150737. lajstromszámú szabadalom • Eljárás védett, reakcióképes nonapeptid-származék előállítására
2 150.737 2. hogy a három komponens összekapcsolása a karbonsavazidok acilezőkészségét kihasználó peptidszintézis módszerével történik, amely biztosítani látszik a kapcsolódási reakciókban résztvevő aminosavak konfigurációállandóságát; 3. hogy a szintézis folyamán az előző pontban említett karbonsavazid-módszer egy ideig nem ismert formában kerül alkalmazásra. Az új eljárás felhasználása szükségtelenné teszi a hidra-A szabadalomban leírt védett nonapeptid-származék új vegyület, az irodalomból ismert, hasonló szekvenciát tartalmazó, magasabb tagszámú polipeptidek felépítési elve pedig e nonapeptid-származékétól teljesen eltérő. (R. A. Boissonnas, St. Guttmann, Waller, P. A. Jaquenoud: Experientia 12, 446 (1956); C. H. Li, J. Meienhofer, E. Schnabel, D. Chung, T. Lo. J. Ramaehandran: J. Am. Soc. 82, 5700 ,(1960); R. Schwyzer, W. Rittel, H. Kappeler, B. iselin: Angew. Chem. 72, 915 (I960); K. Hof mann, M. E. Woolner, II. Yajima, G. Spühler, T. A. Thompson, E. T. Schwartz: J. Am. Chem. Soc. 80, 6458 (1958). Az 1. ábrában bemutatott vázlat alapján a nonapeptid-származék szintézise a következő lépéseken keresztül valósítható meg: a) A nonapeptid-származék 1—4 aminosavait tartalmazó, amino-csoportján védett tetrapeptidhidrazid előállítása. b) A nonapeptid-származék 5—7 aminosavait tartalmazó tripeptidészter előállítása. c) A nonapeptid-származék 8- 9 aminosavait tartalmazó dipeptidészter előállítása. d) A védett 1 — 4 tetrapeptidhiclrazid és az 5—7 tripeptidészter kapcsolása és a keletkező 1—7 védett heptapeptidászter hidraziddá alakítása. e) A védett 1--7 heptapeptidhidrazid és a 8—9 dipeptidészter kapcsolása és a keletkező védett 1—9 nonapeptidészter hidraziddá alakítása. f) Kapcsolásra alkalmas, 5. helyzetben a giutaminsav szabad karboxilcsoportja helyett amidcsoportot tartalmazó 5—7 tripeptidészter szintézise. * A szerkezetszimbólum után zárójelbe tett betű- és számjelzés a mellékelt táblázat sor- és oszlopjelzésére utal. zidokból első lépésben keletkező azid s a reakció észterkomponensének szabad állapotban történő izolálását, e komponensek előállítása és a peptidkötés kialakítása egy lépésben történik. E módosítás jelentős anyag- és időmegtakarítást jelent, anélkül, hogy a kitermelés csökkenne. 4. hogy a védett nonapeptid-származék szintézisének menetét az egyes aminosavakból kiindulva a következő általános vázlat szemlélteti (1. ábra): A felsorolt szintézis-lépések, melyek a könnyebb áttekinthetőség céljából a mellékelt táblázatban is össze vannak foglalva, a következőképpen valósíthatók meg:* a) Z—Ser—-Tyr-Ser-r-Met—N2 H 3 (K 1—7) előállítása. Karbobenzoxi-csoporttal védett L-szerin-hidrazidot (D 1) (J. S. Fruten, J. Biol. Chem. 146, 463 [1942]) aziddá alakítunk, s ezzel acilezünk L-tirozin-alkilésztert (C 2), melyet valamilyen sójából közvetlenül a reakció előtt szabadítottunk fel. Az így nyert Z—Ser—Tyr—OR (E 1—2) dipeptidésztert hidraziddá (F 1—2) alakítjuk. Lényegében hasonló módon készíthető el a 3—4 dípeptid is, Z—Ser—NHNH2 hidrazidból készített azid és H—Met—OR reakciójával. A kapott Z—Ser--Met—-OR (E 3—4) aminocsoporíját acilezö csoportot eltávolítjuk és ezzel eljutunk a H—Ser—Met—OR (G 3—4) dipeptidészterhez. A Z—Ser—Tyr—NHNH2 (F 1—2) és Ser— Met— —OR (G 3—4) kapcsolását azid-módszerrel végezzük el. A nyert Z—Ser—Tyr—Ser—Met—OR (H 1—4) tetrapeptidésztert végül hidraziddá (I 1—-4) -alakítjuk. b) H— Glu—His—Phe—OR (I 5---7) előállítása) I—OH A Z—His—NHNH:> (D 6) hidrazidot aziddá alakítjuk, s ezzel acilezzük a fenilalanin-alkilesztert (C 7), az így nyert Z—His—Phe—OR (F 6—7) (mely R -= Me esetében ismert vegyület; K. Hofmann, H. Kappeler, A. E. Furlenmeier, M. W. Woolner, E. T. Schwartz, T. A. Thompson: J. Am. Chem. Soc. 79, 1641 [1957]) dipeptidészferről alkalmas módon eltávolítjuk a terminális aminocsoportját acílező csoportot. A sójából felszabadított H—His—Phe—OR (F 6—7) dipeptidésztert Ser—Tyr—Ser—•Met—-Glu—His—Phe—Arg—Try 1. ábra.
