150834. lajstromszámú szabadalom • Eljárás peptidek előállítására
4 150.834 képletű Na-palmitoil - (N' -karbobenzoxi) - L-lizil-(N * -karbobenzoxi)-L-lizin-metilesztert Naa-Palm-(N' —Z)-L—Lys-(N' —Z)-L—Lys—OCH3 -nak, és pl. a H2 N—CH—COOC 2 H 5 (CH2 ) 3 NH—C—NH—NO 2 NH képletű L-nitroargininetilesztert H—L—Nitroarg— OC2 H5-nek jelöljük. 1. példa: N" — Palm—(Ne —Z)—L—Lys—(N e —Z)— _I,.__Lys OCH3 10O g Na — Palm—(N E —Z)— I. Lys—Oh-t és 57 g H—(Ne — Z)—L—Lys—OCH 3 -at 230 ml DMF-ben feloldunk, —10 C°-ra lehűtjük, 40,8 g diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá és 16 óra hosszat '0 C°-on állni hagyjuk. A képződő sűrű gélt 50 ml DMF-el hígítjuk, 50 C°-ra melegítjük, ismét 20 C°-ra hűtjük és a diciklohexilkarbamidról lenuccsoljuk. A szűrletet 4 liter 5%-os nátriumklorid oldattal kicsapjuk, 1 óra eltelte után lenuccsoljuk, vízzel mossuk és vákuumban 70 C°-on megszárítjuk. Eceteszter/petroléterben való átkristályosítás után Na —Palm—(N E —Z)—L—Lys— (N' —Z)—L—Lys—OCH3 -at kapunk, olvadáspont 123—125 C°;[a] 'f = —8,4° (c = 2, DMF-ben). N a — Palm—L—Lys—L—Lys—OCH3 • 211 Cl 50 g Na —Palm—(N' _Z)—L—Lys—<N e — Z>-1,—Lys—OCHß-at melegítés közben 50 ml jégecetben feloldunk és 20 C°-on, a nedvesség kizárásával 150 ml 33%-os brómhidrogénes jégecettel IV2 órán át rázunk. 15 percen át vízsugárszivattyú vákuumában gázmentesítjük, 150 ml vízzel hígítjuk és kétszer éterrel extraháljuk. A vizes fázist jég hozzáadása közben konc. ammóniával meglúgosítjuk és többször eceteszterrel extraháljuk. Az eceteszteres kivonatokat nátriumszulfáton megszárítjuk és vákuumban 40 C°-on bepároljuk. A visszamaradó szirupot 20 ml metanolban feloldjuk, 4 n metanolos sósavval pH 7-re állítjuk be és 40 C°-on, vákuumban bepároljuk. A.cetonban kristályosítsuk és N'—Palm — L — Lys — L—Lys —OCH3-2HCl-t kapunk, olvadáspont 210—212 C° (bomlás közben);[*] D° ^ ~ 17 ° < c = 2 ' vízben )Na —Palm—(N 1 —Z)—L—-Lys—(N c —Z)— —L—Lys—OH 26 g Na —Palm—<N E — Z)—L—Lys— (N E —Z)— L—Lys—OCH3 -at 1 liter metanolban feloldunk és 16 órán át, 20 C°-on 50 ml 2 11 nátronlúggal elszappanosítunk. A megszűrt oldatot vákuumban 35 C°-on 100 ml-re bepároljuk, 1 liter 0,01 n sósavval kicsapjuk, lenuccsoljuk, vízzel mossuk és vákuumban, 70 C°-on megszárítjuk. Eceteszter/ /petroléterben kristályosítunk -és NE —Palm— (Nn — Z)- -L—Lys—(N£ — Z)—L—Lys—OH-t kapunk, olvadáspont 129—131 C°. Na —Palm—L—Lys—L—Lys—OH - HCl 16 g Na — Palm—(N1 —Z)—L—Lys— (N c — Z)— L—Lys—OH 300 ml jégecettel és 30 ml vízzel készített oldatát 1 g palládiummal aktivált szén hozzáadása után hidrogénezzük. A katalizátort lenuccsoljuk, a szűrletet vákuumban, 45 C°-on besűrítjük és a maradékot kétszer metanollal bepároljuk. Kevés vízzel felvesszük, a pH-t 1 n sósavval 7-re állítjuk be és a megszűrt oldatot acetonnal kicsapjuk. Na —Palm—L—Lys—L—Lys-— OH-HCl-t kapunk, mely 180 C° feletti hőmérsékleten bomlik;, [a] o — —4° (c = 2, vízben). 2. példa: Na — Palm—(N E — Z)—L—Lys— (N E —Z)— L—Lys—NH2 20 g T\a — Palm—{INT — -Z)—L—Lys— (N£ —Z)— L—Lys—OCH3 (melyet az 1. példában megadott módon állítottunk elő) 800 ml metanollal készített oldatát 25 C°-on ammóniumgázza.1 telítjük és 48 órán át 25 C°-on állni hagyjuk. Lenuccsoljuk, sok vízzel megmossuk, vákuumban 60 C°-on megszárítjuk és DMF/vízben kristályosítjuk. A kapott N«—Palm—(N E — Z)—L—Lys—<N E — Z)—L—Lys— --NH2 174—176 C°-on olvad; [«] D ° =--= —8,2° (c = 2. DMF-ben). Na —Palm—L—Lys—L—Lys—NH 2 • 2HC1 17 g Na —Palm—<N E — Z)—L—Lys—(N E —Z)— L—Lys—NH2 300 ml jégecettel és 30 ml vízzel készített oldatát 1,7 g palládiummal aktivált szénnel hidrogénezzük. A katalizátort lenuccsoljuk és a szűrletet vákuumban, 45 C°-on bepároljuk. A maradékot vízzel való kétszeres bepárlás után kevés vízben oldjuk, pH-ját 3 n sósavval 7-re állítjuk és acetonnal kicsapjuk. A kapott N«—Palm— L — Lys — L —Lys—NH2 • 2 HCl 232—233 C-on olvad (bomlás közben); [a] t>' = —11° (c — 2, vízben). 3. példa: Na —Palm—.(N 1 —Z)—L—Lys—<N a —Z)— L_Lys—<NHNH2 26 g Na —Palm—(N E — Z)—L—Lys—(N E —Z)— L—Lys—OCH3 {melyet az 1. példában megadott módon állítottunk elő) 400 ml metanollal készített oldatához 26 ml 100%-os hidrozinhidrátot adunk és 15 percig gőzfürdőn melegítjük. 24 óra eltelte után 800 ml vízzel elegyítjük, lenuccsoljuk, sok vízzel mossuk és megszárítjuk. DMF/alkoholban kristályosítunk és Na —Palm—(N c —Z)—L— Lys—(NE — Z)—L—Lys—NHNH2 -t kapunk, olvadáspont 190—191 C°; [a]o0 = —10,8° (c = 1, DMF-ben).
