147363. lajstromszámú szabadalom • Eljárás mikrobiológiai hatású polipeptid származékok előállítására

Megjelent: 1960. augusztus 15. ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS 147.363. SZÁM 30. h. 1—8. OSZTÁLY — Cl—276. ALAPSZÁM SZOLGALATI TALÁLMÁNY Eljárás mikrobiológiai hatású polipeptid-származékok előállítására CHINOIN Gyógyszer és Vegyészeti Termékek Gyára Rt., Budapest Feltalálók: Dr. Kovács Kálmán oki. vegyészmérnök (45%), Kótai András oki. vegyész (30%), dr. Szabó István orvos (25%), mindhárman Budapest A bejelentés napja: 1958. június 5. Ismeretes, hogy némely bázisos aminosavból felépült polipeptid bizonyos mértékig virosztatikus és bakteriosztatikus hatású. Ezen polipeptidek kemoterápiás, felhasználását azonban igen megnehezíti, hogy élő szervezetben proteolitiikus enzimek hatására néhány óra alatt lebomlanak. Ismeretes továbbá, hogy «-poli-L^glutaminsav metilésztert etiléndiamdnhidráttal reagáltatva (Kovács, Dénes, Kótai, Polgár; Naturwissenschaften 1955. 628. o.) olyan termékhez jutunk, mely az enzimhatásokkal szemben ellenállóbb. Azt találtuk, hogy a fehérjebontó enzimek hatásának ellenálló virosztatikus, bakteriosztatikus ill. baktericid bázisos polipeptidek állíthatók elő olyan módon, hogy a-poli-L-glutami;nsav-y-etilésztert, vagy «-poli-L-glutaminsav^anhidridet vagy anhidropoliaszparaiginsavat, ill. savszármazékát, vagy y-poli-D-glutamiinsavat. ill. savszármazékát, vagy poli-amino-adopinsavat, ill. savszármazékát etiléndiaiminnal vagy putrescinnel, vagy valamely alifás Ni-mono vagy Ni-dialkilezetit diaminnal, vagy nevezett diaminok keverékével reagáltatunk, vagy tt-poli-L-glutammsavat, ill. savszármazékát putrescinnel, vagy valamely alifás N^mono vagy Ni-dialkilezett diaminnal, vagy nevezett diaminok egymás közti viagy etiléndiaminnal alkotott keverékével reagáltatunk. Az aminokat szabad bázis formájában, ill. hidrátjuk alakjában alkalmazhatjuk. A reakció kivitelezése szempontjából előnyös, ha a poilipeptidek szabad karbonsav csoportok helyett olyan karbonsav származék-csoportokat tartalmaznak, amelyek aminők acilezésére alkalmasak. Ilyenek pl. a karbonsav-észter, anhidrid-, ha- , logenid-, stb. csoportok. Igen előnyös az; alkilészter alkalmazása. A találmány szerinti eljárás foganatosítása úgy történik, hogy a polipeptideket ill. azok megfelelő származékait közvetlenül összehozzuk a diaminokkal, vagy azok keverékével és a reakció elegyet szüség szerint megmelegítjük. Ha két- vagy többféle diaminnal reagáltatunk — mivel azok reakciókészsége gyakran nagyon különböző — nem egyszerre adjuk az egyes komponenseket a polipeptidszármazékokhoz, hanem növekvő reakciókészségük sorrendjében, meghatározott időközönként. Az időközök változtatásával változtatható az, ugyanahhoz a polipeptid-lánchoz kapcsolt egyes arnino-komponensek mennyiségi aránya. Az amin vagy aminők feleslegét a reakció végrehajtása után desztillációval és/vagy oldószeres kimosással távolítjuk el. Általában igen előnyös a diaimint a karbonsavcsoportokra számítva legalább ötezörös feleslegben alkalmazni. Példák: 1. 9 g finoman porított a-poli-L-glutaminsav-y-etilész:tert 50 ml etiléndiaminmonohidráttal 134 C°-os olajfürdőben melegítünk. Az oldhatatlan részeket szűrjük, 300 ml etanoilal hígítjuk a reakcióelegyet, majd 300 ml éterrel kicsapjuk a bázist. Centrifugálás és éteres mosás után az anyagot fehér por alakjában nyerjük. A kitermelés mintegy 50%-os. 2. 4 g finoman porított a-poli-L-glritarninsav-y-metilésztert 20 ml vízmentes putrescinnel 1 órán át forralunk. A putrescin felesleget 200 ml éterrel kimossuk. A bázis porszerű termék alakjában kiválik. Centrifugáljuk és exsiccatorban szárítjuk. A kitermelés Kb. 50%-os. 3. 7,2 g DLnanhidropoliasziparaginsavat 24 ml vízmentes etiléndiaminban oldunk, 60—70 C°-ra melegítjük másfél órán át. Az oldhatatlan részeket szűrjük. 200 ml etanoilal hígítjuk a reakcióelegyet, majd 200 nil éterrel kicsapjuk a bázist. Centrifugálás és éteres mosás után az anyagot ofckerszínű por alakjában nyerjük. Kitermelás kb. 60%.