151313. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fumagillin előállítására

151313 A butilacetátot izz. nátriumszulfáttal víztelenítjük, majd vákuumbepárolóban 0,1 Hgmm vákuum mellett 40 C°-on hepároljuk 1/5-öd térfogatra. A bepárolt nyúlós konzisztenciájú oldatot térfogatára számított 20-szoros térfogat forráspontjára melegített metanolban feloldjuk, majd a metanolos oldat térfogatára számított 2-szeres térfogatú desztillált vizet adunk hozzá. A vizes metanolos oldat pH-ját foszforsavval pH = 2,5-re állítjuk be és ekkor finom, eloszlású kolloid Fumagillin csapadék keletkezik. A finom eloszlású Fumagillint a várható Fumagillin mennyiségére számított 5-szörös mennyiségű kovasavon adszorbeáltatjuk, majd az oldatból kiszűrjük. A kieselguhron adszorbeált Fumagillint a kieselguhr mennyiségre számított 30-szoros mennyiségű forró acetonnal kevertetjük, ill. eluáljuk. Az acetonos oldatot forrón, térfogatára számított 2% derítőszénnel derítjük és K—5-ös Seitz-szűrőlapon megszűrjük. A szűrés befejezése után vákuum bepárló készülékben 1 mm higanyoszlop nyomás mellett N atmoszférában bepároljuk 1/30-ad térfogatra, majd —10 C°-on 8—10 óráig kristályosodni hagyjuk. A képződött kristályokat G—4-es szűrőn szűrjük és fénytől védve 40 C° alatt megszárítjuk. A Fumagillin átkristályosítását 50% vizet tartalmazó 20-szoros mennyiségű metanolos oldatból végezzük, majd a kicsapódott kristályokat kiszűrjük és ismét szárítjuk. A kristályokat szitáljuk és N atmoszféra alatt porampullában 0 C°-on fénytől védve tároljuk. A kapott termék 2,9 g Fumagillin 92—95% hatóanyagtartalommal. Kitermelés: 6 1 fermentiere számítva: 44%. Op.: 191—194 C°, [«] D = —24,2° (c = 5%, kloroformban); analízis: 0% = 24—28; C%, == = 56—58. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás fumagillin előállítására, amelyre jellemző, hogy az Országos Közegészségügyi 5 Intézetnél 630 704/23 sz. alatt deponált Aspergillus fumigatus var. Helvola A. 33 sz, törzset, ill. a törzs mesterséges és/vagy természetes módszerrel nyert utódait aerób körülmények között, szubmerz tenyésztéssel fermentáljuk, 10 majd az antibiotikumot a fermentációs médiumból kinyerjük és/vagy szerves vagy szervetlen bázissal képezett sójává alakítjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítás! módja, amelyre jellemző, hogy a férmen-15 táeiót 26—28 C°-on végezzük el. 3. Az 1—2. igénypontok szerinti eljárás foganatosítási módja, amelyre jellemző, hogy a fermentációt 4—7 pH-értéken végezzük el. 4. A 1—3. igénypontok szerinti eljárás foga-20 natosítási módja, amelyre jellemző, hogy a fermentációt asszimilálható nitrogént és szenet, valamint szervetlen sókat tartalmazó táptalajon végezzük el. 5. A 4, igénypont szerinti eljárás foganato-25 sítási módja, amelyre jellemző, hogy a táptalajban az asszimilálható szén : nitrogén arány 20—60 : 1. 6. A 4. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, amelyre jellemző, hogy asszimilál-30 ható nitrogénforrásként kukoricalekvárt alkalmazunk a fermentációs térfogatra számított 2—10%) mennyiségben (50% szárazanyag esetén). 7. Az 1—6. igénypontok szerinti eljárás foga-35 natosítási módja, amelyre jellemző, hogy a fermentációt diszaccharidok, előnyösen szaccharóz jelenlétében végezzük el. •8. Az 1—7. igénypontok szerinti eljárás foganatosítási módja, amelyre jellemző, hogy a fer-40 mentációt nyomelemek, előnyösen cink, és/vagy bór jelenlétében végezzük el. 9. Az 1—8. igénypontok szerinti eljárás foganatosítás! módja, amelyre jellemző, hogy a fumagillin eluálását pH-9 körüli értéken alkáli-45 hidroxiddal végezzük el. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 642770. Zrínyi (T) Nyomda. Budapest v., Balassi Bálint utca 21—23. 4