangyasavval képzett vegyes anhidriddé, és az 5(a) példában ismertetett általános módszer szerint reagáltattuk 6-amino-penicillánsavval. A kapott, N-atomon védett penicillineket szobahőmérsékleten 2 órán keresztül, vagy ennél rövidebb, de legalább 30 perc időtartamon át acetonban kezeltük ekvivalens sósav-oldattal. Az oldatokat alacsony hőmérsékleten és kis nyomáson bepároltuk, és a maradékokat metilén-kloriddal kezeltük. Ilyen módon a nyers, szilárd, gyűrűben szubsztituált alfa-amino-penicillinekhez jutottunk. Ezeknek az új penicillineknek a képződését papírkromatográfiás vizsgálat is megerősítette. A különböző termékek tisztaságát hidroxil-aminos kolorimetriás vizsgálattal a következőnek találtuk: Helyettesítő N-atomon Szabad alfaa benzolvédett -aniino-toenzilgyűrűben penicillin -penicillin % m o-Fluor 68 48 m-Fluor 65 46 p-Fluor 68 47 o-Klór — 50 p-Klór — 59 3,4-Diklór 66 47 m-Nitro — 61 14. példa: Kristályos 6-[D(—)-alfa-amino-feml-acetarnido]-penicillánsav előállítása (a) 10,5 ml etil^klór-karbonátot 350 ml száraz aoetonban —8 C°-ra hűtöttünk le, és 4 csepp N-metil-morfolinnal kezeltünk. A keveréket —8 C° és —5 C° közötti hőmérsékleten kevertük, miközben 2 perc alatt 30 g nátrium-N-(l-imeitoxi-karbonil-propén-2-il)-D(—)-alfa-aminofenil-acetátot adtunk hozzá, majd a keverést további 20 percen át folytattuk. A kapott keverék oldva tartalmazta a reakcióképes vegyes_ anhidridet, és szuszpendálva HfartalmazoíF"linég ""nltfium-^ílöridot. Közben _8-as pH-jú oldatot készítettünk 25 g 10 6-amino-penicillánsavból, 150 ml vízből és ' 17—18 ml irietil-aminból, majd az oldatot 150 ml acetonnal hígítottuk, és _—8 — —5 C°-ra hűtöttük le. Ezután erős keverés közben, 5 perc alatt beadagoltuk a vegyes anhidrid reagenst, 15 és a keveréket további 1 órán keres¥tüT "kever-" tük. A keveréket alacsony hőmérsékleten és kis nyomáson bepároltuk az aceton eltávolítása céljából, majd 250 ml metil-izobutil-ketont öntöt-20 tünk hozzá. Élénk keverés közben tömény sósavat adtunk a rendszerhez mindaddig, amíg a vizes fázis pH^ja^re nem csökkent, majd a keverést 15 percen" át folytattuk, és szükség esetén további savat adagultunk be. A rétege-25 ket elkülönítettük, és a vizes oldat pH-ját keverés közben 6—6,4-re állítottuk be 10%-os nátrium-hidroxid-oldat óvatos hozzáadásával. Nemsokára elkezdődött a kristályosodás, és a keveréket éjszakára hűtőszekrényben félretet-30 tük. A következő reggelen a terméket összegyűjtöttük, 10 ml térfogatú vízrészletekkel mostuk, és 40 C°-on levegőn szárítottuk, ilyen módon hidratált 6-[D(—)-alfa-amino-fenil-acetamido]-35 -penicillánsavat kaptunk. Több ilyen reakció terméke a tiszta vízmentes penicillinből 80— 85%-ot tartalmazott, amit alkalimetries és mikrobiológiai vizsgálat bizonyított. A kapott anyag súlya 33 g és 36 g között változott, a 66—72%-40 os aktivitás^hozamoknak megfelelően. Egy minta (alfa)D 21 -értéke +240° (C: 0,32 H2 0-ban) volt, és a következő elemzési eredményt adta: Talált: C: 47,3; H: 6,4; N: 10,2; S: 7,4; H2 0: 45 13,3. C16 H 19 N 3 0 4 S• 3H 2 0-hoz szükséges: C: 47,6; H: 6,3; N: 10,4; S: 7,9; H2 0: 13,4%r (b) A fenti kísérletet megismételtük azzal az eltéréssel, hogy a nátrium-D(—)^alfa-amino-fenil-aoetát és a dietil-aceton-dikarboxilát 10. 50 példában leírt kondenzációs termékét használtuk a nátrium-N(l-metoxi-karbonil-propén-2--il)-D(—)-alfa-amino-fenil-acetát ekvivalens mennyisége helyett. A kristályos hidratált terméket 42%-os kitermeléssel kaptuk, és az becs-55 lésünk szerint 81% tiszta, vízmentes penicillint tartalmazott. (c) 135,5 g (0,5 mól) nátrium-N-(l-metoxi-karbonil-propéh-2-il)-alfa-amino-fenil-aoetát 1750 ml acetonnal képezett szuszpenzióját —20 C°-ra 60 hűtöttük le, és erős keverés közben 54,5 g (0,5 mól) etil-klór-karbonátot és 12,5 ml 1%-os acetonos N,N-dimetil-benzil-amin-oldatot adtunk hozzá. A keverést —20 C°-on 25 percen át folytattuk, majd egy olyan oldatot adtunk hozzá, 65 amelyet 108 g (0,5 mól) 6-amino-penirillánsavu o
