150099. lajstromszámú szabadalom • Eljárás prednozolon előállítására
Megjelent: 1963. május 31. MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL 150.099 SZÁM GO-834. ALAPSZÁM jíémzetközi osztály: ;• C 07 c6 Magyar osztály: 12 o 25 SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Eljárás prednizolon előállítására Gyógyszeripari Kutató Intézet, Budapest Feltalálók: dr. Wix György orvos (66%), Albrecht Károly gyógyszerész (24%) és dr. Magyar Károly vegyész (10%) A bejelentés napja: 1961. november 9. Ismeretes, hogy a zF-kettőskötést' tartalmazó szteroidok (prednizon, pfecmizolon, dexametazon stb.) kiemelkedő gyógyászati jelentőséggel bírnak. Ismeretes az is, hogy szteroidokban a zP-kettős• kötést kémiai és mikrobiológiai módszerekkel ígyaránt ki lehet alakítani. Igen előnyösen alkal. mázhatok ilyen célból a mikrobiológiai oxidációs műveletek. A mikrobiológiai oxidációk rendszerint több fokozatban játszódnak le. Annak érdedben, hogy a kívánt terméket maximális hozami. m äl>,nyerjük, az oxidációt bizonyos fokozatnál le "kell állítani, az értéktelen túloxidált termékek ;" "^étkezésének meggátlása. érdekében. Ilyen meg_ ,Wdást . szteroidok mikrobiológiai átalakításával '• «5>csolatban 148.093 és H9.Ö63 1. sz. magyar sza«öálmainkban már leírtunk. ,,,_ ; w-; .; ^-.'; ^szteroidok zf-kettőskötésénék mikrobiológiai •lJ !v§PV.. történő kialakítására különösen alkalmas fr^Corynebacterium simplex törzs '(US 2,837.464 '^szabadalom). Korábbi vizsgálatainkban kimu«ttuk, hogy ezen törzs zl'-dehidrogenáz enzimje adaptív természetű (149 062 1. sz. magyar szabadalom). -Ujabb vizsgálataink, során arra. a meglepő eredmenyre jutót tűrik, hogy ha Corynebacterium ^plex tenyészetét 17-es szénatomon oldalláncot neöl tartalmazó szteroidokhoz adaptál tatjuk, majd "tenyészethez a fehérje-szintézist gátló körülméy^k között hidrokortizont adagolunk, ez igen jó riíieléssel alakul át prednizolonná, amely utób-V hosszú ideig változatlanul van jelen a tenyéi\? n' ^ e ^át a kívánt mértéken túl nem oxidá-y®&» Ugyanakkor az adaptáltatás nélkül, szokass; módon párhuzamosan elkészített kontroll tenyészetekben a keletkezett prednizolon a nem kívánatos enzimek jelenléte folytán oxidatív lebontást szenvedett. így eljárásunk szerint dolgozva a hasznos átalakításhoz szükséges /F-clehidrogenáz enzim kellő mértékben keletkezik, ugyanakkor azonban a túloxidációért felelős enzimek nem jöhetnek létre. Eljárásunk alapját azon önálló és eredeti felismerésünk képezi, hogy a túloxidációért felelős, nem kívánatos enzimek adaptív természetűek. E szerint amikor a hidrokortizonból a zP-dehidrogenáz enzim hatására prednizolon keletkezik, a jelenlevő két szteroid dioxiaceton-oldallánca elindítja annak az adaptív enzimnek szintézisét is, amely a dioxiaceton-oldallánc oxidálása révén a prednizolon oxidatív lebontásáért felelős. Felismerésünk tartalma" az, hogy a szteroid-váz önmagában nem indukálja a mikrobiológiai átalakításban szerepet játszó valamennyi enzim adaptív kialakulását, hanem ahhoz, hogy bizonyos funkcionális csoportokat lebontó enzimek keletkezhessenek, szükséges ezen funkcionális csoportok jelenléte a szteroid vázon az adaptáltatási időszak alatt. Felismerésünkkel eddig ismeretlen elvet vezettünk be a mikrobiológiai átalakítások biokémiájába: a szelektív adaptáció elvét, amely szerint az átalakítási láncban csak a szükséges enzimek szintézisét végeztetjük el és a nemkívánatos enzimek keletkezését meggátoljuk. Különösen nehéz az optimális átalakítás elérése akkor, ha több egymást követő mikrobiológiai átalakítást szukcesszíve végzünk el úgy. hogy a közbenső terméket nem izoláljuk. Ilyen kombinált fermentációs eljárás például a Reichstein-fé-
