150571. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a koriongonadotropin nyers koncentrátumainak tisztítására
2 150.571 hagyjuk, majd centrifugáljuk, a csapadékot jéghideg acetonnal két ízben, mossuk és a hatóanyagot vákuumban szárítjuk. (Termelés kb. 2,9 g.) Az anyagot ötszörös mennyiségű kétszer desztillált vízben feloldjuk, kb. 6,8 pH-t állítunk be, és 1%-os 2-etoxi-6,9-diaminokridinlaktátot addig csepegtetünk lassan hozzá, míg további csapadék már nem képződik. Egy óra hosszat hűtőszekrényben tároljuk, eközben a csapadék leülepszik. Ezután lecentrifugáljuk és elöntjük. A felette maradó oldatot 45%-os koncentráció eléréséig jéghideg acetonnal elegyítjük. Kis mértékű csapadékképződés következik be, a csapadékot lecentrifugáljuk és elöntjük. Az acetonkoncentráció 65%ra növelésével a hormont kicsapjuk. Éjszakán át mélyhűtőszekrényben állni hagyjuk, majd centrifugálással kinyerjük és a centrifugacsőben jéghideg acetonnal történő többszöri mosással az akridin maradékoktól megszabadítjuk. Végül vákuumban szárítjuk. A száraz anyagot 20 ml jéghideg, kétszer desztillált vízben feloldjuk, G 5-ös üvegszűrőn csíramentesen átszűrjük és 243 K°-ra (—30 C°) 24 óra hosszat történő befagyasztás után nagy vákuumban szárítjuk. Termelés: 0,69 g, 1250 i. E/mg-al, ami összesen 862 000 i. E-nek felel meg (86,2%). 2. példa: Etanol frakcionálással előtisztított 4 g koriongonadotropint (i. E/mg = 600, összesen 2,4 mill. i. E.) jéghideg kétszer desztillált vízben feloldunk. 6,8—7,2 pH beállítása után eseppenként 3%-os 2-etoxi-6,9-diaminioakridinlaktát oldatot adunk hozzá mindaddig, míg további esapadékképződés már nem mutatkozik. Rövid ideig a hűtőszekrényben állni hagyjuk, majd a csapadékot lecentrifugáljuk és elöntjük. A feleslegben jelenlevő akridinlaktáttól még sárga színű oldathoz jéghűtés és mechanikai kavarás közben 45% koncentráció eléréséig acetont adunk. Kismértékű csapadékképződés következik be. A csapadékot hűtőszekrényben egy óra noszszat történő tárolás után centri f ugatással eltávolítjuk és elöntjük. A tisztított hormon leválása az 1. példa szerini módon történik. Termelés: 1,8 g tisztított hormon 1000 i. E/mg-al, 2 1,8 mill. i. E. (75%). Szabadalmi igénypont: Eljárás terhes vizeletből származó nyers koriongonadotropin tisztítására, amelyre jellemző, hogy a HCG nyers koncentrátumai vizes kivonatait 9-helyzetben szubsztituált akridinvegyületekkel, előnyösen 2-etoxi-6,9-diaminoakridinlaktáttal a ballasztanyagoktól megszabadítunk oly módon, hogy ezeket az anyagokat vízben nem oldódó adszorpciós vegyületek alakjában kicsapjuk és centrifugálással elválasztjuk. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 832614. Terv Nyomda, Budapest V., Balassi Bálint utca 21—23.
