152576. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tetraciklin gazdaságos előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÄLMÄNYI HIVATAL, SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGALATI TALÁLMÁNY Bejelentés napja: 1964. IX. 11. (Cl—513) Közzététel napja: 1965. VIII. 22. Megjelent: 1966. V. 01. 152576 Szabadalmi osztály: 30 h 1—8: 12 o 25 Nemzetközi osztály: A 61 h Decimái osztályozás: Feltalálók: Dr. Járai Miklós mikrobiológus, 31%, Dr. Darvas Jenő orvos, 23%, Inczefi István mikrobiológus, 23%, Parragh Gáborné vegyészmérnök, 23%, budapesti lakosok Tulajdonos: Chinoin Gyógyszer- és Vegyészeti Termékek Gyára RT. Budapest Eljárás tetraciklin gazdaságos előállítására Ismeretes, hogy a tetraciklin fermentációjához használt mikroorganizmusok közül a Streptomyces aureofaciens új törzsével, a CDSD—314 (OKI—601.102.2) való fermentálás esetén a klórtetraciklin bioszintézise genetikailag fel van függesztve, és a fermentleben csak tetraciklin keletkezik, klorid tartalmú táptalaj esetén is. Az új törzs előállítása idején a fermentlé tetraciklin tartalma 2000—2500 E/ml volt (149.186 sz, magyar szabadalom). A tetraciklin termelés gazdaságosabbá tétele szükségessé tette a fermentlé hatóanyagtartalmának növelését, megfelelő törzs előállítása révén. Azt találtuk, hogy tetraciklin gazdaságosan állítható elő Streptomyces aureofaciens törzs klorid-tartalmú táptalajon való levegőztetett, szubmerz fermentációja útján, oly módon, hogy a Streptomyces aureofaciens A—802.934 törzset (melyet az OKI-nál 640.307.26 sz, alatt helyeztünk letétbe) vagy annak utódját, variánsát, vagy önmagában ismert módon előállított mutánsát keményítőt, kukoricalekvárt és szervetlen sókat, valamint 100 gamma/ml értéknél több kloridot tartalmazó táptalajon fermentáljuk, a törzs micéliumát kívánt esetben eltávolítjuk, majd kívánt esetben az ily módon termelt tetraciklint a fermentléből kinyerjük. A találmányunk szerinti fermentációhoz alkalmazott törzs előállításának menete a következő: Streptomyces aureofaciens CDSD—314 (tetraciklin termelés: 220 E/ml) 1 Röntgen-besugárzás, etiléniminnel, 5 HN0 2 -val való kezelés, ultraibolya besugárzás í C—81305 (tetraciklin termelés: 3500 E/ml) 1 spóraszuszpenzió inkubálása 8 órán át szinte-10 tikus táptalajon (összetétel: szacharóz 2,5%, KH2 P0 4 0,1%, (NH 4 ) 2 S0 4 0,3%, CaC0 3 0,3%, pH: 7,0), majd 2,5 y/ml furidint és 0,05% dimetilformamidot tartalmazó agaros táptalajon inkubálás, kifejlődés után izolálás 15 i A—801500 (tetraciklin termelés 4800 E/ml) l ' • . spóraszuszpenzió inkubálása 10 órán át fenti összetételű szintetikus táptalajon, majd 4,5 y/ml 20 furidint és 0,1% dimetilformamidot tartalmazó agaros táptalajon inkubálás, izolálás 1 A—802.934 (tetraciklin termelés 6200 E/ml) 1 ; 25 természetes szelekció l A—116.007 (tetraciklin termelés 7300 E/ml). Az eljárásunk szerinti fermentációnál üveg-30 fermentorban kb. 10500 E/ml, rázott tenyész-152576
