148273. lajstromszámú szabadalom • Eljárás adrenokortikotrop hormon (ACTH) tisztítására

2 148.273 ki centrifugáljuk. A felülúszóhoz 27,5 g NaCl-t adagolunk és äz oldatot a só felodódásig kevertetjük. A kisózásra levált hormont azután lecentrifugáljuk. Az így kapott csapadékot feloldjuk 30 ml 2%-os ecetsavban és 0 C° és —5 C° közötti hőmérsékleten, állandó keverés mellett hozzáadunk 50%os triklórecetsavias oldatból 4,9 ml-t, amivel az oldat triklórecetsiav tartalmát mintegy 7%-ra állítjuk be. Az ekkor leváló csapadékot kicentrif ugarjuk és a felülúszót eldobjuk. A csapadékot —12 C°-os absz. acetonnal ismételten eldörzsöljük és centrifugáljuk. Ezt a műveletet mindaddig végezzük, inig a mosó aceton már nem tartalmaz triklórecetsavat. A csapadékot ezután 20 ml 0,1 n HCl-ben feloldjuk és 15-szörös térfogatú —10 C°-os absz. acetonnal kicsapjuk. 24 órán át ülepedni hagyjuk 0 C° és —5 C° közötti hőmérsékleten, majd centrifugáljuk. A csapadékot nuccson, majd vákuum exszikátorban kiszárítjuk. A kitermelés 90—120 mg ACTH purum, mely 5—7 E/mg hatóértékű. Adíuretin és Oxitocin tartalma ACTH egységenként nem haladja meg a 0,1 E-t. 2. 2 g purum ACTH-t (2,5 E/mg) feloldunk 200 ml 2%-os ecetsavban, 0 C° és —5 C° közötti hőmérsékleten állandó keverés mellett hozzáadunk 50%-os triklórecetsav oldatból 32,5 ml-t, hogy az oldat mintegy 7%-os legyen triklórecetsavra nézve. Az ekkor leváló csapadékot lecentrifugáljuk, a felülúszót eldobjuk. A csapadékot —12 C°-os absz. acetonnal ismételten eldörzsöljük és centrifugáljuk. Ezt a műveletet mindaddig végezzük, míg a mosó aceton »már nem tartalmaz triklórecetsavat. A csapadékot ezután 130 ml 0,1 n HCl-ben feloldjuk és 15-szörös térfogatú —10 C°-os absz. acetonnal kicsapjuk. 24 órán át ülepedni hagyjuk 0 C° és —5 C° közötti hőmérsékleten, majd centrifugáljuk. A csapadékot absz. acetonnal nuccson, majd vákuum exszikkátorban kiszárítjuk. Végtermék 550—700 mg, mely 5—7 E/mg hatóiértékű. Adíuretin és Oxitocin tartalma ACTH egységenként nem haladja meg a 0,1 E-t. Szabadalmi igénypont: Eljárás a 144.928 1. sz. törzsszabadalom 1—3. igénypontjai szerinti eljárás továbbfejlesztésére, az ACTH tisztítására, — melynél a nyers hormonnak szerves savval megsavainyított oldatából a hormont NaCl-al kicsapjuk, — melyre jellemző, hogy a NaCl-al leválasztott hormont szerves sav híg vizes oldatában előnyösen ecetsav 2%-os oldatában feloldjuk és 5—25%-nyi, előnyösen mintegy 7%-nyi mennyiségű triklórecetsavval az ACTH-t kicsapjuk, a csapadékot szerves oldószerrel 0 C°-és —20 C° közötti hőmérsékleten,, előnyösen —12 C°-on absz. acetonnal mosva a triklóreeetsavat eltávolítjuk és a tisztított ACTH-t ismert módon elkülönítjük. A kiadásért Telel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó Igazgatója 610433. Terv Nyomda, Budapest V., Balassi Bálint utca 21-23,