150517. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a 6-amino-penicillánsav kinyerésére
2 150.517 valamely alkálikus szerrel 6 és 9 közé történő beállítása mellett, majd a vizes oldatból az imint valamely vízben oldhatatlan sója,- pl. dilbenzil- Hetiléndiaminsója alakjában lecsapjuk. Ez utóbbi esetben előnyös a lecsapást eléggé koncentrált oldatból végezni; e célból az oldatot csökkentett nyomás alatt betöményítjük; a betöményítést végezhetjük még a vízzel való extrakció előtt, tehát a szerves oldószeres oldatban, vagy pedig magában a vizes oldatban is. Eljárhatunk oly módon is, hogy tölbb egymást követő extrakciót végzünk: először a szerves oldószeres oldatot extraháljuk vízzel 6 és 9 közötti pH-értéken, majd a vizes oldatot megsavanyítjuk és szerves oldószerrel extraháljuk, /azután ismét 6 és 9 közötti pH- értéken extraháljuk a szerves oldószeres oldatot vízzel, miközben az említett oldatok térfogatát minden egyes műveleti lépésben csökkentett nyomás alatt bepárlás útján csökkentjük. Az imin kivonásának említett különféle módszereit egymással különböző módokon kombinálhatjuk is anélkül, hogy ezzel a találmány kereteit túllépnők. A 6-amino-penicillánsavnak a kapott iminsóból való visszaalakítása híg savas oldatban történő hidrolízis útján folytatható le. Ezt a reakciót 0 C° és 30 C° közötti hőmérsékleten végezhetjük, a kezelt vegyület mérsékelt stabilitása folytán azonban előnyös, hà a reakcióközeget 0 C° és -/5 C° közötti hőmérsékletre hűtjük le. A nyers imint vízben szuszpendáljuk. oly módon, hogy a szuszpenzió 4—20%-os koncentrációjú legyen, majd erős savval, pl. sósavval, kénsavval vaigy foszforsavval 1 és 2 közötti pH-értékre savanyítjuk a szuszpenziót. Ezután keverés közben valamely vízzel nem keveredő és a felszabaduló aldehid oldására képes oldószert adunk hozzá; ilyen oldószerként alkoholok, mint butanol, pentánotok vagy metilizobutilkarbinol, észterek^ mint etilacetát vagy amilacetát, klórozott szénhidrogének, mint kloroform vagy metilénklorid, vagy pedig szénhidrogének, mint benzol vagy hexán, alkalmazhatók. Szennyezett iminek esetében célszerű olyan jó oldószereket alkalmazni, mint a butanol vagy a metilizobutilkarbinol, minthogy ezek bizonyos szennyezéseket is ki képesek oldani a vizes közegből és így a 6-amino-penicillánsavat tisztább állapotban nyerhetjük. Az elegyet 15—60 percig kevertetjük, majd az esetleg jelenlevő oldhatatlan anyagokat kiszűrjük és a vizes fázist különválasztjuk. Ha a vizes fázis pH- értékét 3 és 5 közé, előnyösen 3,3 és 3,6 közé állítjuk be valamely alkálikus szer, mint pl. nátriumkarbonát, káliumkarbonát vagy ammónia segítségével, a 6-amino-penicillánsav kikristályosodik a vizes oldatból; ezt elkülönítjük és megszárítjuk. Az anyalúg betöményítése (alacsony hőmérsékleten, csökkentett nyomás alatt) és a fentebb említett pH-értékre való újbóli beállítása útján a termék második frakcióját nyerhetjük ki. A fermentációs leveknek a fentebbi módszerekkel való kezelése útján általában 70—95%-os tisztaságú 6-amino-penicillánsavhoz juthatunk. Tiszta terméket átkristályosítás útján nyerhetünk; a tisztítandó 6-amino-penicillánsavat vízben