150735. lajstromszámú szabadalom • Eljárás Hypertensin-II előállítására
i 50.735 11. példa: p-klórbénziloxikarbonil-L-aszparaginil-co-N02 -argininmetilészter 5,4 g co-N02-argininmetilészterhidrokloridot oldunk 54 ml dimetilformamidban és hozzáadunk 2,8 ml trietilamint. V2 órai jeges vízben történő állás után a trietilaminhidrokloridot kiszűrjük, és a szüredékhez 6,0 g p-klórbenziloxikarbonü-L-aszparagint, majd 4,6 g diciklohexilkarbodiimidet adunk. Másnapig szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd a kivált karbamid származékot kiszűrjük és a szüredéket vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot oldjuk n-butanol-kloroform 1 : 1 elegyében és kirázzuk 2 n sósavval, 5%-os NaHCOs oldattal, majd vízzel. Szárítás után az oldószer elegyet vákuumban ledesztilláljuk és a maradékot absz. éterrel eldolgozva szűrjük. Nyeredék: 4,26 g (41,2%) védett dipeptidészter. Op. 80—90 C°. R/1 = 0,84; R/ 2 = 0,93; C19H26O8N7CI (515,91) Számított: N 19,0; Cl 6,9: OCH3 6,0 Talált: • 18,7 7,1 6,4 12. példa: p-klórbenziloxikarbonil-L-aszparaginil-uj-NO 2 -ar ginin A 11. példában leírt védett dipaptidészterből 3,65 g-t oldunk 25 ml etanolban, hozzáadunk 8,5 ml n NaOH oldatot és 1 óráig szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Ezután az oldószert vákuumban 25 C°-on ledesztilláljuk, a maradékot oldjuk, vízben, szűrjük és a szüredéket konc. sósavval savanyítjuk (pH-3). A kivált kissé nyúlós anyagot néhány órai állás után metanolban oldjuk. Másnapra a védett dipeptid kikristályosodik. Súlya 0,81 g (23%). Op. 126—127°. [^f = +8° (c= 1; jégecet); R;1 = 0,77; R/ 2 = 0,40; C18H24O8N7CI (501,89) Számított: C 43,0; H 4,8; N 19,5; Cl 7,1 Talált: 42,9 5,1 18,7 7,1 1.3. példa: p-klórbenziloxikarbonil-L-aszparaginil-ío-NOa -arginil-L-valil-L-tirozil-L-valil-L-hisztidil--L-prolil-L-fenilalaninbenzilészter 0,6 g p-klórbenziloxikarbonil - L-aszparaginil-«-nitroarginint és 1,0 g 10. példában leírt szabad hexapeptidet oldunk 5 ml absz. dimetilformamidban és hozzáadunk 0,27 g diciklohexilkarbodiimidet. 1 napi szobahőfokon történő állás után a kivált karbamid származékot kiszűrjük, mossuk kevés dimetilformamiddal, majd a szüredéket vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot absz. etilacetáttal eldolgozzuk és szűrjük. 1,4 g (87,5%) nyers védett oktapeptidbenzilésztert nyerünk, melyet acetonos és metanolos mosással tisztítunk. Op. 218—222 C°. A termék kromatográfiásan tiszta. R/1 = 0,91; R/ 2 = 0,91, így további tisztítás nélkül feldolgozható. 14. példa: L-aszparaginil-fL-arginil-L-valil-L-tirozil-L-valil-L-hisztidil-L-prolil-L-fenilalanin. (Hypertensin-II—Asp—Z^-amid.) A 13. példában leírt védett oktapeptidből 0,32 g-t oldunk 20 ml 90%-os ecetsavban és 0.4 Kuhniéle katalizátor jelenlétében hidrogénezzük 11 óráig. A katalizátor kiszűrése után nyert oldatot vákuumban szárazra pároljuk, víztelenítjük, a maradékot metanolban oldjuk, szűrjük és a Hypertensin-II-t absz. éterrel kicsapjuk. A termék kromatográfiásan tiszta. R/1 = 0,16; R/ 2 = 0,19. Biológiai értékmérés alapján, patkányon vizsgálva, vérnyomásemelő hatása többszöröse a noradrenalinnak. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás Val5 -hipertenzin-II (L-aszparaginil-L-arginil-L-valil-L-tirozil-L-valil-L-hisztidil-L-prolil-L-fenilalanin) előállítására, azzal jellemezve, hogy -L-prolil - L-fenilalanin - benzilésztert lépésenként p-klórbenziloxikarbonil-L-valil-L-hisztidin hidraziddal, p-klórbenziloxikarbonil - L-valil-L-tirozin-hidraziddal és p-klórbenziloxikarbonil-L-aszparaginil-co-nitro-argininnal kapcsolunk, majd a kapott p-klór - benziloxikarbonil - L - aszparaginil-a)-nitro-arginil-L-valil-L-tirozil-L-valil-L-hisztidil-L-prolil-L-f enilalanin - benzilészter három védőcsoportját egy műveletben katalitikus hidrogénezéssel távolítjuk el. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy a hidrazidok kapcsolására az azidos módszert alkalmazzuk. A kiadásért felel a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatói» 634363. Terv Nyomda, Budapest V., •Balassi Bálint utca 21-t23.
