152069. lajstromszámú szabadalom • Eljárás biológiailag aktív oligopeptidek előállítására
152069 19 20 0,58 g (70%) védett heptapeptid-amidot kapunk. Op.: ""217—218 C°. Rf: 0,93. Analízis: C 45H e4 O 9 N 10 S (921,11); számított: N 15,2; talált: N 15,4. A 3—6. példákban leírt védett peptidek dekarbobenzoxilezését folyékony ammóniában fém nátriumos redukcióval az 1. példában a XVIIIb vegyület előállításánál leírt módon végezzük el. 7. példa: a) F-Gly-Ala-Phe-Ile-Gly-OEt előállítása*. * F = Formil. 0,41 g (4,0 mmól) F-Gly-OH-t* feloldunk 8 ml dimetilformamidban, mely 0,52 ml (4 mmól) trietilamint is tartalmaz, majd —10 C°-ra hűtve 0,4 ml klórszénsav-etilésztert, 10 perc után pedig 16 ml dimetilformamidban oldott 1,9 g (4,0 mmól) H-Ala-Phe-Ile-Gly-OEt-HCl-t és 0,52 ml (4,0 mmól) trietilamint adunk a vegyes savanhidridhez. Éjszakán ál: hagyjuk állni, majd vízzel hígítjuk, szűrjük, vízzel mossuk és szárítjuk. 1,56 g (77%) védett pentapeptid-észtert kapunk. Op.: 243—247 C°. Rf: 0,76. b) F-Gly-Ala-Phe-Ile-Gly-OH előállítása. 1,4 g (2,8 mmól) fenti észtert feloldunk 10 m] metanolban és 3,0 ml 1 n nátrium-hidroxid oldattal elszappanosítjuk. Ekvivalens sósavval savanyítjuk. A kivált anyagot szűrjük, vízzel mossuk és szárítjuk. 1,05 g (78%) védett pentapeptidet kapunk. Op.: 225 C°-on barnul >250 C°, Rf: 0,3. c) F-Gly-Ala-Phe-Ile-Gly-Leu-Met-NH,; előállítása. 0,72 g (1,5 mmól) védett pentapeptidet leöntünk 2,0 ml dimetilformamiddal. Géllé duzzad, majd 0,21 ml (1,5 mmól) trietilamin hozzáadása után feloldódik. Lehűtjük —10 C° alá és 0,15 ml (1,5 mmól) klórszénsavetilésztert csepegtetünk az oldathoz, majd 15 perc múlva az amin-komponenst: 0,77 g (2,25 mmól) H-Leu-Met-NH2 • HCl • 2,5 H?-ot" 2,0 ml dimetilformamidban oldunk és 0,315 ml (2,25 mmól) trietilamint adunk hozzá. A keletkező szuszpenziót a vegyes savanhidridhez öntjük és 2X1,0 ml dimetilformamiddal beöblítjük, keverjük a reákcióelegyet, mely gélesedik. Éjszakán át hagyjuk szobahőmérsékleten állni, vízzel eldörzsöljük, szűrjük, vízzel mossuk. 0,94 g (87%) védett heptapeptid-amidot kapunk. Op.: >250 C°, Rf: 0,0. Analízis: C34 H 54 0 8 N 7 S (720,92); számított: N 13,6; talált: N 13,5. 8. példa: a) Z-Gly-Phe-Ile-Gly-OE-t előállítása. 5,0 ml piridinben együtt feloldunk 2,0 g (5 mmól) H-Phe-Ile-Gly-0"Et• HCl-t és 1,65 g (5 mmól) Z-Gly-ONP-t, majd 0,7 ml (5 mmól) trietilamint adunk hozzá. Hagyjuk állni egy éjszakán át, majd vízzel hígítjuk, szűrjük, vízzel mossuk és szárítjuk. A kapott nyers védett íetrapeptidésztert etanol-vízből kristályosítjuk. 2,63 g (95%) anyalúgot kapunk. Op.: ISI—183 C°. Rf: 0,99, b) F-Gly-Gly-Phe-Ile-Gly-OEt előállítása. A fenti védett tetrapeptid-észterből 1,66 g-ot (3 mmól) ekvivalens sósavat tartalmazó ecetsav oldatban hidrogenolizálunk csontszenes palládium jelenlétében. A hidrogén felvétele után a katalizátort kiszűrjük, az oldatot bepároljuk és éterrel eldörzsöljük. 1,3 g (95%) szabad tetrapeptidet kapun,k. Rí: 0,93. Ennek 1,14 g-ját oldjuk 8 mi dimetilformamidban, mely 0,35 ml (2,5 mmól) trietilamint is tartalmaz, majd az alábbi vegyes savanhidridhez adjuk: 0,30 g (2,9 mmól) F-Gly-OH-t szuszpendálunk 6,0 ml dimetilformamidban, hozzáadunk 0,405 ml (2,9 mmól) trietilamint és —10 C° körüli hőmérsékleten 0,29 ml (2,9 mmól) klórszénsax-etilésztert Tíz perc keverés után adjuk hozzá az amin-komponenst. Éjszakán át szobahőmérsékleten hagyjuk állni, majd vízzel hígítjuk, szűrjük és vízzel mossuk, szárítjuk. 0,72 g (59%,) védett pentapeptidet kapunk, Op.: 226—228 C°. c) F-Gly-Gly-Phe-Ile-Gly-OH előállítása. 0,62 g (1,25 mmól) védett pentapeptid-észtert szuszpendálunk 4,0 ml metanolban és 1,4 ml 1 n nátriumhidroxid oldatot adunk hozzá. Lassan feloldódik. Egy óra után ekvivalens sósavval savanyítjuk, vízzel hígítjuk és szűrjük, vízzel mossuk és szárítjuk. 0,42 g (73%) védett pentapeptidet kapunk. Op.: 204—206 C°, .Rf: 0,43. d) F-Gly-Gly-Phe-Ile-Gly-Leu~Met-NH2 előállítása. Az 5. példa c) pontjában leírt módon 0,37 g (0,8 mmól) védett pentapeptidből kiindulva készítjük a védett heptapeptid-amidot. 0,47 g (84%,) kívánt terméket kapunk. Op.:'250 C°. Rf: 0,0. Analízis: C33 H 52 O s N 7 S (706,87); számított: N 13,85; talált: N 13,90. A 7—8. példában leírt íormil-heptapeptidamidok deformilezése ekvivalens sósav jelenlétében ecetsav oldatban történt (5—10 percig 80—100 C°-ra melegítve). 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 10
