152161. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az új WG 696 antibiotikum előállítására
152161 felfelé állnak és elágazott szerekezetűek. A phialidák külön-külön vagy koszorúkban fordulnak elő, palack alakúak, 6—10 millimikron hosszúak és 2,1—3,5 millimikron szélesek. A konidiumok átlátszóak, egysejtűek, csupasz felületűek és halványzöld színűek. Egyenletesen gömb- vagy enyhén tojásdad alakúak, átmérőjük egyformán 3,0—3,2 millimikron. A konidiumok láncokat képeznek, a fejlődés előre haladottabb szakaszában ezek ragadós gömb alakú csomókká állnak ősszé, amelyek egyenként kb. 10—20 konidiumot tartalmaznak. Ha ezt a gombát folyékony tápközegben szaporítjuk, 48—144 óra alatt számottevő mennyiségű WG 696 anyag képződik, amelynek jelenléte az ágár-csészés módszerrel mutatható ki, Candida albicans mikroorganizmust alkalmazva kísérleti organizmusként. A törzs WG 696 anyagot termelő képességét oly kísérletsorozatban mutattuk ki, amelyben a gombát különféle tápközegekben tenyésztettük. E kísérletek során 75 ml folyékony tápközelget vittünk be egy-egy 500 ml-es rázópalackba,, majd a palackot sterilizálás után a mikroorganizmus vegetatív kultúrájával beoltottuk és a fermentációt 27 C° hőmérsékleten, alternáló mozgású rázókészüléken folytattuk le. A kapott eredményeket az alábbi táblázatban foglaltuk össze, amelyben a I. oszlop a felhasznált táptalajt adja meg, míg a II. és III. oszlopban a 2, ill. 6 napi fermentáció után ágár-csészés módszerrel meghatározott gátlási zónák átmérője van megadva. Táblázat S—45: I. II. III. S—200 22 mm 23 mm S—25 47 mm 41 mm S—45 33 mm 33 mm S—205 33 mm 30 mm Az alkalmazott tápközegek az alábbi összetétel űek voltak: S—200: S^-25 kukoricalekvár (50%os) 20 g KH2 P0 4 10 g MgS04 0,5 g Szacharóz 50 , g csapvízzel feltöltve 1000 ml-re pH 6,7 glicerin 7,5 g kúkoricalekvár (50%•os) 2,5 g glükóz 10,0 ' g Staley-féle tápanyag (szójaliszt) 15,0 g MgS04 0,05 g KH2 PQ 4 0,06 g FeS04 0,005 g CuS04 0,004 g csapvízzel feltöltve 1000 ml-re pH 6,5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 szacharóz 50,0 g NH4 N0 3 3,0 g KH2 P0 4 10,0 g glicerin 5,0 g MgS04 0,5 g KCl 0,5 g FES04 0,0} g ZnS04 0,001 g bíotin 0,01 mg álati olaj 1 ml csapvízzel feltöltve 100Ó ml-re pH 6,9 S—205: húskivonat 10 g halliszt 10 g kukoricalekvár (50%-os) 5,0 g ammoniumacetát 2,0 g szacharóz 36 g glükóz 9 g csapvízzel feltöltve 1000 ml-re pH 7,0 A találmány szerinti eljárással termelt WG 696 vegyület semleges anyag, amely vízben kevéssé a legtöbb szervés oldószerben, mint szénhidrogénekben, klórozott szénhidrogénekben, alkoholokban, ketonokban, észterekben és hasonlókban azonban jól oldódik. A vegyület 69,52% szenet és 8,30%) hidrogént, emellett még csak oxigént tartalmaz, tapasztalati képlete tehát C17 H 24 0 4 ,. ami összhangban áll a végzett molekulasúlymeghatározások eredményével. A kristályos vegyület olvadáspontja 46 C°; 0,05 mm Hg-öszlop nyomás alatt a vegyület forrpöhtja 110—112 C°. A WG 696 vegyület optikailag aktív, fajlagos forgatóképessége |>]20 D = -=—'l'l0 (1%, kloroformban). A vegyületet továbbá etanolban felvett ibolyántúli színképe jellemzi, amely kb. 205 millimikronnál mutat abszorbciós maximumot (e' == 240O); az infravörös színkép széntetrakloridos oldatban (1%) az alábbi frekvenciáknál mutat jellegzetes abszorbciósávokat: 960, 970, 1032, 1004, 1224, 1245, 1376 és 1735 cm-1 , amint ez a csatolt rajzon látható. , A WG 696 vegyület fajlagos citosztatikus aktivitását sorozatos higítási próbákkal határoztuk meg. E mikrobiológiai kísérletek eredményeit az alábbi II. táblázatban foglaltuk össze, amelyben az aktivitás-értékeket a, vegyület ama mennyiségeiben adtuk meg, amelyek az illető mikroorganizmussal szemben 50%-os gátló hatást (IC5o) mutattak. E kísérletek során Sabouraudféle folyékony tápközegeket alkalmaztunk a gombák elleni aktivitás meghatározására, míg a baktériumok elleni aktivitás meghatározását infúziós húslé alkalmazásával végeztük. 2
