148444. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszilocibin és pszilocin kinyerésére
148.444 5 •8. példa: Pszilocibin előállítása Psilocybe cearulescens Murrill var. Mazatecorum Heim színtenyészetei."ből. A tenyésztési közeget úgy készítjük elő, hogy Eriss világos sörcefrét komlóadalék nélkül vízvezetéki vízzel 4% szárazanyag tartalomra felhígítunk. Az oldat minden literéhez az alábbi anyago- kat adj uk: Kukoricalekvár (szilárd) 10,0 g FeS04 • 7-H2 0 0,00834 g Ca(OH)2 0,20 g K2 HP0 4 0,20 g NH4OH 0,25 g Agar-agar 2,0 g Az oldat pH értéke: 5,4. Ezt a tápoldatot a 2. példa szerint sterilizáljuk, "' Mexikóból származó; Psilocybe caerulescens Murrill var. Mazatecorum Heim színtenyészetének micélium-szuszpenzió jávai beoltjuk és a keletkezett kultúrákat sötétben 26°-on inkubáljuk. Az oldat minden litere után 48 nap elmúltával 20,4 g szárított gombaanyagot takarítunk be. Ebből az anyagból a hatóanyagokat a 2. példában ismertetett módon különítjük el és tisztítjuk. A tápoldat 10 literes adagjából á kitermelés: 449 mg pszilocibin, ami a szárított gombaanyagra számítva 0,22%-nak felel meg. Ebben az adagban pszilociní nem találtunk. 7. példa: Pszilocibin előállítása természetes eredetű Psilocybe Zapotecorum Heim gombából A mexikói „pays chatino"-ban a Psilocybe Zapotecorum Heim gomba összegyűjtött és kiválasztott érett terméstesteit kíméletesen megszárítjuk (maradék 42,4 g), finomra őröljük és metanollal kirázzuk, amint azt az 1. példában ismertettük. Az egyesített metanolos kivonatokat vákuumban szárazra bepároljuk. A maradékot egyébként az 1. példa szerint dolgozzuk fel. A hozam 212 mg tiszta pszilocibin, ami 0,5%-nak felel meg. A kezelt gombaanyag pszilocint nem szolgáltatott. 8. példa: Pszilocibin előállítása Psilocybe Zapotecorum Heim színtenyészeteiből. Friss, világos sörcefrét komlóadalék nélkül vízvezetéki vízzel a szárazanyagtartalom. 4,5%-ára felhígítunk. Ennek az oldatnak minden literéhez a következő anyagokat adjuk: FeS04 Kukoricalekvár (szilárd) NH4OH K2HPO4 0,00834 g 10,0 g 0,30 g 0,30 g Agar-agar 2,0 g Ezt a kultúrközeget a 2. példa szerint sterilizáljuk és olyan színtenyészet micélium szuszpenziójával oltjuk be, amelyet a mexikói „pays chatino" körzetből szerzett Psilocybe Zapotecorum Heim érett terméstestei spóráiból nyertünk. Sötétben 24°-on 57 napig inkubálunk, amire 25 literes adagból 430 g szárított gombaanyagot kapunk, vagyis literenként 17,2 g-ot. A hatóanyagokat ebből az anyagból a 2. példa szerinti eljárással állítjuk elő. Hozam: 903 mg tiszta pszilocibin, ami 0,21% tartalomnak felel meg, a szárított gombaanyagra vonatkoztatva. Pszilocint nem kaptunk. 9. példa: Pszilocibin és pszilocin előállítása természetes eredetű Psilocybe Aztecorum Heim gombából. Mexikóban az azték vidéken (a Popokatepetelen, 3300—3500 m magasságban a tenger színe fölött) a Psilocybe Aztecorum Heim gombának összegyűjtött érett terméstesteit kíméletesen meg* szárítjuk, finomra őröljük és metanollal teljesen kivonatoljuk, amint azt az 1. példában ismertettük. A kivonatokat egyesítjük és vákuumban szárazra bepároljuk. A maradékot az 1. példa szerint a hatóanyagokra feldolgozzuk. A hozam 570 mg tiszta pszilocibin és 47 mg pszilocin, ami 0,2% ill. 0,017% tartalomnak felel meg a megszárított gombaanyagra (285 g) vonatkoztatva. 10. példa: Pszilocibin és pszilocin előállítása Psilocybe Aztecorum Heim színtenyészeteiből. A tápoldatot a következőképpen állítjuk elő: Malátakivonat 100 g FeS04 -7H 2 0 0,00417 g ZnS04 -7H 2 0 0,00172 g Ca(N03 ) 2 1,0 g KH2 P0 4 0,25 g MgS04 • 7H2 0 0,25 g KCl 0,125 g Agar-agar 2,0 g Az oldat pH értéke: 5,5. Vízvezetéki vízzel 1000 ml-re feltöltve. A tápoldatot autoklávban 25 percig 108°-on sterilizáljuk. Az oldat 1 literét a Psilocybe Aztecorum Heim 2 ml szuszpenziójával beoltjuk. Ezt az oltóanyagnszuszpenziót a 2. példa a) pontja szerint állítjuk elő. A kultúrákat 45 napig sötétben 24°on inkubáljuk és úgy takarítunk be, mint ahogyan azt a 2. példa c) pontjában ismertettük. A hozam 10 liter tápoldatból 86,5 g szárított micélium. A legfinomabbra őrölt micéliumot 1/2 óra hosszat 1 liter 80%-os vizes etanollal szobahőmérsékleten kirázzuk. Miután a maradékról leszűrtünk, ezt még háromszor azonos módon extraháljuk. Az egyesített kivonatok besűrített maradékát (8,9 g) a zsírszerű kísérőanyagok és inaktív ballasztanyagok eltávolítására egymásután kétszer 100 ml petroléterrel, kétszer 80 ml kloroformmal és kétszer 50 ml acetonnal kivonatoljuk. Maradékként 5,6 g vízben oldható port kapunk, melyet 6 ml vízben oldunk. Alapos kavarás közben az
