151394. lajstromszámú szabadalom • Kémszer és eljárás gonadotropin meghatározására

151394 6 Az említett foszfát-tompító-oldatot oly módon készíthetjük el, hogy pl. 2,9 g primer káliumfoszfátot, 9,6 g nátriumfoszíátot és 4,5 g nátriumkloridot desztillált vízben oldunk, majd az oldatot 1 liter térfogatra töltjük fel. Foszfát-tompító' helyett citrát-tompítót is alkalmazhatunk, amikor is ez egyben kelátképző szerként is szerepel a kémszerben. Nagy számú összehasonlító kísérletet végeztünk ismerten pozitív, tehát terhes nőktől származó vizeletekkel. Az eddig ismert módszer esetében a vizelet korától és tárolási hőmérsékletétől függően a meghatározások az esetek 5—10%-ában kétes vagy negatív eredményt adtak. Mindezeket a mintákat újból megvizsgáltuk a találmány szerinti módszer alkalmazásával, amikor is valamennyi kétes vagy állítólag negatív minta világosan és egyértelműen pozitív eredményt adott. A találmány szerinti kémszer előállítási eljárásának részleteit közelebbről az alábbi példák szemléltetik. 1. példa: Tompító-oldatot készítünk, az alábbi vegyületek felhasználásával: 2,88 g/liter primer káliumfoszfát, 9,62 g/liter szekundér nátriumfoszfát, 4,5 g/liter nátriumklorid, majd ehhez az oldathoz 2,0 g/liter etiléndiamintetraecetsav-dinátriumsót adtunk. Ezután ebben a tompító-oldatban 0,05 súly% koncentrációjú antiszérum-oldatot készítünk liofilizált antiszérumból. 0,4 ml ilyen antiszérumoldatot adunk emberi chorion gonadotropinnal érzékenyített és liofilizált eritrociták 0,25 ml desztillált vízzel készített 1 tf%-os szuszpenziójához. Az így kapott elegyet terhesség megállapítására szolgáló kémszerként használhatjuk fel. Ebből a célból 0,1 mi vizsgálandó vizeletet adunk a kémszerhez. 2. példa: 0,5 g antiszérumot 100 ml oly citrát-tompító oldatban oldunk, amely literenként 11,13 g citromsavat és 8,53 g káliumhidroxidot tartalmaz, Az így kapott oldatot egyenlő arányban elosztva 100 fiolába töltjük és liofilizáljuk. A meghatározás végrehajtása előtt egy-egy fiolába 10 ml desztillált vizet adunk. Az így készített oldatból 0,4 ml mennyiséget adunk a liofilizált érzé-5 kenyített eritrociták 0,25 ml desztillált vízzel készített, 1 tf%-os szuszpenziójához. Az így elkészített kémszer közvetlenül felhasználható a meghatározásokhoz. 10 3. példa: Gonadotropinnal érzékenyített eritrociták 10 tf%-os szuszpenziójának 10 ml mennyiségét 33 ml oly desztillált vízben szuszpendáljuk, amelyhez előzőleg 0,9% nátriumkloridot és 2 súly% nyúl-szérumot adtunk; egyidejűleg 66,7 mg EDTA-dinátriumsót is adunk az elegyhez. Az így kapott szuszpenzióból 0,05 ml menynyiséget adunk az 1 példában leírt tompító-oldat 0,4 ml mennyiségével készített 0,05 súly% koncentrációjú antiszérum-oldathoz. Az így kapott elegy a megfelelő gonadotropin meghatározásra kémszerként használható. 20 25 Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás gonadotropinok meghatározására szolgáló kémszer előállítására azzal jellemezve, hogy a gonadotropinnal érzékenyített eritroci-30 ták vizes szuszpenziójához vagy az említett gonadotropin elleni antiszérum vizes oldatához vagy e két alkotórész elegyéhez valamely kelátképző szer oly mennyiségét adjuk, amennyi elegendő a vizsgálandó folyadékban jelenlevő kal-35 ciumionok megkötésére. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítás! módja azzal jellemezve, hogy a kelátképző szert chorion gonadotropin elleni antiszérum vizes oldatához adjuk és adott esetben az oldatot 40 liofilizáljuk. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosífcási módja azzal jellemezve, hogy a kelátképző szert a chorion gonadotropinnal érzékenyített eritrociták vizes szuszpenziójához adjuk és adott 45 esetben a szuszpenziót liofilizáljuk. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatos!tási módja azzal jellemezve, hogy kelátképző szerként etiléndiamin-tetraecetsavat vagy citromsavat vagy ezek valamely alkálifém- vagy 50 ammóniumsóját használjuk fel. Figyelembe vett nyomtatványok: Chem. Abs, 1958—1962. Subsidia Medica 1958—1962. Arzneimittel Forschung 1958—1962. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 642730. Zrínyi (T) Nyomda. Budapest V., Balassi Bálint utca 21—23.