147106. lajstromszámú szabadalom • Eljárás delta16-os kettőskötést tartalmazó szteroidokból
Megjelent: 1960. július 1. ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS 147.106. SZÁM 12. p. 11—17. OSZTÁLY — GO-628. ALAPSZÁM SZOLGALATI TALÁLMÁNY Eljárás A ' /-androsztadiéndion előállítására A !6 -os kettőskötést tartalmazó szteroidokból Gyógyszeripari Kutató Intézet, Budapest Feltalálók: Dr. Wix György (80%) és dr. Rados Mária (20%) A bejelentés napja: 1958. június 26. A A'^-androsztadiéndion a félszintetikus ösztron előállítási eljárás kulcsanyaga. Előállítása az eddig ismert eljárások szerint viszonylag drága alapanyagokból, pl. progesterónból történik. Vizsgálataink során megállapítottuk, hogy a A ' 6 -os kettőskötést tartalmazó szteroidok jó termeléssel alakíthatók át Al,4 -androsztadiéndionná. A A' (> -os kettőskötést tartalmazó szteroidok, így pl. a AA,,f) ~ pregnadién-3-01-20-on vagy a A' 6 -allopregnéndion, előnyösen állíthatók elő nagy mennyiségben rendelkezésre álló, olcsó növényi szteroidalkaloidokból, pl. szolaszodinból. A mikrobiológiai átalakítást egy általunk izolált Fusarium caucasicum törzzsel végezzük. Ez a mikroorganizmus az általánosan ismert táptalajokat és tenyésztési körülményeket alkalmazva, igen gyorsan képes a szteroidokat oxidálni. Előnyös tulajdonsága az, hogy amennyiben az átalakítandó szubsztratum a 17-es szénatomnál a progeszterontól eltérő szerkezetű, akkor is elvégzi a meti.1-keton oldallánc lebontását, illetve a A',4-es szerkezet kialakítását. Ez igen jelentős új felismerés, miután Víscher és Wettstem megállapították, hogy a progesztercníól a 17-es szénatomnál eltérő szerkezet gátolja a A1 , 4 - androsztadiéndion keletkezését (Experientía 9371. 1953.). Eljárásunk egyaránt kivitelezhető, ha az átalakítandó A' 6 -os szteroid az A—B gyűrűkben további kettőskötést tartalmaz, vagy pedig telített. Találmányunk eljárás A 'l , 4 -androstadiendion előállítására fermentációs úton, Fusarium caucasicum törzzsel, amelyre jellemző, hogy szubsztrátumként Alü-os kettőskötést tartalmazó szteroidokat alkalmazunk. Eljárásiunk kivitelezését a következő példák szemléltetik: 1. példa: Burgonyás ferdeagarról készített Fusarium caucasicum spőraszuszpenzióval oltottunk be 100 ml steril Richárd-féle táptalajt 500-as Erlenmeyerlombikban. A beoltott lombikot 200-as fordulatszámú rázőasztalra tettük 28°-os- termosztát-szobában. Két nap múlva az így kapott tenyészet 5 miével oltottunk be 500-as Erlenmeyer-lombikban 100 ml olyan táptalajt, amely literenként 15 g peptont, 6 g kukoricalekvárt és 0,05 g glükózt tartalmazott és a pH-ját sterilezés előtt 6,5-re állítottuk. 24 órás 28°-on történő rázatás után a tenyészethez 20 mg A ' b -allopregnéndiont adagoltunk sterilen 2 ml acetonban feloldva. A tenyészetben a keletkező androsztadiéndion koncentrációját kvantitatív Kober—Haenni reakcióval íMizsei A., Szabó A., dr. Wix Gy., GO—545 sz. szab. bej. 1957. szeptember 4.) mértük és a 24. órára 48%-os átalakítást állapítottunk meg. Mérésünk eredményét a kontrollként elvégzett papírkromatográfiás vizsgalatok megerősítették. 2. példa: Az 1. példában leirt módon adagoltunk a tenyészethez 20 mg A5 , iö -pregnadién-3-01-20-ont. A tenyészetben a megadott módon meghatározva, az androsztadiéndion koncentrációt, 20 órás átalakítási idő után 52%-os termelést kaptunk. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás A 'Aandrosztadiéndion előállítására, fermentációs úton, Fusarium caucasicum törzzsel, azzal jellemezve, hogy szubsztrátumként AH,-os kettőskötést -tartalmazó szteroidokat alkalmazunk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy átalakítandó szteroidként A 5 ,' b -pregnadién-3-01-20-ont alkalmazunk. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy átalakítandó szteroidként As '"-allopregnéndiont alkalmazunk. kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvi. 601093. Terv Nyomda, Budapest V., Balassi Bálint utca 21-23
