149062. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a szteroidok mikrobiológiai oxidációjára

149.062 3 3. sz, táblázat Tenyészet kora órákban az 1. fermentor 2. fermentor adagolás után 0,210 0,336 0 0,210 0,336 0,280 0,555 2 0,210 0,336 0,280 0,555 6 0,560 0,690 16 0,560 1,200 1,430 1,080 8 0,600 0,780 18 0,680 1,280 1,680 1,120 10 0,750 0,940 20 0,720 .1,400 1.600 1.120 12 0,810 1,030 22 0,860 1,200 14 0,840 1,100 24 0,90« 1,240 16 0,960 1,260 26 28 1,060 1,000 *» 1,340 1,400 Az előzetesen adaptált organizmus tömeggel te30 1,020 1,480 hát magas szteroidkoncentráció esetében is gyor-32 1,040 1,520 sabban érhető el és magasabb a prednizolom termelés, mint nem adaptált tenyészettel. 4. példa: Az 1. példában megadott módon hígítottuk meg a. Corynebacterium simplex tenyészetet. 4 db 5-literes fermentort készítettünk. Az első fermentorhoz 4 g hidirokortizont adagoltunk és nem adaptált tenyészetet alkalmaztunk. A második fermentorból a 4 g hidrokortizon adagolása után 16 órás levegőztetéssel kihajtottuk az acetont és nem adaptált tenyészetet adtunk a fermentorhoz. A harmadik fermentoT esetében 4 g hidrokortizon adagolás után kihajtottuk 16 órás levegőztetéssel az acetont, majd a 3. példában megadott módon 8 órán át adaptáltatott tenyészetet adagoltunk hozzá. A negyedik f érmen tornál pedig nem hajtottuk ki a 4 g hidrokortizon adagolása után a tenyészetből az acexont, de viszont adaptált tenyészetet alkalmaztunk. Az eredményeket a 4. sz. táblázat mutatja. 4. sz. táblázat aj c o g o o o •+-> <~ "> "c c 4-J c 0) 5 *ti <XJ 0) a Cü N w CQ r~* XI o s s £ *CU >4 tU3 !>> •cö cö s Cü 3 Cl S-ö e.^ CH SJ ^~i 41 •o a s-t H r-M CN CO •* 0 0,040 0,049 0,050 0,042 2 0,168 0,320 0,500 0,432 4 0,200 0,520 0,720 0,560 6 0,240 0,700 0,940 ( 0,640 8 0,280 0,880 1,000 0,720 10 0,376 0,920 1,080 0,840 12 0,440 1,072 1,180 0,936 14 0,520 1,160 1,360 1,028 A táblázat adatai szerint a tenyészetből 4 g/5 liter hidrokortizon koncentráció esetén, ha nincs kihajtva az aceton és előzetes adaptáció nem történt, akkor lassan indul az oxidáció és nem érhető el jó termelés. Ha az aceton ki lett hajtva a tenyészetből és a tenyészet nem volt előzetesen adaptáltatva, lassabban lehet elérni, de gyengébb termelést, mint abban az esetben, ha a fermentorban, előzetes aceton kiűzés. után, adaptált tenyészetet alkalmazunk. Adaptált tenyészetet alkalmazva úgy, hogy a fermentorból előzetesen nem űzzük ki az acetont, elhúzódó lassú átalakulás után jó termelés érhető el. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás zJl-es kettőskötést tartalmazó szteroidok előállítására z)4,3-keto-csoportot tartalmazó szteroidokból, melyre jellemző, hogy az oxidáció elvégeztetéséhez előzetesen adaptáltatott és meghatározott — előnyösen 0,010—0,015 gramm% — szárazanyagtartalmú tenyészetet használunk és 0.5 g/liternél nagyobb, előnyösen mintegy 0,8—1,0 g/liter szteroidikoncentráció mellett végeztetjük el a biooxidációt. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy átalakító mikroorganizmusként Goryneibactariurn simplexet alkalmazunk. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy átalakítandó szteroidként hidrokortizont alkalmazunk. 4. Az 1., illetve 2., illetve 3. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, melyre jellemző, hogy az átalakítandó szteroidot szerves oldószerben oldva visszük be abba a steril vízbe, amelyben az oxidálást végeztetni fogjuk és az oldószert a baktériumtenyészet hozzáadása előtt levegőztetéssel kiűzzük. A Klarissen felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 615864. Terv Nyomda, Budapest V., Balassi Bálint utoa 21-23.