152173. lajstromszámú szabadalom • Eljárás heparin tartalmú szervkivonatok egyszerű letisztítására

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÄLMÄNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGALATI TALÁLMÁNY Bejelentés napja: 1963. XII. 29.~ (Rí—269) Közzététel napja: 1965. I. 23. Megjelent: 1965. XII. 01. 152173 Szabadalmi osztály: 30 h 1—8 Nemzetközi osztály: A 61 k Decimái osztályozás: Feltalálók: Németh Dániel vegyész, Valu József gyógyszerész, Budapest Tulajdonos: Richter Gedeon Vegyészeti Gyár Rt., Budapest Eljárás heparintartalmú szervkivonatok egyszerű letisztítására A heparin gyógyászati alkalmazására számos indikációs terület ismeretes, éppen ezért előállítása a gyógyszeripar számára nagy fontosságú. 'Kinyerésével és tisztításával számos szabadalmi leírás foglalkozik, melyek általában a Charles és Scott-féle elvet követik. [J. Biol. Chem. 102. 423. (1933) és Roy. Soc. Can. Trans. 28. Sec. 5. 55. 58. 1(1934).] A szövetek fellazításában az egyes eljárások közel egyértelműen az autolizist használják fel, melynek segítségével a heparin kivonatolása a megváltozott permeabilitási viszonyok folytán előnyösebbé válik. Ismertebb eljárások még az U.S.P. 2,623,001, valamint az U.S.P. 2,587.924 sz. szabadalmi leírás, mely utóbbi szerint a iheparintartalmú szervet felfőzik, majd a koagulált szövetet enzimatikusan {tripszin, proteáz) teljesen feloldják. Mindkét eljárás nagyipari megvalósításában rendkivül körülményes. Az első esetben a telített sóoldat dializise a nagy térfogat miatt nehézkes. Az utóbbi esetben -pedig az emésztés mukózuB termékei zavarják a feldolgozást. Továbbá jellemző mindkét eljárásra, hogy nagy szerves oldószerigényük miatt nem gazdaságosak. Legelőnyösebb kivonatolás az enyhén lúgos, vizes oldatban érhető el, melyből felforralást követően, a szűrt oldatból ásványi savval való savanyításra, erősen savanyú pH tartományban a fehérje-heparin komplex leválasztható. A 149.282 sz. magyar szabadalmi leírás szerint a durva szennyeződések a kivonatban, 5 CaCl2-al pH 8,5 és 10,0 között, intenzív hőkezelést követően, tömör csapadék formában koagulálódnak. A szuperoatánsfoól viszont, néhány analitikailag harmadosztályú fém hozzáadására, az oldatban jelenlevő kis molekulájú 10 fehérjék csapadékban, mint fehérje-fémkomplex lecsapódnak és az oldatban levő heparint magukkal viszik. A savanyú pH tartományban így nagyobb tisztaságú termék választható le. 15 A fehérje-heparinkomplex elbontására legelőnyösebben egyes fehérjebontó enzimek, mint például tripszán, elasztáz, baktérium proteáz stb. alkalmasak, továbbá olyan műveletek, amelyek során nagyobb mennyiségű só vagy 20 karbamid hozzáadására, mint ahogyan a 150.556 sz. magyar szabadalmi leírás ismerteti, enyhe hőkezelést követően, a fehérjerész lehasad és a csapadékmentes 'oldatból szervés oldószeres kicsapás után nyernek magasabb 25 egységszámú heparint. Azonban az ismertetett módszerek önmagukban nem adnak biztonságos tisztítást. Mind az enzimatikus, mind a só segítségével történő leválasztás minden esetben a feldolgozás, fo-30 iyamán nagyobb mennyiségű elbontatlan 1&2173