149538. lajstromszámú szabadalom • Eljárás cianokobalamin-monokarbonsav előállítására
Megjelent: 1962. július 31. MAGYAK NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS ^ ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL 149.538 SZÁM " 30. h. 1-8 OSZTÁLY — GO-749. ALAPSZÁM SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Eljárás cianokobalamin-monokarbonsav előállítására Gyógyszeripari Kutató Intézet, Budapest (70%) CHINOIN Gyógyszer- és Vegyészeti Termékek Gyára, Budapest (30%) Feltalálók: Dr. Simon Ágoston (Chinoin) (30%), Mertháné, dr. Kelemen Ágnes (35%), dr. Borsy József (10%), dr. Csányi Endre (25%) A bejelentés napja: 1960. március 29. Ismeretes, hogy propionibacteriumos Bi 2-vitamin fermentációknál nem csak cianokobalamin, hanem különböző Bi 2-vitaminnal rokon vegyületek, ún. faktorok is keletkeznek kisebb-nagyobb mennyiségben. Ezek között a faktorok között vannak olyanok, melyek a Bi 2-vitaminnal azonos hatásúak, mások pedig vitamin hatást nem mutatnak, sőt vannak kifejezetten a Bi 2-vitaminnal antagonista hatású vegyületek is. Ismeretes továbbá, hogy a Bi2-vitaminból parciális hidrolízis útján előállíthatunk cianokobalaminmonokarbonsavat, amely a fent említett faktorok egyike. A kémiai hidrolízis eredménye három biológiailag nem egyenértékű monokarbonsavizomer keveréke. Megállapítottuk, hogy a cianokobalaminmonokarbonsav-izomerek egyike, amely a B12-vitaminnal antagonista hatású, igen eredményesen alkalmazható polycythaemia gyógyítására, 1—3 mg-os intramuszkuláris dózis egy hónapon keresztül való adagolása a vörösvérsejtek számát 7—10 millióról normálisra csökkentette. Ez a termék alkalmazható továbbá a krónikus myeloid leukaemia kezelésekor is. Alkalmazásakor toxikus mellékhatás nem tapasztalható. A B12-vitaminnal rokon vegyületek vizsgálatakor azt találtuk, hogy a Bi2-vitaminnal antagonista hatású faktor, mely a Propionibacterium tenyészetekben általában legfeljebb csak nyomokban fordul elő, egy általunk használt Propionibacterium shermanii törzs tenyészetében viszonylag igen tetemes mennyiségben található. - Ez a törzs egyéb ismeretes törzsektől morfológiailag annyiban különbözik, hogy már fiatal tenyészetekben is a kokkoid alakok vannak túlsúlyban, szemben a pálcikaszerű, elágazó polimorf elemekkel. Tenyésztési sajátságai tekintetében nem találtunk eltérést az általunk ismert többi Propionibacterium shermanii törzsektől. Ezt az új törzset PBS 77 jelzéssel láttuk el és a tenyészetet az O. Közegészségügyi Intézetnél 1960. október 13. 601 013, 1. sz. alatt letétbe helyeztük. Ha a PBS 77 törzset a szokásos módon 5,6-dimetilbenzimidazol jelenlétében tenyésztjük, akkor 2—3 gamma/ml Bi2 -vitarnin mellett 0,2—0,6 gamma-ml mennyiségben jelentkezik a Bi2-vitaminnal antagonista faktor. Ezt a faktort célszerűen a Bi 2-vitamin koncentrátumból különítjük el. A Bi2-vitamintól való elválasztását olyan alapon végezhetjük, hogy e faktor, ellentétben a semleges Bi2-vitaminnal, savanyú jellegű. E faktor papírkromatográfiával való azonosítással és B-vitaminná való átalakítással cianokobalamin-monokarbonsavnak bizonyult. A fenti észlelések alapján a találmány tehát olyan eljárás, B12-vitamin előállítása során Propionibacterium shermaniival történő fermentálásnál adódó, a Bj 2-vitaminnal antagonista hatású cianokobalaniin-monokarbonsav előállításra, melyre az a jellemző, hogy a fermentáláshoz PBS 77 jelzésű Propionibacterium shermanii tenyészetet használjuk és e törzzsel végzett, fermentálásnál adódó fermentléből vagy célszerűen e fermentié feldolgozásánál nyert B12-vitamin koncentrátumból nyerjük ki az antagonista natású cianokobalamin-momokarbonsavat. >
