151681. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a grizeofulvin tiszta állapotban való előállítására
151681 6 az eredetileg jelen volt grizeofulvin 8%-át tartalmazza. A száraz micéliumot megőröljük és folytonos működésű extraháló készülékben petroléterrel teljesen zsírtalanítjuk. Ezután a petrolétertől mentesített száraz micéliumot folytonos műveletben extraháljuk diklórmetánnal. A kapott 19,4 liter kivonatban spektrofotometriai meghatározás szerint 136,5 g grizeofulvin van jelen. A 2 liter térfogatra bepárolt kivonatot 2,5 cm átmérőjű, 30 g alumíniumoxidot tartalmazó oszlopon kromatografáljuk. A színtelen eluátumból 1 liter nehézbenzin (fp. 150 C°) hozzáadása után a diklórmetánt teljesen ledesztilláljuk. A nehézbenzines anyalúgból 121 g tiszta fehér grizeofulvint kapunk (a fermentációs termékben jelenlevő összes grizeofulvin-tartalomra számítva 80,5%-os hozam), amelynek olvadáspontja 220—221 C°. A termék grizeofulvin-tartalma 99,9%. 2. példa: 1 kg őrölt száraz micéliumot, amelynek grizeofulvin-tartalma 22,5 g, zsírtartalma pedig 12%, 3 liter diklórmetánnal 5 percig kikeverünk, majd a kivonatot nyomószűrőn elkülönítjük a micéliumtól és a leszűrt micéliumot 1 liter diklórmetánnal mossuk. Az egyesített diklórmetános kivonatot 500 ml térfogatra bepároljuk, 200 ml nehézbenzint (fp. kb. 150 C°) adunk hozzá és a diklórmetánt teljesen ledesztilláljuk. Az ennek során a nehézbenzines oldatból levált nyers grizeofulvint leszívatjuk és petroléterrel zsírtalanítjuk. Ily módon 21,8 g grizeofulvint kapunk, amelynek olvadáspontja 218— 221 C°, hatóanyagtartalma pedig 96%. Ezt a nyers terméket 200 ml diklórmetánban oldjuk és az oldatot oly szűrőrétegen keresztül szűrjük, amely 5 gl : 1 arányú alumíniumoxídaktívszén keverékből áll és amelynek átmérője 1 cm. A kapott színtelen szüredékből az oldószer ledesztillálása útján 20,5 g grizeofulvint nyerünk ki (a száraz micáliumban jelen volt összes grizeofulvintartalom 91%-a), amelynek olvadáspontja 220—221 C°, hatóanyagtartalma pedig meghaladja a 99%-ot. 3. példa: 20 kg száraz micéliumot, amely 0,690 kg grizeofulvint és 13% zsírszerű anyagot tartalmaz, 73,0 kg diklórmetánnal (fp.76 o = 39—42 C°, d2 o = 1,322) zárt berendezésben 5 óra hosszat extrahálunk. A kivonatot oldószertől mentes kristálypéppé pároljuk be, majd benzinnel (fp.760 = 80—110 C°, d20 = 0,720) zsírtalanítjuk, azután megszárítjuk. Ily módon 0,690 kg nyers grizeofulvint kapunk, amelynek hatóanyagtartalma 92%. 5 Ezt a nyers terméket 11,0 kg diklórmetánban oldjuk, 0,160 kg aktívszénnel kezeljük és leszűrjük. A színtelen oldatból 24,0 kg benzin hozzáadása útján leválasztjuk a grizeofulvint; a levált terméket ugyanezzel az oldószerrel 10 mossuk, majd megszárítjuk. A fenti módon 0,620 kg tiszta fehér kristályos grizeofulvint (a száraz micéliumban jelen volt hatóanyagtartalom 90%-a) kapunk; e termék hatóanyagtartalma 99,4%, olvadáspontja lo 220—221 C°. 4. példa: 1 kg száraz micéliumot, amely 29 g grizeo-20 fulvint tartalmaz, 3 liter 1,2-diklóretánnal folytonos műveletben extrahálunk. Az oldószer eltávolítása és a maradék zsírtalanítása után 28 g nyers grizeofulvin marad vissza, amelynek hatóanyagtartalma 95%. 25 Ezt a nyers grizeofulvint 400 ml 1,2-diklóretánban oldjuk, az oldatot leszűrjük és oly alumíniumoxid-oszlopon kromatografáljuk, amely 4 cm vastag rétegben 12 g alumíniumoxidot tartalmaz. A kapott színtelen eluátumból 26 g 30 tiszta fehér, 220—221 C° olvadáspontú grizeofulvint nyerhetünk ki. Ennek a terméknek a hatóanyagtartalma meghaladja a 99%-ot; a száraz micélium összes hatóanyagtartalmára számított termelési hányad 89%. 35 Szabadalmi igénypont: Egyszerűsített eljárás a grizeofulvin tiszta állapotban való előállítására, azzal jellemezve, 40 hogy a grizeofulvin extrahálására szelektív oldószerként diklórmetánt vagy 1,2-diklóretánt használunk fel, mimellett a micéliumnak vagy az oldószeres kivonatból kapott maradéknak az előnyösen 5—12 szénatomos szénhidrogének-45 kel történő önmagában ismert zsírtalanítása után a kapott és ismételten diklórmetánban vagy 1,2-diklóretánban oldott nyers grizeofulvint, ill. a zsírtól mentes kivonatot önmagában ismert módon alumíniumoxiddal és/vagy aktív-50 szénnel mentesítjük a kísérő szennyezésektől, majd a tisztított oldatból valamely erre alkalmas lecsapószer, előnyösen 5—12 szénatomos alifás szénhidrogének hozzáadása vagy bepárlás és lecsapószer hozzáadása útján vagy lecsa-55 pószer alkalmazása nélkül tiszta grizeofulvint nyerünk ki. Figyelembe vett nyomtatványok: Antibiotika 3/11041/1958. (Lomonoszov Univ. Moszkva). A kiadásért Jelel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója. 653868. Zrínyi (T) Nyomda, Budapest V„ Balassi Bálint utca 21—23. 3
