151527. lajstromszámú szabadalom • Eljárás biológiailag hatékony cianokobalamin-monokarbonsav előállítására
MAGYAK NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Bejelentés napja: 1963, III. 21. (GO—887) Közzététel napja: 1964. III. 23. Megjelent: 1965. VII. 01. 151527 Szabadalmi osztály; 30 h 1—8 Nemzetközi osztály: A 61 k Decimái osztályozás: Feltaláló: Dr. Kelemen Ágnes gyógyszerész, Budapest Tulajdonos: Gyógyszeripari Kutató Intézet, Budapest Eljárás biológiailag hatékony eianokobalamin-monokarbonsav előállítására Ismeretes, hogy a cianokoibalamin :(Bj 2-vitamin) makro-gyűrűjén 3 aoetamid- és 3 propionamid, tehát összesen 6 savamid-csoport helyezkedik el. A prapionamid-csoportok kötése viszonylag labilis, gyengén savanyú közegben hidrolizál, miközben mono-, di- és trikarbonsavak keletkeznek. Az aoetamid csoportok csak erélyesebb körülmények között hidrolizálhatók. A cianokobalamin gyengén savanyú közegben történő hidrolízisének reakcióelegyéből ioncserélő gyantával vagy eldktroforézissel monokarbonsav különíthető el. Ez a monókarbonsav papírkromatográfiával vizsgálva nem egységes, hanem 3 monókarbonsav elegyének mutatkozik, melyek a szabad karboxil-csoportot különböző helyeken 'tartalmazzák. A három izomer monókarbonsav egyike Escherichia coli 113—3 jelzésű törzsével vizsgálva a Bi2-vitamin antagonistájának mutatkozik [Acta Haemat. 24, 9 (I960); Acta Microbiologica Hung. 8, 237 (1961); Acta Physiol. Hung. 21, 177 '(1962)]. A vegyület antagonista ihaitását állatkísérletek is igazolták [Nature 194, 689 1(1962)]. Klinikai vizsgálatok szerint ez a cianokobalamin-monokarbonsav terápiásán jól alkalmazható polycythaemia vera kezeléséire [Nature 194, 386 (1962)]. A cianokobalamin gyengén savanyú hidrolizisénél keletkező másik két monókarbonsav izomer nem mutat antagonista, hatást, ezért az 2 előbbiekben említett terápiás célra nem alkalmazhatók. A Bi2-vitamin antagonista jaként ható cianokobalamin-monokarbonsav izomer előállítása 3 5 úton vi tetézhető 'ki: — Fermentációs úton, ämikoris Propionibacterium slhermanii PB—77 jelzésű törzzsel fermentálva specifikusan a hatékony izomer mohakarbonsav keletkezik 1(149.538 1. sz, magyar 10 szabadalom). — A B( 2-vitamin előállítása során tisztítási céllal végzett savas közegbén történő kezelések során részleges hidrolízis következik be, s az előállítás folyamán keletkező anyalúgok és mel-15 léktermékek az izomer cianokobalamin-monokarbonsavat tartalmazzák. Ezekből a biológiailag hatékony izomer körülményes eljárásokkal különíthető el. —• A cianolkobalamin savas hidrolízisének 20 reakcióelegyóből a keletkezett mono-, di- és trikarbonsavakat ismert módon szétválasztják, majd a három izomer monókarbonsav elegyéből a biológiailag hatékony monokarbonsavat izolálják. Utóbbi izolálásra több eljárás isme-25 rétes. Az izolálás megoldható ecetsavtartalmú vízzel telített szek.-butanolban történő papírkromatográfiával [J. Chem. Soc, 3! 849 (1953)]. Ez az izolálás nem preparatív jellegű, nagyobb mennyiségek előállítására alkalmatlan. Ismere-30 tes olyan eljárás is, mely meglehetősen komp-151527
