150736. lajstromszámú szabadalom • Eljárás védett dodekapeptid előállítására
8 150.736 (XXII) és 0,62 g benziloxikarbonil-L-argininti Lehűtjük jeges vízzel és 0,52 g DCC-t adunk hozzá. A DCC feloldódása után szobahőmérsékleten hagyjuk állni egy éjszakán át. A reakció végén a kivált DCU-t kiszűrjük, dimetilformamiddal kimossuk, a szűrletet bepároljuk. A párlási maradékot 10% butanolt tartalmazó kloroformban oldjuk fel és bután óllal telített 2,5 n sósavval, majd butanollal telített vízzel mossuk ki. A klorofoi mos oldatot szárítás után bepároljuk vákuumban, a párlási maradékot éterrel eldörzsöljük. Kapunk 1,32 g (64%) védett pentapeptidésztert. Op: (78°-on lágyul), 112°-on elbomlik. [a]B° = —41,1° (c = 1, metanolban.) Rf] : 0,87.. C44H7001 oN!,SC12 (1030,08) Számított: C '51,3 H 6,9 N 16,3 S 3,1 Cl 6,7 Talált: C 50,9 H 7,0 N 16,2 S 3,05 Cl 6.6 16. példa: Benziloxikarbonil-glicil- f-tozil-L-lizil-L-prolil-L-valil-glicil-£*-1:ozil~L-lizü-£' -tozil-L-lizil-L-arginil-L-arginil-L-prolil-L-valil£ -tozil-L-lizinmetilészter-diklórhidrát. (XXV) a) Metanolos szuszpenzióban 3,0 g Kuhn-féle BaSC>4 (Pd katalizátort előhidrilunk. Feloldunk 3,0 g védett pentapeptidészter - diklórhidrátot) (XXIII) 15 ml metanolban, mely 1,1 mi n sósavas metanolt is tartalmaz és a fenti katalizátorhoz adva négy órán át hidrogén áramban rázatjuk. A katalizátor eltávolítása után az oldatot szárazra pároljuk vákuumban és ét írrel, butanollal, eldörzsöljük. Kapunk 2,0 (74%) L-arginil-L-arginil-L-prolil-iL-valil- £ -tozil - L-lizin - metilészter-triklórhidrátot. Rí'i : 0,36. CseHosOaN^SCl.-! (932,41) Számított: N 18,05 S 3,43 Cl 11,4 Talált: N 17,85 S 3,6 Cl 12,3 b) Szobahőmérsékleten feloldunk 7,2 ml jégecet és 0,72 rnl 5 n sósav elegyében 3,97 g védett heptapeptidhidrazidot (XVI) és —10°-ra hűtjük. Ezután 0,72 ml 5 mólos nátriumnitrit-oldatot csepegtetünk hozzá úgy, hogy a reakcióelegy hőmérséklete —5° alatt maradjon. Hűtés közben 15 percen keresztül keverjük, majd 30 ml 15%-os hűtött honyhasó-oldattal elegyítjük. A keletkezett azid (XVII) elkülönül. Ezt etilacetáttal kivonjuk (3X20 ml). Az etilacetátos oldatokat egyesítés után hűtött nátriumkarbonát-oldattal savmentesre mossuk, száríjuk. Feloldunk 0,5 ml trietilamint tartalmazó 7,0 ml dimetilformamidban 2,8 g szabad pentapeptidészter-triklórhidrátot (XXIV), amely az a) pontban leírt módon készült, ehhez szűrjük a fenti etilacetátos azid oldatot, majd az elegyből az etilacetátot szobahőmérsékleten vákuumban kidesztilláljuk. A maradék dimetilformamidos reakcióelegyet 40 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. A reakció végén az oldatot vákuumban bepároljuk és 1:4 butanol-etilacetátban (20 ml) feloldjuk. Kimossuk butanollal telített 10%-os nátriumkarbonáttal, vízzel, n sósavval és vízzel. Az etilacetátos oldatot bepároljuk és a maradékot éterrel eldörzsöljük. A védett dodekapeptidészter 4,33 g (66%). Op: (85°-on lágyul és 95—105°-on bomlik. [a]r f = —39,7° (c == 1, metanolban.) Rfi :0,96. C9 7Hi46023N 2 2.S 4 Cl2 (2187,49). Számított: C 53,3 H 6,7 N 14,1 S 5,8 Cl 3,2 Talált: C 53,1 H 6,9 N 14,2 S 5,8 Cl 3,1 17. példa: Benziloxikarbonil-glicil- £ -tozil-L-lizil-L-prolil-L-valil-glicil- £-tozil-L-lizil-£ -tozil-L-lizil-jf? L-arginil-L-arginil-L-prolil-L-valil-f-tozil-L-lizin-diklórhidrát. (XXVI) Feloldunk 21 ml metanolban 2,61 g védett dodekapeptidésztert (XXV) és 4,8 ml 1 n nátronlúgot adunk hozzá. Három órán át 35°-on, 1 órán át szobahőmérsé"kleten hagyjuk állni. Ezután 1 n sósavval pH 3—5-re savanyítjuk és bepároljuk. A párlási maradékot feloldjuk 10 ml etanol-metilénklorid elegyében, a kivált konyhasót kiszűrjük, a szűrletet bepároljuk és éterrel eldö^zsöljük. A védett dodekapeptid 2,35 g (91%). Op: 110°-on lágyul, 115°-tól bomlik. {a]B°== —47,1° (c=l, metanolban.) Rf : 0,95. Neutralizációs ekvivalens: 2189 (számított: 2173). C9 (5Hi44023N 22 S 4 Cl 2 (2173,47). Számított: C 53,0 H 6,7 N 14,2 S 5,9 Cl 3,3 Talált: C 52,7 H 6,8 N 14,2 S 5,9 Cl 3,6 Az N-terminális védőcsoport lehasítása következő módon lehetséges: Feloldunk 0,2 g védett dodekapeptidet (XXVI) 2,0 ml kb. 40%-os brómhidrogénes jégecetben —5° -on. Ezen a hőmérsékleten hagyjuk állni 1 órán keresztül és szobahőmérsékleten további 1 órán át. Az oldatot betöményítjük, éterrel eldörzsöljük és az étert dekantáljuk. Szűrjük, éterrel mossuk. Nátriumhidroxid és foszfor pentoxid felett szárítjuk. Amorf por alakjában 0,19 g (95%) glicil- £ -tozil-L-lizil-L-prolil-L-valíl-glicil- £ -tozil-L-lizil- £ -tozil-L-lízil - L-arginil~L-arginil-L~prolil-L-valil- £ -tozil - L-lizin - tribrómhídrátot (XXVII) kapunk. C88H 13 902iN22S4Br3 (2209,18). Számított: Br 10,8 Talált: Br 11,6 (A 18—20.példákra a 2. táblázat vonatkozik.) 18. példa: Benzil-oxikarbonil-a)-tozil-L-arginil-L-prolil-L-valil- £-tozil-L-lizin-metilészter, (XXIX) Feloldunk 2,74 g L-prolil-L-valil-£ -tozil-L-lizin-metilészter-klórhidrátot (XIX) 4 ml dimetilformamidban és 4 ml etilacetátot adunk az oldathoz. A bázist 0,71 ml trietilaminnal szabadítjuk fel. A kivált só kiszűrése és mosása dimetilformamid-etilacetát, 1:1 után 2,54 g benziloxikarbonil-w-tozil-L-arginint (XXVIII) is feloldunk