szuszpendáljuk, majd a pH-értéknek valamely alkálikus szerrel 7 körülire történő beállítása útján oldatba visszük, az oldatot leszűrjük és valamely ásványi vagy szerves savval, pl. sósavval, foszforsavval, kénsavval vagy ecetsawal 3 és 5 közötti pH- értékre savanyítjuk, amikor is a 6-amino-penicillánsav kristályos alakban kiválik az oldatból. A találmány szerinti eljárás gyakorlati kiviteli módjait közelebbről az alábbi példák szemléltetik; megjegyzendő azonban, hogy a találmány köre egyáltalán nincsen ezekre a példákra korlátozva. A példákban említett oldatok és száraz termékek 6-amino-penicillánsav-tartalmát biológiai titrálás útján határoztuk meg, a. 6-amino-penicillánsavnak fenoxiecetsav-kloriddal való kezelés útján V-penicillinné történő átalakítása után. 1. példa: 425 liter fermentációs levet, amelynek pH-értéke 6,3, szűrési segédanyag hozzáadása után leszűrünk és a szűrőlepényt vízzel mossuk. Ily módon 440 liter szüredéket kapunk, amely 445 mg/liter 6-amino-penicillánsavat tartalmaz. Ehhez a szüredékhez 23 C° hőmérsékleten hozzáadjuk 2,1 kg szalicilaldehid 6 liter acetonnal készített oldatát. Az elegyet 30 percig kevertetjük, majd +1 C° hőmérsékletre hűtjük le. A képződött imin extrakcióját emulgáló-dekantáló centrifugákból álló kétfokozatú ellenáramú berendezésben végezzük. A berendezésbe az alábbi anyagokat tápláljuk be, a megadott ütemben: az imint tartalmazó vizes oldatot 200 liter/óra sebességgel, etilacetátot 80 liter/óra sebességgel, valamint 2 n kénsavoldatot oly mennyiségben, hogy a rendszer pH-értékét 2,5-ön tartsuk. Az extrakció befejeztével 160 liter etilacetátos kivonatot kapuik, amelyet szűrési segédanyagon keresztül történő leszűréssel derítünk. Ezután a kivonatot folytonos visszakeringtető bepárlóberendezésben, csökkentett nyomás alatt, 20 C°-ot meg nem haladó hőmérsékleten 10 liter térfogatra pároljuk be. Az így kapott koncentrátumhoz 2,5 liter vizet adunk és az elegyet kevertetjük, miközben pH-értékét 2 n ammóniaoldat hozzáadása útján 7-re állítjuk be; 15 perces keverés után az elegyet állni hagyjuk és a különvált vizes réteget elválasztjuk; a szerves oldószeres réteget ismételten kivonatoljuk 7 pH-értéken, először 2 liter, majd 1,5 liter vízzel. A vizes kivonatokat egyesítjük, az így kapott vizes oldatot keverés közben 1,5 liter vizes 10%-os dibenziletiléndiamin-acetát oldattal elegyítjük. A kapott csapadékot elkülönítjük, vízzel mossuk, majd vákuum alatt megszárítjuk. Ily módon 370 g mennyiségben kapjuk a 6-amino-penicillánsav szalicil-iminjének dibenziletiléndiamin-sóját, amely ilyen nyers állapotban 121 g tiszta 6-amino-penicillánsavat tartalmaz; ez azt jelenti, hogy az iminsó 60%-os tisztaságú. A kapott nyers termék az alábbi fizikai jellemzőket mutatja: op. (Kofler szerint) 100—105 C° (boml.) [a]Q, = 125° + 5° (c= 1 metanolban). 200 g fenti nyers dibenziletiléndiamin-iminsót 1 liter vízben szuszpendálunk. A szuszpenzióhoz 1,1 liter metilizobutilkarbinolt adunk és az elegyet 0,45 liter 3 n sósavoldat hozzáadása útján 1,5 pH-értékre savanyítjuk. 10 perces keverés után a jelenlevő oldhatatlan anyagot (48 g inaktív termék) kiszűrjük és a két fázist különválasztjuk;
